自动化微生物生化鉴定仪

自动化微生物生化鉴定仪

HiBio-IDTM Reader (产品货号: LA686)

HiBio-IDTM Reader这款仪器是在KB试纸条出现的基础上诞生的，能自动化的完成微生物的鉴定。

HiBio-IDTM Reader的辅助元件：KB纸条及试剂（微生物生化鉴定试剂盒）、电源线、电脑连接导线、仪器箱。另外还需要电脑以及安装HiBio-IDTM软件。

微生物生化鉴定的发展历程：

适合客户领域：制药、食品、饮用水、医院。

准确率高达99%，节省时间、节省劳力和材料。

尤其适合快速筛选大量样本以检测某一特定病原体的质控项目。

快速、可靠、可重复、容易操作。

通过数据库鉴定微生物

HiMedia自动化微生物鉴定仪资料‍下载

HiBio-ID™微生物生化鉴定卡（货号 KB**）

HiBio-ID™ Reader 微生物生化鉴定仪（货号 LA686）

菌种的传统鉴定方法,是通过生长过程中的生化反应来鉴别。

HiBio-ID™微生物生化鉴定卡（货号 KB**）， 将12种或

24种缩微的生化反应集成在一块鉴定卡上，将反应后的显色

结果与《结果诠释表》、《菌种标准表》比对后，完成鉴定。

HiBio-ID™ Reader 微生物生化鉴定仪（货号 LA686），

可对HiBio-ID™
生化鉴定卡更快速的读取，一次可读取5条。通过软件对读取结果计算分析，确定检测的菌种。

HiBio-ID™ 系列产品 特点

1, HiBio-ID™系列产品，均采用以菌种扩增为基础的生化检查来鉴定微生物（鉴定到种）。

2, HiBio-ID™
Reader可自动读取鉴定卡的显色结果，数据库辅助完成鉴定。

3, 实验表明，准确率为90%~99%。

4, 适用于快速、大量样本筛查微生物的部门

5, 快速、准确、可重复，

6, 省时、省力、省材料。

HiBio-ID™生化鉴定卡设计的生化反应的原理：

碱性磷酸酶试验：此试验检测微生物产生碱性磷酸酶的能力。碱性磷酸酶使底物释放酚酞，酚酞和碱（40%NaOH）反应产生明亮的粉色。

·an基酸脱羧试验（赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸）：该试验采用溴jia酚紫为pH值指示剂。培养基中存在糖发酵时，因产酸使pH值降低，培养基变黄。酸使脱羧酶激活。激活的脱羧酶使na基酸脱羧生成胺，从而使培养基pH值升高，指示剂颜色从橄榄绿或亮紫色变为紫色或深紫色。阴性反应为黄色。存在赖氨酸和鸟氨酸脱羧时，孵育时间可能需要48小时。

·糖代谢试验：该试验中酚红为pH值指示剂。糖发酵产酸，pH值降低，产生黄色。颜色没有变化或为粉/红色，则为阴性反应。一些菌在糖代谢试验中表现为弱反应，这时应再孵育48小时，若为橙色则为阴性反应。

·过yang化qing酶试验：产生过yang化qing酶的微生物能使过yang化qing降解为氧，表现为快速的气泡产生。滴加1滴3％H2O2溶液即可用于检测过yang化qing酶活性。

·柠檬酸试验：培养基包含柠檬酸盐（惟一的碳源）、溴麝香草酚蓝（指示剂）和无机铵盐。利用柠檬酸盐作为惟一碳源的有机体，也能利用铵盐作为惟一的氮源。铵盐分解产生NH3，导致碱性，指示剂从绿色变成蓝色。

·七叶苷水解试验：七叶苷可替代糖苷，可被一些菌水解产生葡萄糖和七叶苷原。后者和培养基中的铁离子结合生成黑色复合物。

·葡萄糖醛酸酶试验：葡萄糖醛酸酶能裂解培养基中的底物X-葡萄糖苷酸。该底物被微生物摄入后，发色团和葡萄糖苷酸之间的化学键被细胞内的葡萄糖醛酸酶裂解，释放的发色团产生蓝绿色。

·liu化qing产生试验：肠杆菌科的所有成员都能产生数量不等的H2S。这些微生物通过酶解方法，将硫从含liu氨基酸或无机硫化物中释放出来。释放的liu化qing和铁离子或醋suan铅反应，产生硫化亚铁或硫化铅，形成不溶性黑色沉淀。培养基变黑为阳性反应。

·吲哚试验：该试验检测细菌分解色氨酸为吲哚的能力。吲哚在培养基中如果存在堆积，则滴加Kovac吲哚试剂会在10秒内产生玫瑰红色，表明为阳性反应。

·丙二酸代谢试验：该培养基用溴麝香草酚蓝为指示剂，丙二酸钠为碳源，硫酸铵为氮源。丙二酸被有机体利用时，释放出氧化na，导致碱性环境，使指示剂从浅绿色变为蓝色。阴性反应则颜色不变。

·甲基红试验：该试验用甲基红检测有机体利用葡萄糖时产生的qing离子浓度（pH）。孵育结束时加入一滴甲基红指示剂，如果颜色显著变红，则为阳性反应。如果变黄或橙黄，则为阴性反应。

·硝酸盐还原试验：革兰氏阴性杆菌还原硝酸盐的能力各有不同。肠杆菌科细菌均能特征性还原硝酸盐为亚硝酸盐。亚硝酸盐与对na基ben磺酸和N，N-二甲基-1-na胺试剂反应，生成粉红色。硝酸盐试剂纸片（DD042）也可用于该试验。

·ONPG试验：乳糖发酵需要通透酶和β-半乳糖苷酶这两种酶。非乳糖发酵菌同时缺乏这两种酶，而有些细菌有半乳糖苷酶，但缺乏通透酶。ONPG（邻硝基酚-β-D-半乳糖苷）结构上近似乳糖。存在Β-半乳糖苷酶时，ONPG裂解为半乳糖和邻硝基酚（黄色化合物）。肠杆菌科成员通常根据它们发酵乳糖的能力进行分类，因而ONPG试验在快速鉴定方面特别有用。黄色表明为阳性反应。也可使用ONPG纸片（DD008）。在微生物生长8-24小时后放置ONPG纸片，35-37℃至少孵育1小时，出现黄色表明为阳性反应。

·qing化酶试验：该试验依赖于细菌内存在催化电子供体间电子传递的hua化酶和一种氧还染料四jia基对ben二胺。染料被还原为深紫色。用yang化酶纸片（DD018）接触生长菌表面或滴加Gordon-MaLeod试剂，5-10秒内出现深紫色表明为阳性反应。在10-60秒出现则为延迟的阳性反应，颜色无变化为阴性反应。

·ben丙an酸脱氨基试验：此实验检测微生物对ben丙氨酸氧化脱氨的能力。该反应产生benbing酮酸，它和铁盐反应产生绿色。滴加TDA试剂后为绿色则表明为阳性反应。请在5分钟内读取结果，因为绿色很快会褪色。

·PYR（pi lo烷酮酶）试验：革兰氏阳性菌如酿脓链球菌和多数肠球菌合成pilo烷酮芳基酰胺酶, 能水解pilowan酮-βna基酰胺，释放出无色的pilo烷酮和β-na基酰胺。PYR试剂与β-na基酰na作用形成红色复合物。阳性反应即为产生樱桃红至红色。

·耐盐试验：一些微生物能耐受高浓度盐分。生长培养基的lv化钠浓度为1%时，即可用于检测。

·尿素酶试验：尿素酶分解尿素为an。反应为阳性时，培养基变为碱性，酚红指示剂显色为粉色。

·伏-普试验：一些微生物通过葡萄糖代谢产生yi酰甲基jia醇。滴加1-2滴Barritt试剂A和1-2滴Barritt试剂B可进行检测。2-5分钟内产生粉红色为阳性反应。

HiBio-ID™
生化鉴定卡 操作流程

1，准备接种液

①待测菌株需要先分离纯化。只有纯化的菌株才能用于检测。可用普通培养基如营养琼脂（#M001）或适合的鉴别培养基分离菌株。

②挑取单个菌落，接种到5ml脑心浸出液肉汤，在35-37℃培养4-6小时，直到菌液浊度达到产品说明书上的要求。一些苛养菌可能需要孵育6小时以上。在这种情况下，孵育应使接种液浊度达到指定OD值或McFarland浊度标准。

③挑取1-3个完好分离的菌落，加入到2-3ml无菌盐水中制成均一的悬浊液作为接种液。按照产品说明书的要求，调整悬浊液的密度。

④遵循产品说明书的要求操作。

注意：如果接种液浊度＜0.1OD或0.5 McFarland标准，可能会得到错误的假阴性结果。

2，接种

①无菌打开试剂盒，撕去密封箔。

②采用表面接种方法，在鉴定卡上每孔加50l上述接种液。每孔用接种环涂抹接种。

3，孵育

HiBio-IDTM
生化鉴定卡中，货号为KB001--KB014的产品，均在35℃±2℃培养18-24小时，只有KB006例外，需在室温（22-25℃）孵育48-72小时。

4，试剂

必要时需要添加其他显色试剂，更多细节参考结果诠释表。

5，读取结果

人工读取结果：显色结果与《结果诠释表》比对，确定是否存在阳性反应。再根据《菌种标准表》完成鉴定/或用HiBio-IDTM
Readers生化鉴定仪鉴定。