WPE-int 人正常前列腺上皮细胞系 常年复苏

WPE-int 人正常前列腺上皮细胞系 常年复苏
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H378细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：小细胞肺癌；胸腔积液转移；女性
OPM-2细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HPAEpiC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肺泡；上皮细胞
CHRF细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H2170[H2170]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
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细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结1：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结2：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过7%，大于5%，太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。5、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
NCI-H841细胞系；细胞传代方法：1：3—1：5传代，；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：混合型生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HUV-EC-C[HUVEC]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NRK-52E细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
33604细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：葡萄膜黑色素瘤；女性
SC-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：胚胎；自发永生
RPMI 1788细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：B淋巴细胞；EBV转化
CF-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
细胞培养实验中常见问题总结：1)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；2)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地2--3天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于4度的，则采用邮寄冻存细胞；3)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
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我常看到一个比较复杂的四步消化法，这个挺有意思，我也是次听说，应该是网友自己发展出来的方法，很有参考价值。但我估计这个方法可能对付少数非常怪异的细胞才需要这么复杂的程序。我目前养过的近300株细胞里面，还没遇到这么怪异的。比如Caco2其实是很好消化的细胞，不需要胰酶孵育即可，只是有点成片分布。不要以为成片分布是自己没养好，这个视细胞而定。如果和标准形态不一致，那可能是自己没消化好导致的，但如果消化方法正确，仍然成片分布，甚至完全吹打成单细胞悬液，贴壁后仍然成片分布，这是细胞的特性，是因为贴壁过程中重新聚集了。这个时候你拼了命要去让它均匀分布，你的细胞之后会对你越来越不好；比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化)，就以colon cancer为例，比如HCT15, LS411和KM12，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100 mm dish，一次Z多加入500ul，就足够了，一般我加300ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙状移动。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
COS-7细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：此细胞株源自CV-1细胞株，经转染起始点缺失的SV40病毒突变体得到；编码表达野生型T抗原，所以该细胞适合作为需要SV40T抗原表达的载体的转染宿主。该细胞表达T抗原，允许SV40病毒的溶解性生长，支持40℃时温度敏感性A209病毒的复制，支持起始区域缺陷的SV40突变体的复制。因含有SV40病毒的DNA序列，该细胞需要在2级生物安全柜中操作。
LTEP-P细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
BSC40细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肾；自发永生
A-431[A431]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
GLC-15细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H2108[H2108]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HFL1细胞系；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
Hs 604.T细胞系；细胞传代方法：1：2传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H3255细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞背景资料：详见相关文献介绍
KMST-6细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：胚成纤维细胞；女性
JG细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：肾小球旁细胞
SGC-7901细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：1979年建系；这株细胞源自一位56岁女性胃腺癌患者的淋巴结转移灶。RPMI-1640培养12天，细胞开始生长，首次传代10天；31个月中传代186代。免疫YZ的ICR小鼠、乳犬皮下移植成功，家兔、乳犬眼前房移植成功；淋巴结转移，从小鼠皮下侵袭至肌层。
3LL细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
ML-2细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：悬浮；细胞背景资料：急性髓单核细胞白血病；男性
HT-1080[HT1080]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
DiFi细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：结直肠癌；女性
Malmc细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NTera-2细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：畸胎瘤；男性
CNE-2Z细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：鼻咽癌
SK-LU-1细胞系；细胞传代方法：1：2传代；每周换液2次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：该细胞系源于一位60岁的白人女性患者的肺腺癌组织。
CX-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
KMB-17细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞背景资料：详见相关文献介绍
WPE-int 人正常前列腺上皮细胞系 常年复苏
HCC2218细胞系；细胞传代方法：每周换液2—3次；细胞形态特性：上皮样；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
MAEC细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：主动脉；内皮细胞
MPP 89细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
Pt K1(NBL-3)细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
A-375细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：A375源自一位54岁女性，是Giard DJ等人建立的一系列细胞株中的一株。该细胞可在免疫YZ小鼠上成瘤，在琼脂上形成克隆。
293 Ad5细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
PC-3M-1E8细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：前列腺癌；男性
NCI-H2141细胞系；细胞传代方法：3-4天换液1次；细胞形态特性：聚团悬浮；细胞生长特性：悬浮生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
ROS17/2.8细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：骨肉瘤；ACI 9935
MDA231-LM2细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁；细胞背景资料：乳腺癌
Hs695T细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H2122[H2122]细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
CF-1细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍
SNU-368细胞系；细胞传代方法：1：2传代；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞生长特性：贴壁生长；细胞背景资料：详见相关文献介绍
HEK293A细胞系；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞背景资料：详见相关文献介绍