T细胞分离用 尼龙毛柱现货,闪电发货~
尼龙毛柱法分离T细胞原理
尼龙毛纤维可用于从周围血中分离白细胞和从B细胞中分离T细胞。利用的是尼龙毛对B细胞的吸附力,粒细胞和B细胞会粘在纤维上,而T细胞和其他细胞则不会。
产品描述
采用Becton Dickinson的一次性的10cc塑料注射器,预装0.5g细丝状的尼龙毛(大约装至5CC线上);
即用型,已灭菌,10支装一盒;
T细胞分离用 尼龙毛柱现货,闪电发货~尼龙毛柱的柱塞装置用于洗脱粘连的B细胞,单路旋塞用于控制T细胞洗涤、孵育、洗脱的步骤。
细胞分离的操作过程
1、从包装中取出注射器和柱塞,取出旋塞,并安装在注射器的鲁尔接头。
2、在37°C下用选定培养基洗涤柱子,洗涤时轻轻按动柱塞以确保羊毛浸润且没有气泡。推荐的培养基包括含5%热灭活胎牛血清(FCS)的Dulbecco PBS, 含10%小牛血清的Hank平衡盐溶液(HBSS),含10%胎牛血清(FCS)的RPMI-1640,含10%胎牛血清(FCS)的EBSS,含10%胎牛血清(FCS)的McCoy’s 培养基。
3、关闭旋塞,预装柱在37°C培养1小时。 4、打开旋塞,从尼龙毛柱的顶部排干培养基后关闭。
5、每根柱子里加2×108活细胞到2ml培养基中。打开旋塞并逐渐排干培养基,直至细胞完全进入预装的尼龙毛中。关闭旋塞。
6、用2ml培养基洗涤柱子的顶部,并允许洗液进入预装尼龙毛中。关闭旋塞。
7、添加2~5ml培养基,以确保尼龙毛顶部被培养基覆盖。
8、在37°C培养1小时. 9、洗涤两次,收集不粘的T细胞。不要推柱塞!
10、收集粘性的B细胞时,可以添加培养基直至充满柱子,轻敲柱子使细胞脱离尼龙毛。推柱塞,并重复两次。
11、在1200rpm离心10分钟收集细胞,上清液弃去。 12、在大约10ml相同的培养基重新悬浮细胞颗粒。
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温馨提示:不可用于临床ZL。