CNE-1人鼻咽癌细胞系 细胞库专业复苏
H-4-II-E细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
U118MG细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H187细胞保存平台;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CLL细胞保存平台;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠母系胚胎亮酸拉链蛋白激酶(MELK)ELISA检测试剂盒,英文名:MELK ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠谷胱甘肽S转移酶P(GSTP)ELISA检测试剂盒,英文名:GSTP ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人唾液淀粉酶α1(AMY1)ELISA检测试剂盒,英文名:Human AMY1 ELISA Kit,规格:48T/96T
P388D1细胞保存平台;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KYSE410细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:5传代
LLC细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:其他;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
【冻存细胞操作】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10(7)/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO) 或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞操作】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10(7)/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10(5)/ml数量。
HIEC细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞背景资料:详见相关文献介绍
End1/E6E7细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MKN-28(MKN-74)细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠基质细胞衍生因子1α(SDF1α)ELISA检测试剂盒,英文名:Mouse SDF1α ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠155kDa核孔蛋白(NUP155)ELISA检测试剂盒,英文名:Mouse NUP155 ELISA Kit,规格:48T/96T
MDCC-MSB-1细胞保存平台;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人环腺苷(cAMP)ELISA检测试剂盒,英文名:Human cAMP ELISA Kit,规格:48T/96T
人胎盘蛋白14(PP14)ELISA检测试剂盒,英文名:Human PP14 ELISA Kit,规格:48T/96T
EU-4细胞保存平台;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RA FLSs细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SKM-1细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代;
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
NEC8细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H441细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠腺苷三结合盒转运蛋白G2(ABCG2)ELISA检测试剂盒,英文名:ABCG2 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
人前脑啡肽(PENK)ELISA检测试剂盒,英文名:Human PENK ELISA Kit,规格:48T/96T
人氧还蛋白还原酶1(TrxR1)ELISA检测试剂盒,英文名:Human TrxR1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人层黏连蛋白α5(LAMα5)ELISA检测试剂盒,英文名:Human LAMα5 ELISA Kit,规格:48T/96T
MV3细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
SW 954[SW-954,SW954]细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KLN205细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Sf-9细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HuTu80细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Sf-9细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人ⅩⅦ型胶原(COL17)ELISA检测试剂盒,英文名:Human COL17 ELISA Kit,规格:48T/96T
人半乳凝集素1(GAL1)ELISA检测试剂盒,英文名:Human GAL1 ELISA Kit,规格:48T/96T
KYSE140细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HCC94细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞形态特性:详见细胞说明书
95-D细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
SK-MEL-1细胞保存平台;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:球形的;细胞传代方法:维持细胞浓度在1×105-2×105,每周补液2-3次。
Hs 578T细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠胱天蛋白酶11(CASP11)ELISA检测试剂盒,英文名:CASP11 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠白介素-5(IL-5)ELISA检测试剂盒,英文名:Mouse IL-5 ELISA Kit,规格:48T/96T
人CD320分子(CD320)ELISA检测试剂盒,英文名:Human CD320 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
HRCEC细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BMDC细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠腺苷三结合盒转运体G1(ABCG1)ELISA检测试剂盒,英文名:ABCG1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4)ELISA检测试剂盒,英文名:Mouse FABP4 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝换课题,这个见得太多了,别不当会事。
人D-乳酸脱酶(D-LDH)ELISA检测试剂盒,英文名:Human D-LDH ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠氧化型谷胱甘肽(GSGS)ELISA检测试剂盒,英文名:Mouse GSGS ELISA Kit,规格:48T/96T
BC-022细胞保存平台;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。