货号:
CP913638
保存条件:
低温冷藏
供应商:
上海莼试
保质期:
详见说明书
CAS号:
详见说明书
英文名:
Sudan Ebola Virus RTPCR
数量:
45
规格:
详见说明书
需要自备的器材:点击了解更PCR检测试剂盒。
1.苏丹埃博拉病毒PCR检测试剂盒说明书仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦(DEPC)水
处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。 产品名称 | 苏丹埃博拉病毒PCR检测试剂盒说明书 |
英文名称 | Sudan Ebola Virus RTPCR |
编号 | CP913638 |
特点:
1.苏丹埃博拉病毒PCR检测试剂盒说明书即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素:
苏丹埃博拉病毒PCR检测试剂盒说明书参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGCZ好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是Z末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列Z好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
5(S),6(R)-DiHETE (50 ug)5S,6R-dihydroxy-7E,9E,11Z,14Z-eicosatetraenoic acid; 5(S),6(R)-DiHETE5-chloro NNEI (1 mg)5-chloro MN-24; 1-(5-chloropentyl)-N-(naphthalen-1-yl)-1H-indole-3-carboxamideβ-NMN, β-Nicotinamide ribose monophosphate, NMN, Nicotinamide ribotide, Nicotinamide-1-ium-1-β-D-ribofuranoside 5’-phosphateβ-Nicotinamide mononucleotideD-myo-Inositol-1,3,4,5,6-pentaphosphate -sodium salt) (5 mg)Ins(1,3,4,5,6)P5 (sodium salt)|1,3,4,5,6-IP5 (sodium salt), D-myo-Inositol-1,3,4,5,6-pentaphosphate -sodium salt), D-myo-inositol-1,3,4,5,6-penta(hydrogen phosphate), pentasodium saltAminoethoxyvinyl Glycine (hydrochloride) (25 mg)ABG 3168|AVG|Aviglycine; (2S,13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl ester (1 mg)9。alpha。,11。alpha。-dihydroxy-15-oxo-prost-5Z-en-1-oic acid, isopropyl ester; 13,14-dihydro-15-keto PGF2α isopropyl ester; 13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α isopropyl esterTMPD (hydrochloride) (10 g)N,N,N’,N’-tetramethyl-1,4-benzenediamine, dihydrochloride; Wurster’s Reagent|N,N,N’,N’-Tetramethyl-p-Phenylenediamine; TMPD (hydrochloride)N-[4-(4-Morpholinyl)butyl]-2-benzofurancarboxamide; CL-82198MMP-13 inhibitorCAY10680 (25 mg)N-Extracellular Death Factor (1 mg)EDF2β,3β,5β,11α,14α,20R,22R-Heptahydroxycholest-7-en-6-oneMuristerone AHoechst 33258 超级纯Hoechst 33258 UltraPure grade苏丹埃博拉病毒PCR检测试剂盒说明书兔抗GATA4(Phospho-Ser262) 多克隆抗体 英文名:Anti-GATA4(Phospho-Ser262) rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃)兔抗MAPT多克隆抗体 英文名:Anti-MAPT rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光兔抗CK1多克隆抗体 英文名:Anti-CK1 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光Anti-PRMT6 rabbit polyclonal antiboy 英文名:Anti-PRMT6 rabbit兔抗FAM3A多克隆抗体 英文名:Anti-FAM3A rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光兔抗COG4多克隆抗体 英文名:Anti-COG4 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光兔抗P2RY11多克隆抗体 英文名:Anti-P2RY11 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光兔抗HECT1多克隆抗体 英文名:Anti-HECT1 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光兔抗RUVBL2多克隆抗体 英文名:Anti-RUVBL2 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光兔抗TNFRSF10A多克隆抗体 英文名:Anti-TNFRSF10A rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光兔抗TLR4多克隆抗体 英文名:Anti-TLR4 rabbit polyclonal antiboy 冷冻(-20℃) 避光
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1.苏丹埃博拉病毒PCR检测试剂盒说明书 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
温馨提示:不可用于临床ZL。