4T1-LUC 小鼠乳腺癌细胞-荧光素酶标记

细胞接受后处理1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。 2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。 3) 弃去T25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。 4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。 5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。 一．贴壁细胞 客户接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。显微镜观察细胞，当细胞融汇至80%左右（可以传代的情况下），细胞应该在37度培养箱预温1-2h后再做处理。如未达到细胞传代密度，培养瓶应预留一部分培养基继续培养。严格无菌操作，打开细胞培养瓶。将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，加入适量的0.05%胰酶-EDTA消化细胞,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。 1000rpm,5min离心，重悬细胞。换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO2 培养。二．悬浮细胞 1. 接收到细胞，用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）培养瓶外部。2. 肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X ,200X 各一张）。3. 严格无菌操作，打开细胞培养瓶。4. 将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒）。5. 1000rpm,5min离心，重悬细胞。 换新的细胞培养瓶和新鲜培养基，37℃,5%CO2 培养。三．2ml小管操作方法。 1. 用75%的酒精消毒（建议配制75%酒精的水是灭菌过的）。2. 严格无菌操作，用吸管吸出管中细胞至6ml完全培养基混匀。3换新的细胞培养瓶，37℃,5%CO7 培养。