L6565 小鼠白血病克隆细胞系 实验室复苏

L6565 小鼠白血病克隆细胞系 实验室复苏
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
Pcc4细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H2171细胞系；细胞传代方法：3-4天换液1次；细胞形态特性：聚团悬浮；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
Kit225-k6细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HEL 92.1.7细胞系；细胞传代方法：每周2-3次；细胞形态特性：成淋巴细胞；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞冻存复苏材料与方法步骤：常用的细胞冷冻贮存器为液氮贮存器，规格有35L和50L两种。使用时要注意以下几点：(1)一般两周需充液氮一次，至少一个月充氮一次。液氮温度达-196℃，使用时注意勿让液氮溅到皮肤上，以免引起冻伤。(2)液氮容器为双层结构，中间为真空层，瓶口有双层焊接处，应防止焊接部裂开。(3)在装入液氮时，要注意缓慢小心，并用厚纸卷筒或特制漏斗作引导，使液氮直达瓶底，如有专用液氮灌注装置则更好。若为初次使用，加液氮时更要缓慢，以免温度骤降而使容器损坏。细胞冻存时常备的材料有：0.25%胰蛋白酶，含10%～20%的血清培养液，DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油(121°C蒸气高压消毒)，2mL安瓿(或专用细胞冻存管)、吸管、离心管、喷灯、纱布袋(或冻存管架)等。主要操作步骤为：(1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养 液去掉，用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)。(2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为3×106～1×107/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装1～1.5mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入4℃冰箱中2～3小时，再移至冰箱冷冻室内3～4小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时，沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
L6565 小鼠白血病克隆细胞系 实验室复苏
细胞背景资料：详见相关文献介绍
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触YZ的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素CJ；血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存，并在2周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用75%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HMSC-he细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
TE14细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：食管鳞癌；男性
FRO细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：未分化甲状腺癌；男性
HeLa 229细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：宫颈癌；女性
Jurkat77细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
U266B1细胞系；细胞传代方法：1：3传代,2-3天传一代；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞背景资料：详见相关文献介绍
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细胞形态特性：详见细胞说明书
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞)，吹打不超过20次后(一般10次即可)，成小规模聚集(10个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打1h，等待单细胞悬液出现。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
U-138MG细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：星形细胞瘤；男性
DMS53细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
6-10B细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：鼻咽癌
HAEC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：主动脉；内皮细胞
HCT116[HCT116]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
COLO 320HSR细胞系；细胞传代方法：1：2传代。3天内可长满；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：半贴壁生长；细胞背景资料：该细胞1984年建系，源自一位33岁患有大肠腺癌男性经5-fuZL后的腹水。
NT2/D1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：畸胎瘤；肺转移；男性
SUDHL-5细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HT细胞系；细胞传代方法：每2-3天换液；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞背景资料：详见相关文献介绍
AC16细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：心肌
Pt K2细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
LIPF155C细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：胆管癌
MDA PCa 2b细胞系；细胞传代方法：1：2-1：4传代，2-3天换液1次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
RM-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：前列腺癌；C57BL/6
JB6细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：表皮；自发永生；BALB/c
NCI-H250细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：半贴壁；细胞背景资料：小细胞肺癌；男性
Jecket细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
ARH-77细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：淋巴母细胞样　；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
COLO205细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：该细胞系是1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水中分离的。该病人在取腹水样品前已用5-尿嘧啶ZL4~6周。角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性；产生CEA、IL10。
L6565 小鼠白血病克隆细胞系 实验室复苏
PY8119细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：乳腺癌；雌性；C57BL/6
HFLS细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：滑膜；成纤维细胞
HFLS细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：滑膜；成纤维细胞
EU-2细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：儿童急性髓系白血病
HepG2细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：该细胞来源于一名15岁的白人少年的肝癌组织。该细胞表达甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、转铁蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、纤溶酶原、补体C4、C3激活物、纤维蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、视黄醇结合蛋白；表达胰岛素受体和胰岛素样生长因子IGFⅡ的受体；该细胞具有3-羟基-3-甲酰辅酶A还原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未证明该细胞中有HBV基因组。
SK-MEL-31细胞系；细胞传代方法：1：4-1：6传代，2-3天换液1次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
T-HSC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肝星形细胞；SV40转化；SD大鼠
OVCA433细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：卵巢癌；女性
RCF细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：心肌；成纤维细胞
NCI-H2228细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代，每周2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HCC-2185细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H2122细胞系；细胞传代方法：1：3-1：4传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
MCM细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：心肌
NCI-H146细胞系；细胞传代方法：1：2—1：6传代，每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
BC-009细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HM1900细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：小胶质细胞
Mo7e细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：急性巨核细胞白血病；女性
Hat-78细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
OVCA433细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：卵巢癌；女性
NCI-H2342细胞系；细胞传代方法：1：2-1：6传代 ；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍