优势报价Invitrogen G-418sulfate价格
现货供应Gibco公司G418产品
G418(G-418即G-418 sulfate,也称Geneticin,分子式为C20H40N4O10.2H2SO4,分子量为692.71 g/mole)是一种氨基糖类抗生素,其结构与新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似,它通过影响80S核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞都有毒性 ,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。是稳定转染常用的选择试剂。当neo基因被整合进真核细胞基因组合适的地方后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的GX表达 ,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。
G418和筛选
筛选之前由于每种细胞对G418的敏感性不同,而且不同的厂家生产的相同浓度的G418的活性不尽相同,所以在筛选之前,一定要确定G418的筛选浓度。具体如下:将细胞稀释到1000个细胞/mL,在100ug/mL~1mg/mL的G418浓度范围内进行筛选,选择出在10~14天内使细胞全部死亡的Z低G418浓度来进行下一步的筛选试验。
由于每种细胞对G418的敏感性不同,一般变动在100ug/ml~1000ug/ml范围。而且不同的厂家生产的相同浓度的G418的活性不尽相同,所以在筛选之前,一定要确定你的细胞对这一批G418的筛选浓度。尽管如此,特性明确的细胞系G418的用量还是稳定的。《分子克隆》给出了几个常用细胞系所需G418的用量 :
细胞系或机体 G418浓度(ug/ml)
ZG仓鼠卵巢细胞700~800
Madin-Darby犬肾细胞500
人上皮A431细胞400
猿CV-1细胞500
盘基网柄菌属10~35
植物10
酵母125~500
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