人基质金属蛋白酶 8ELISA 试剂盒
产品编号:SEKH0256
适用于人血清、血浆或细胞培养上清液等样本
背景介绍:
基质金属蛋白酶(MMPs)又称基质蛋白酶(Matrixins),是一类依赖于锌和钙的内肽酶,在细胞外基质(ECM)的分解中起着重要的作用。它们在胚胎发育、形态发生、生殖和组织重建等正常生理过程中起着重要作用。他们还参与许多病理过程,如关节炎,癌症和心血管疾病。新合成的基质金属蛋白酶主要在转录水平调控,而现有基质金属蛋白酶的蛋白水解活性则通过内源性YZ剂 α2-大球蛋白和金属蛋白酶组织YZ剂(TIMPs)的激活和活性酶的YZ来控制。MMP-8(也称为中性粒细胞胶原酶和胶原酶 2)以潜在的酶形式存在于多形核白细胞的特异性颗粒中。PMN 在吞噬过程中起着重要的作用,同时也具有较强的浸润结缔组织的能力。IL-1和 IL-8、TNF-α 和 GMCSF 等多种因子刺激中性粒细胞分泌 MMP-8,中性粒细胞是启动细胞外基质分解的关键酶,尤其是在炎症、类风湿关节炎或骨关节炎等病理过程中。
检测原理:
Solarbio (Solarbio ®) ELISA 试剂盒采用基于双抗体夹心法的酶联免疫吸附检测技术。将抗人 TotalMMP-8 单克隆抗体包被在酶标板上;分别加入梯度稀释的标准品和预稀释的样本,标准品和样本中的人Total MMP-8 会与酶标板上的包被抗体充分结合;洗板后加入生物素化抗人 Total MMP-8 抗体,该抗体会与板子上包被抗体捕获的标准品和样本中的人 Total MMP-8 发生特异性结合;洗板后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,生物素与链霉亲和素会发生高强度的非共价结合;洗板后加入显色剂底物TMB,若反应孔中样品存在不同浓度的人 Total MMP-8,则 HRP 会使无色 TMB 变成不同深浅(正相关)的蓝色物质,加入终止液后反应孔会变成黄色;,在 λmax=450 nm(OD=450 nm)处测定反应孔样品吸光度(OD),样本中的人 Total MMP-8 浓度与 OD 成正比,通过绘制标准曲线和四参数拟合软件便可计算出样本中人 Total MMP-8 的浓度。