人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞：M619细胞

人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞：M619细胞
    BS-C00866611
    细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
    细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
    CNE1细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    SW954细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：3-1：6传代，2-3天换液1次。
    Pfeiffer细胞系专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：1：2传代
    MARC-145细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    NCI-H1838细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：3-1：4传代；每周换液2次。
    DCS细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    Reh细胞系专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2传代。3天内可长满。
    KP2细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞：M619细胞
    细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
    很多朋友讨论细胞培养问题，见到很多很好的经验总结，这里说一些我个人的经验，因为一些比较特殊的原因，我自己培养接触过近300种细胞，常用于做实验的，累积有百余种，可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇ZT，并不是因为细胞消化Z重要，而是近期看到大家频繁讨论这个话题，我就抛砖引玉，下面几点拙见，可能与其它朋友总结的一些经验有点出入，仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很多有价值的经验，也见到很多人的困惑。其实细胞培养，尤其是细胞系的培养，就消化而言，不是太难，做得多了，善于总结经验，就能把细胞越养越好。一般的程序步骤，细节操作，我这里就不讲了，只讲一些基本操作背后的知识，如果不对之处，欢迎指正，总结下来，细胞培养中消化很重要，但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要)，关键所在是细胞来源，血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题，很多时候bottleneck没有找到，虽然通过其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作，总觉得自己没有经验，而忽视试剂，溶液尤其是细胞的质量，后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
    细胞背景资料：脉络膜黑色素瘤；女性
    细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1万单位）、7.5％NaHC03溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20ml）(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内，加入灭活小牛血清10m1，庆大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸钠溶液3ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
    RN-c细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    MEs23.5细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    Neuro-2a[N2a,Neuro-2a]细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    JurkatCA细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    细胞生长特性：贴壁
    细胞形态特性：详见细胞说明书
    人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞：M619细胞
    解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法：在解冻冻存细胞时，发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题，究竟是什么原因导致，我们该怎么进行解决？以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题，总结的一些解决方案！出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下：1)解冻过程中细胞裂解，推荐的解决方案：可预期到一定量的细胞死亡，因此细胞的浓度应足够高，考虑到这一损失。起始浓度为1*10(6)至1*10(7)细胞/毫升；2)解冻过程中的问题，推荐的解决方案：在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物，保存时间为1-5天，但这不是保存的方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养；3)对冷冻液过敏，推荐的解决方案：A.完全或部分更换培养基，减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物，取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的条件在对数期；4)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄，推荐的解决方案：解冻Z近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长，存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
    HuUMSCs-11细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    NSC-34细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    SNU-C2B细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    SAS细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    U118MG细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    IPI-2I细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    HANK1细胞系专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    PL-45细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    TJ905细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    NCI-H125细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    TCMK-1细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    hADSCs细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    SKG-IIIa细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：2x10^4 cells/ml
    HTR-8/Svneo细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    人B-细胞κ-轻肽基因增强子YZ因子激酶β(IκBKβ)ELISA试剂盒，英文名：Human IκBKβ ELISA Kit，规格：48T/96T
    小鼠诱导转化生长因子β(TGFbI)ELISA试剂盒，英文名：Mouse TGFbI ELISA Kit，规格：48T/96T
    小鼠诱导转化生长因子β(TGFbI)ELISA试剂盒，英文名：Mouse TGFbI ELISA Kit，规格：48T/96T
    小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)ELISA试剂盒，英文名：Mouse GSH ELISA Kit，规格：48T/96T
    NCI-H441[H441]细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    NSC-34细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞：M619细胞
    N1E-115细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    大鼠丝蛋白结合LIM蛋白1(FBLIM1)ELISA试剂盒，英文名：FBLIM1 ELISA Kit，规格：48T/96T
    人CD8分子(CD8)ELISA试剂盒，英文名：Human CD8 ELISA Kit，规格：48T/96T
    人Tomoregulin蛋白(TR)ELISA试剂盒，英文名：Human TR ELISA Kit，规格：48T/96T
    人神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒，英文名：Human NGF ELISA Kit，规格：48T/96T
    人弓形体抗体IgM(Tox IgM)ELISA试剂盒，英文名：Human Tox IgM ELISA Kit，规格：48T/96T
    小鼠CD83分子(CD83)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CD83 ELISA Kit，规格：48T/96T
    人细胞信号转导YZ因子3(SOCS3)ELISA试剂盒，英文名：Human SOCS3 ELISA Kit，规格：48T/96T
    人组织蛋白酶H(CTSH)ELISA试剂盒，英文名：Human CTSH ELISA Kit，规格：48T/96T
    人精脒/精胺N1-乙酰基转移酶2(SAT2)ELISA试剂盒，英文名：Human SAT2 ELISA Kit，规格：48T/96T
    Bcl-2抗体，英文名称：Anti-Bcl-2
    对接蛋白3抗体，英文名称：Anti-DOK3
    C8166-CD4细胞系专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：2-3x10-5细胞/ml
    组蛋白连接作用蛋白抗体，英文名称：Anti-SHPRH
    B细胞迁移基因2抗体，英文名称：Anti-BTG2/TIS21
    表皮生长因子样重复折叠1结构域蛋白3抗体，英文名称：Anti-EDIL3
    化蛋白酶活化受体4抗体，英文名称：Anti-Phospho-PAR4 (Thr163)
    12号染色体开放阅读框49抗体，英文名称：Anti-C12ORF49
    Myc基因相关X因子抗体，英文名称：Anti-MAX protein
    SNU886细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    Jurkat细胞系专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：圆形，单个或呈片；细胞传代方法：保持细胞密度在3—9×105cells/ml之间，1：5—1：10传代，每周换液2—3次
    JEG细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    Granta-519细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    SUSM-1细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    大鼠胱抑素A(CSTA)ELISA试剂盒，英文名：CSTA ELISA Kit，规格：48T/96T
    大鼠25羟基维生素D(25OHVD)ELISA试剂盒，英文名：25OHVD ELISA Kit，规格：48T/96T
    小鼠Smad同源物2(Smad2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse Smad2 ELISA Kit，规格：48T/96T
    人岩藻糖基转移酶10(FUT10)ELISA试剂盒，英文名：Human FUT10 ELISA Kit，规格：48T/96T
    小鼠CD83分子(CD83)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CD83 ELISA Kit，规格：48T/96T
    细胞分化蛋白SEPT6抗体，英文名称：Anti-SEPT6
    胚胎干细胞关键蛋白190抗体(N端)，英文名称：Anti-Oct-4B(OCT4B-190)NT
    芳香胺N-乙酰化转移酶抗体，英文名称：Anti-AANAT
    促肾上腺皮质激素ACTH(7-23)抗体，英文名称：Anti-ACTH (7-23)
    SGC7901细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    UACC-812细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代；5-7天1次。　
    人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞：M619细胞
    G-401细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：6传代，每周2-3次。
    mouseN6细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
    人酪蛋白激酶2α2(CSNK2A2)ELISA试剂盒，英文名：Human CSNK2A2 ELISA Kit，规格：48T/96T
    大鼠丝蛋白结合LIM蛋白1(FBLIM1)ELISA试剂盒，英文名：FBLIM1 ELISA Kit，规格：48T/96T
    甘油二酯胆碱转移酶抗体，英文名称：Anti-CHPT1
    激肽释放酶9抗体(舒血管素9)，英文名称：Anti-KLK9
    HER4抗体，英文名称：Anti-HER4/ErbB4
    腺苷A2A受体抗体，英文名称：Anti-A2AR/Adenosine A2a receptor
    淋巴细胞活化基因-3抗体，英文名称：Anti-LAG-3/CD223
    CCLP-1细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    Panc02.03细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
    Th17细胞系专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    GNM细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    RSC96细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    MEL526细胞系专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
    原癌蛋白CBL2抗体，英文名称：Anti-CBL2
    化胰岛素样生长因子1受体抗体，英文名称：Anti-phospho-IGF1R(Tyr1161)
    法尼基二合酶1抗体，英文名称：Anti-GGPS1
    化叉头蛋白家族抗体，英文名称：Anti-Phospho-FoxO1(Thr24)/FoxO3a(Thr32)
    胸腺素β4抗体，英文名称：Anti-Thymosin beta 4