HuTu80人十二指肠腺癌细胞系 专业技术指导 专注复苏

HuTu80人十二指肠腺癌细胞系 专业技术指导 专注复苏
H-97细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
16HBE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
6-10B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞（绝大部分1min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化。2，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-3细胞），吹打不超过20次后（一般10次即可），成小规模聚集（10个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打1h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），比如HCT15, LS411和KM12，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100mm dish，一次Z多加入500ul，就足够了，一般我加300ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙状移动。
A-427细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SNU-739细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
NCI-H1373[H1373]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Martin-Lewis琼脂基础，英文名：Martin-Lewis Agar Base，用途：用于致病性奈瑟氏菌的分离
含甲基绿的DNA酶试验琼脂，英文名：Dnase Test Agar with Methyl Green，用途：用于核糖核酸酶检测,含0.2%DNA
AN厌氧琼脂基础，英文名：Anaerobic Agar Base，用途：厌氧基础培养基,每100ml添加化血红素溶液和维生素K1溶液各1支
AN厌氧肉汤基础，英文名：Anaerobic Broth Base，用途：厌氧基础培养基,每100ml添加化血红素溶液和维生素K1溶液各1支
细胞形态特性：详见细胞说明书
含甲基绿的DNA酶试验琼脂，英文名：Dnase Test Agar with Methyl Green，用途：用于核糖核酸酶检测,含0.2%DNA
3%化钠胰蛋白胨大豆琼脂，英文名：3% NaCl Tryptone Soy Agar，用途：用于副溶血性弧菌纯化
Kert-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PE/CA-PJ34(Clone 12)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
MT2细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠神经肽S(NPS)ELISA试剂盒，英文名：NPS ELISA Kit，规格：48T/96T
人凝聚素(CLU)ELISA试剂盒，英文名：Human CLU ELISA Kit，规格：48T/96T
KF链球菌肉汤，英文名：KF Streptococcus Broth，用途：用于肠球菌、链球菌计数和检验，视须要每100ml培养基添加1支1%TTC溶液
细胞背景资料：详见相关文献介绍
冷冻细胞解冻程序：依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例，制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类，若因实验需要，必须有所不同时，务必以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清)，对细胞而言差异极大，请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温，回温后喷以70%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。取出冷冻管，立即放入37°C水槽中快速解冻，水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿，否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后，以70%ethanol擦拭冷冻管外部，移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度，于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液，缓缓加入T25或T75flask内之培养基，混合均匀，放入37°C，5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言，1%以下之冷冻保护剂DMSO，不会对细胞之贴附或活化有不良影响，不需立刻由解冻细胞中去除，待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞，需立即去除DMSO者，则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中，离心300xg(约1000rpm)，5分钟，小心移去上清液，加入适量新鲜培养基，将细胞均匀混合后，转移至培养瓶中，再放入37°C，5%CO2培养箱培养。
纤维素分解菌培养基(纤维素刚果红培养基)，英文名：Cellulose Decomposing Microorganisms Medium，用途：用于纤维素分解菌分离鉴别,纤维素分解菌周围有红色分解圈
豆芽汁葡萄糖培养基，英文名：Soybean sprout Extract Glucose Medium，用途：用于真菌尤其是霉菌的培养
Stuart运送培养基，英文名：Stuart Transport Medium，用途：用于致病菌标本的采集、运输和保存
BAT琼脂，英文名：BAT Agar，用途：用于脂环酸芽孢秆菌检验
H125细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ME-180细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
293A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HSAS2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BC-027细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SU.86.86细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代；
人线粒体外膜转位酶70A(TOMM70A)ELISA试剂盒，英文名：Human TOMM70A ELISA Kit，规格：48T/96T
人ⅩⅢ型胶原(COL13)ELISA试剂盒，英文名：Human COL13 ELISA Kit，规格：48T/96T
人离子通道抗体(VGCC)ELISA试剂盒，英文名：Human VGCC ELISA Kit，规格：48T/96T
细菌L型增菌培养基，英文名：L-Bacterial Enrichment Broth，用途：用于样本中L型细菌的增菌培养
哥伦比亚肉汤，英文名：Columbia Broth，用途：用于细菌的培养
改良马丁琼脂培养基，英文名：Martin Agar Medium,Modified，用途：用于真菌培养、无菌检查
THC-8307细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
NIH/3T3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：当细胞生长至80%或80%以下汇合时即可传代，切勿达到汇合；1：3-1：6传代，每周2次。
Detroit562细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
大鼠活化素A(ACV-A)ELISA试剂盒，英文名：ACV-A ELISA Kit，规格：48T/96T
人碱性成纤维细胞生长因子4(BFGF 4)ELISA试剂盒，英文名：Human BFGF 4 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse IGF-2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人染色质区解旋酶DNA结合蛋白3(CHD3)ELISA试剂盒，英文名：Human CHD3 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
人骨形成蛋白4(BMP4)ELISA试剂盒，英文名：Human BMP4 ELISA Kit，规格：48T/96T
支原体培养基基础，英文名：Mycoplasma Medium Base，用途：需添加马血清、MEM 培养液、青霉素
LAPT肉汤，英文名：LAPT Broth，用途：基础培养基,用于乳酸菌的培养
细菌L型增菌培养基，英文名：L-Bacterial Enrichment Broth，用途：用于样本中L型细菌的增菌培养
精酸支原体琼脂培养基，英文名：Mycoplasma Agar Medium with Arginine，用途：——用于支原体的培养
自诱导LB肉汤培养基，英文名：Autoinduction Luria-Bertani Broth Medium，用途：用于重组蛋白的表达，需添加甘油
DMS 114细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：4传代；每周换液2次。
1301细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
MLFC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
COLO-201细胞专业复苏；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
西蒙氏柠檬酸盐肉汤/枸橼酸盐肉汤，英文名：Simmons Citrate Broth，用途：用于柠檬酸盐利用实验
HMC3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2052细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：3-1：6传代
NCI-H1734[H-1734,H1734]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。1)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；2)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；3)超净台的风机不能过大，风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染；4)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。
NCI-H1781[H1781]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。