货号：
XY-TE-0263
供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
数量：
860
英文名：
Column Marine Animal DNAout
保质期：
两年
保存条件：
常温运输和保存
规格：
50 次
柱式海洋动物DNAout产品及特点：
本产品是xuanya在柱式动物DNAout试剂盒基础上优化改良而得，专门针对海洋动物的基因组DNA提取的试剂盒，可用于鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物和水产动物的荃因组DNA提取，可以有效去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。
柱式海洋动物DNAout本产品主要特点是：
1.使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规分子生物学操作，如:酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等试验。
2.操作简单安全，1小时内即可获得超纯的基因组DNA，纯化过程中不需要使用氯仿等有机试剂。
3.应用广泛，适用于多种动物细胞和动物组织等。
4.性价比高，质量和国外同类试剂盒相当，价格更低。
柱式海洋动物DNAout运输及保存：
常温运输和保存，有效期一年。
自备试剂：无水乙醇、RNaseA溶液
柱式海洋动物DNAout使用方法
使用前请先在溶液C和通用洗柱液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。
1.切取不多于30mg的组织材料，放入装有200μL溶液A的离心管中，涡旋振荡15秒。注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20mg。如果需要去除RNA，可加入40μLRNaseA（10mg/mL）溶液（客户自备），振荡15秒，室温放置5分钟。
2.加入20μL蛋白酶K溶液(20mg/mL)，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃下放置，直至组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
柱式海洋动物DNAout注意：不同组织裂解时间不同，通常需0.5-2小时即可完成。扇贝组织0.5小时基本可裂解完全，虾和鱼类组织1小时。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15秒。
3.加入200μL溶液B，充分颠倒混匀，70℃放置10分钟，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。注意：加入溶液B时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
4.加入200μL无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5.将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个离心吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm（~13,400×g）离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放回收集管中。
6.向离心吸附柱中加入500μL溶液C（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm（~13,400×g）离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
7.向吸附柱中加入600μL通用洗柱液（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm（~13,400×g）离心30秒，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中。
8.重复操作步骤7。
9.将吸附柱放回收集管中，12,000rpm（~13,400×g）离心2分钟，倒掉废液。将吸附柱置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10.将吸附柱转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μL通用洗脱液，室温放置2-5分钟，12,000rpm（~13,400×g）离心2分钟，将溶液收集到离心管中。
柱式海洋动物DNAout注意：通用洗脱液的体积不应少于50μL，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱中，室温放置2分钟，12,000rpm（~13,400×g）离心2分钟。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用超纯水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。
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温馨提示：不可用于临床ZL。
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