菌株描述BL21菌株是开发的原核表达用的大肠杆菌菌株,适用于转化和非T7载体的常规蛋白表达,主要用于非毒性蛋白的表达。该菌株不含T7 RNA聚合酶基因,因此,不可用于T7启动子驱动的蛋白表达(如pET系列表达载体);但含大肠杆菌RNA聚合酶基因,可以用于tac或trc等利用大肠杆菌RNA聚合酶的原核标系统的表达(如pGEX,pMAL表达载体)。该菌株缺乏lon蛋白酶和外膜蛋白酶ompT的基因,这两种酶的缺失降低了外源重组蛋白在菌体内的降解,从而增加了蛋白表达量。对噬菌体T1(fhuA2)具有抗性。BL21菌株基因型:E. coli B F-dcm ompT hsdS(rB-mB-) gal [malB+]K-12(λS) 产品描述 保存:-80℃保存,六个月有效。 1)感受态细胞必须用 。感受态细胞应在-80℃保存,不可反复冻融且放置时间过长,否则会减低感受态细胞的转化效率。3) 进行转化操作时,需在相应温度及无菌条件下进行。4) 为防止转化实验不成功,可保留部分连接反应液以重新转化,将损失降到。使用方法【所有操作均在无菌条件的标准下进行】以下实验以50 μl感受态细胞为例。2)向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用手轻弹管底轻轻混匀(避免用枪吹打),冰浴静置25min。
温馨提示:不可用于临床ZL。