JurkatD,E人T淋巴瘤转基因细胞系 专业技术指导 专注复苏

JurkatD,E人T淋巴瘤转基因细胞系 专业技术指导 专注复苏
QBI-293A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Colo738细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
VMM细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞培养基应用选择：选择培养基没有一定的标准，有几点建议可供参考：(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。(2)其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。(3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640。(4)用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择培养基，这是Z客观的方法，但比较繁琐。以下是部分细胞常用的培养条件：293人胚胎肾细胞培养条件：MEM,10%热灭活马血清；IMR-90人肺成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清和NEAA；W1-38人胚胎肺成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；A549人肺癌上皮细胞培养条件：F-12K,10%胎牛血清；A431人表皮癌细胞培养条件：DMEM,10%胎牛血清；BHL-100人乳房上皮细胞培养条件：McCoy', 10%胎牛血清；BeWo人绒毛癌上皮滋养层细胞培养条件：F-12K,15%胎牛血清；Caco-2人结肠腺癌上皮细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清和NEAA；Chang人肝脏上皮细胞培养条件：BME,10%小牛血清；HCT-15人结肠直肠腺癌上皮细胞培养条件：RPMI-1640,10%胎牛血清；HEp-G2人肝细胞癌上皮细胞培养条件：MEM,10% 胎牛血清和NEAA；HEp-2人喉癌上皮细胞培养条件：MEM,10% 胎牛血清;或RPMI-1640,10%胎牛血清；HT-29人结肠腺癌上皮细胞培养条件：McCoy',10%胎牛血清；JEG-2人绒毛膜癌上皮细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；KB人口腔癌上皮细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清和NEAA；Saos-2人骨肉瘤上皮细胞培养条件：McCoy',15%胎牛血清；WI-38人胚胎肺上皮细胞培养条件：BME,10%胎牛血清；WISH人羊膜上皮细胞培养条件：BME, 10%胎牛血清；HUVEC人脐带内皮细胞培养条件：F-12K,10%胎牛血清和肝素100ug/ml；IM-9人瘤成淋巴细胞培养条件：RPMI-1640,10%胎牛血清；Daudi人淋巴瘤细胞培养条件：RPMI-1640,10%胎牛血清；Clone M-3小鼠黑素瘤上皮细胞培养条件：F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清；BHK-21仓鼠肾成纤维细胞培养条件：GMEM,10%胎牛血清或MEM,10%胎牛血清和NEAA；CHO-K1仓鼠卵巢上皮细胞培养条件：F-12,10%胎牛血清；IEC-6大鼠正常小肠上皮样培养条件：DMEM,5%胎牛血清,胰岛素0.1μg/ml；COS-1猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；COS-3猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；COS-7猴非洲绿猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清
NCI-H1651[H1651]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SMC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
A-427细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
抗生素培养基9号，英文名：Medium 9（Polymyxin Base Agar，用途：用于微生物方法测定抗生素效价
淀粉铵盐培养基，英文名：Starch Ammonium Salt Medium，用途：用于放线菌的分离和计数
BDS培养基，英文名：Bacteroid Selective Agar，用途：用于拟杆菌的选择性分离
改良布氏肉汤培养基，英文名：Brucella Broth,Modified，用途：用于空肠弯曲杆菌的增菌培养
细胞形态特性：详见细胞说明书
DCR培养基，英文名：DCR Medium，用途：含蔗糖和琼脂，用于松、杉等植物的组织培养
黄豆粉琼脂培养基，英文名：Bean Agar Medium，用途：用于放线杆菌的筛选和培养
PG-BE1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MDCK-II细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，3-4天传1次
H-4-II-E细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人白介素1受体关联激酶3(IRAK3)ELISA试剂盒，英文名：Human IRAK3 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM.CSF)ELISA试剂盒，英文名：GM.CSF ELISA Kit，规格：48T/96T
韦荣氏球菌培养基基础，英文名：Veillonella Medium Base，用途：用于韦荣氏球菌的培养，每100ml添加2支60%乳酸钠溶液
细胞背景资料：详见相关文献介绍
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-70℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml；培养细胞12到24小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约80x离心2到3分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约1012个，可以区分为200多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
碎肉碳水化合物肉汤基础，英文名：Chopped Meat Carbohydrate Broth（CMC），用途：用于厌氧菌特别是专性厌氧菌的培养,含VK ,需添加庖肉牛肉粒
不含糖平板计数琼脂，英文名：Plate Count Agar without Dextrose，用途：用于细菌总数测定和细菌培养
苛养厌氧菌肉汤，英文名：Fastidious Anaerobe Broth (FAB)，用途：用于厌氧菌的增菌培养,含0.075%琼脂
阴沟肠杆菌分离琼脂(ECIA)，英文名：Enterobacter Cloacae Isolation Agar，用途：用于阴沟肠杆菌的分离
Mouse podocyte细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MSTO-211H细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
SCH细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
DF-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
rRTEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
sf9细胞专业复苏；细胞生长特性：混合生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：5传代；2-3天换液1次。
大鼠脊髓灰质炎病毒受体相关蛋白1(PVRL1)ELISA试剂盒，英文名：PVRL1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠结合珠蛋白(Hpt)ELISA试剂盒，英文名：Hpt ELISA Kit，规格：48T/96T
人纤溶酶原激活物YZ因子2(PAI2)ELISA试剂盒，英文名：Human PAI2 ELISA Kit，规格：48T/96T
SB琼脂，英文名：Super Broth Agar，用途：用于基因工程大肠杆菌的计数和培养
双歧杆菌BS培养基，英文名：Bifidobacterium BS Medium，用途：用于双歧杆菌的分离培养
沙氏葡萄糖琼脂培养基(含抗生素)，英文名：Sabouraud-glucose Agar with antibiotics，用途：用于霉菌、酵母菌的分离和培养
HEEpiC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
PIG1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
WEHI-3B细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠阻抑素(PHB)ELISA试剂盒，英文名：PHB ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠谷酸半胱酸连接酶(GCLM)ELISA试剂盒，英文名：Mouse GCLM ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠心营养素样细胞因子1(CLCF1)ELISA试剂盒，英文名：CLCF1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人胎盘胶原凝集素1(CLP1)ELISA试剂盒，英文名：Human CLP1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
人膜联蛋白A2(ANXA2)ELISA试剂盒，英文名：Human ANXA2 ELISA Kit，规格：48T/96T
改良克氏双糖铁培养基，英文名：Modified KIA Iron Medium，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的初步鉴定
麦氏(Meclary)琼脂，英文名：Meclary Agar，用途：用于真菌培养
改良TGC流体培养基(无指示剂)，英文名：TGC Medium without Indicator ,Fluid，用途：用于无菌检验
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)，英文名：Yeast Extract Peptone Dextrose Agar，用途：用于真菌计数
2×YT培养基，英文名：2×YT Medium，用途：用于重组大肠杆菌菌株的培养
SW 954[SW-954,SW954]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
VCaP细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
SCC-25细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
293A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MD培养基，英文名：Minimal Dextrase Medium，用途：用于酵母菌的筛选
MEF(CF-1)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OAW42细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MFC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
养了几年细胞，说一点自己培养细胞方面的看法：1)培养细胞前，可以看看细胞特点说明书，包括细胞正常生长的状态图、传代、培养基的类型等；2)不同细胞生长周期不同，有的生长很快，比如说MDA-MB-231，传代的时候取离心悬液的十分之一就已经足够了，有的又是特别慢，等的人心焦，BT474就是，传代是一分二，复苏起始的时候两周多才能长满，所以就要在培养细胞的过程中多多摸索了；3)对于娇弱的细胞，就得细心呵护了，胰酶消化不能过久，吹得时候要轻柔，离心时候也要注意转速和时间，每天都要去看一下细胞，肉眼观察培养基状况、显微镜下观察细胞生长状况；4)冻存细胞复苏后第二天Z好更换一次培养基；5)培养箱隔一段时间彻底用酒精棉擦洗一次；6)养细胞的教训：不能偷懒!细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。1)不管买的细胞、惠赠的细胞，刚拿到手赶紧做两件事：检测是否有支原体污染; 迅速扩增冻存；2)发现有污染迅速处理掉，特别是当你养了很多种细胞时; 细菌污染，真菌污染很容易发现，支原体污染的话，细胞会长的慢，买个支原体检测的kit定期检测一下；3)传代细胞日常的值日清洁是必须的，此外还要定期熏蒸；4)细胞的传代一定要规律，保持相同的confluency和传代时间间隔，不要随心所欲或者拖延；5)注意个人卫生。
NCI-H920细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。