外泌体综合研究方案——方案设计-思路优化-实验协作-定期汇报

外泌体经典应用案例

外泌体与lncRNA研究案例
     案例：Takahashi KJ, Yan IK, Wood J, et al. Involvement of Extracellular Vesicle Long Noncoding RNA (linc-VLDLR) in Tumor Cell Responses to Chemotherapy. Mol Cancer Res. 2014 ,12(10): 1377–87. 

      研究人员通过对细胞间对话媒介外泌体中的lncRNA进行研究，在肝癌中发现了一个独特的化疗药物应答及耐药性产生的机制。通过外泌体运转Linc-VLDLR到受体肿瘤细胞，使受体肿瘤细胞中Linc-VLDLR升高，进而通过调控下游变化使得机体产生耐药性。

研究思路：

      通过芯片筛选发现lnc-VLDLR在HCC细胞外泌体比HCC细胞更富集。敲降Linc-VLDLR后细胞增殖marker PCNA表达下降，增殖能力下降。化疗药物处理Linc-VLDLR表达变化。加入不同浓度的外泌体,Linc-VLDLR的表达随外泌体浓度增加而升高，敲降细胞中并没有升高。 细胞实验结果与此相符。化疗药物处理后，加入外泌体增加细胞活性，但敲降细胞的活性却没有增加。这说明外泌体能够在化疗药物处理后通过运转Linc-VLDLR调控细胞活性，并且可能是通过ABC转运蛋白家族。

      案例：Li Y, Zheng QP, Bao CY, et al. Circular RNA is enriched and stable in exosomes: a promising biomarker for cancer diagnosis. Cell Res. 2015, 25(8):981-4.

      circular RNAs是一类广泛存在的环状闭合的非编码RNA，可在体内调控基因的表达。外泌体是一类由细胞分泌的膜状囊泡结构，其内部含有丰富的物质，包括miRNAs, lncRNA,和circRNAs。外泌体中是否能检测到稳定存在的circRNA，能否作为疾病诊断的biomarker，该研究通过一系列实验进行了探索。证明CircRNAs在外泌体中是表达丰富和稳定的，可以作为肿瘤检测的潜在biomarker。

研究思路：

      该研究首先对肝癌细胞系分离外泌体进行了circRNA检测，表明细胞分泌外泌体中存在着丰富的circRNAs。随后对健康人血清来源外泌体进行了检测，表明血清外泌体中稳定的circRNAs是可能作为诊断biomarker。进一步的小鼠肿瘤模型和临床直肠癌病人样本血清外泌体的circRNAs检测表明，检测血清外泌体中的circRNA作为临床诊断的biomarker是可行的。

外泌体与miRNA （miRNA in exosomes）

案例：Li Y, Zheng QP, Bao CY, et al. Circular RNA is enriched and stable in exosomes: a promising biomarker for cancer diagnosis. Cell Res. 2015, 25(8):981-4.

      circular RNAs是一类广泛存在的环状闭合的非编码RNA，可在体内调控基因的表达。外泌体是一类由细胞分泌的膜状囊泡结构，其内部含有丰富的物质，包括miRNAs, lncRNA,和circRNAs。外泌体中是否能检测到稳定存在的circRNA，能否作为疾病诊断的biomarker，该研究通过一系列实验进行了探索。证明CircRNAs在外泌体中是表达丰富和稳定的，可以作为肿瘤检测的潜在biomarker。