禽传染性支气管炎病毒荷兰株染料法荧光定量RT-PCR试剂盒_详细资料

产品信息

货号： YB14-86680 供应商：上海钰博生物科技有限公司数量： 30 保质期：有效期一年保存条件： ‘-20℃保存规格： 50次

PCR试剂盒包装规格及成分

编号成分十孔盒包装（去纸托）

试剂一 2×PCR MagicMix 1mL（亮黄盖）

试剂二成分 PCR 引物混合液 100 uL（白盖）

试剂三成分 PCR 阳性对照 50 uL（黄盖）

试剂四超纯水 1 mL（本色盖）

试剂五 DNA 释放剂SY装 50 次（成分见下）

试剂六免 DNA 提取试剂溶液 A 成分一 50 uL（白盖）

试剂七免 DNA 提取试剂溶液 A 成分二 100uL（绿盖）

试剂八免 DNA 提取试剂溶液 B 400 uL（红盖）

试剂九使用手册 1 份

简并性引物对PCR扩增有无影响?
有影响。简并数量应尽量少。
通常一条引物中简并的碱基不要超过4处，如果简并的碱基数过多，则会造成反应体系中有效引物的量相对减少，此时应适当增加引物的使用量。但引物量过大，容易引起非特异扩增，应加以注意。

适合的模板添加量是多少?
根据基因组DNA、质粒DNA及反转录产物等模板种类不同，PCR反应的适合模板添加量也不同。特别是使用PrimeSTAR® HS DNA Polymerase时，过剩的模板量有时会对PCR扩增产生阻害作用。另外，使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时，根据模板种类、模板使用量及模板质量可调整PCR反应条件。
使用PrimeSTAR® Max DNA Polymerase时，模板可按以下推荐量添加（50 μl反应体系）：
   · Human genomic DNA：5～200 ng
   · E.coli genomic DNA: 100 pg～100 ng
   · cDNA Library：1～200 ng
   · λDNA：10 pg～10 ng
   · 质粒DNA：10 pg～1 ng

PCR产物 (3‘端附有A碱基时) 经末端平滑后，克隆于去磷酸的平滑末端载体时，其PCR产物需不需要5′末端磷酸化?
需要。一般的PCR用引物5′末端都不带磷 (除非在引物合成时已特别标记)。使用这种引物进行PCR的PCR产物经末端平滑化后，与去磷酸的平滑末端载体连接之前，PCR产物必须进行5′末端磷酸化。

温馨提示：不可用于临床ZL。

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