Ealy926人肠系膜下腔动脉血管内皮细胞系 复苏团队专注复苏

Ealy926人肠系膜下腔动脉血管内皮细胞系 复苏团队专注复苏
SHG44细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
F-36P细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：每周2次换液
SK-MEL-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：3-1：5传代，2-3天换液1次。
小鼠神经营养因子3(NT3)ELISA试剂盒，英文名：Mouse NT3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人VI型胶原(COL6)ELISA试剂盒，英文名：Human COL6 ELISA Kit，规格：48T/96T
NCI-H498细胞专业复苏；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1581[H1581]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NOMO-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代；
很多朋友讨论细胞培养问题，见到很多很好的经验总结，这里说一些我个人的经验，因为一些比较特殊的原因，我自己培养接触过近300种细胞，常用于做实验的，累积有百余种，可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇ZT，并不是因为细胞消化Z重要，而是近期看到大家频繁讨论这个话题，我就抛砖引玉，下面几点拙见，可能与其它朋友总结的一些经验有点出入，仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很多有价值的经验，也见到很多人的困惑。其实细胞培养，尤其是细胞系的培养，就消化而言，不是太难，做得多了，善于总结经验，就能把细胞越养越好。一般的程序步骤，细节操作，我这里就不讲了，只讲一些基本操作背后的知识，如果不对之处，欢迎指正，总结下来，细胞培养中消化很重要，但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要)，关键所在是细胞来源，血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题，很多时候bottleneck没有找到，虽然通过其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作，总觉得自己没有经验，而忽视试剂，溶液尤其是细胞的质量，后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
脱弧菌培养基基础，英文名：Desulfovibrio Medium Base（DSMZ Medium 63），用途：用于脱弧菌的培养，每100ml添加1支脱弧菌培养基添加剂
抗生素培养基1号，英文名：Medium 1（Penassay Seed Agar），用途：用于微生物方法测定抗生素效价
GYCA培养基，英文名：Glucose Yeast extract Calcium carbonate Medium，用途：用于甘蔗流胶病菌检验
人肺耐药蛋白(LRP)ELISA试剂盒，英文名：Human LRP ELISA Kit，规格：48T/96T
RWPE1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Mv 1 Lu(NBL-7)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HTR-8/Svneo细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠肝素辅助因子II(HC II)ELISA试剂盒，英文名：HC II ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞背景资料：详见相关文献介绍
小鼠甘露糖结合凝集素C(MBL-C)ELISA试剂盒，英文名：Mouse MBL-C ELISA Kit，规格：48T/96T
含糖牛肉汤琼脂培养基，英文名：Beef soup Agar Medium with Lactose，用途：用于乳酸菌计数
mCPC琼脂基础(CC琼脂基础)，英文名：Modified Cellobiose-Polymyxin B-Colistin Agar Base，用途：用于创伤弧菌的分离,每90ml添加2支25%纤维二糖溶液、1支多粘菌素E和1支多粘菌素B溶液
察氏酵母膏琼脂(CYA)，英文名：Czapek Yeast Exatract Agar，用途：用于霉菌的分离和培养
人胱天蛋白酶4(CASP4)ELISA试剂盒，英文名：Human CASP4 ELISA Kit，规格：48T/96T
KE-37细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
VERO 76细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞冻存基本方法：1．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞24小时前换液一次。2．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达5×10(6)/ml，离心去上清，吸入离心管中。3．冻存液：先用培养液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加1.5毫升细胞悬液。5．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小Pai，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。
甘露醇发酵培养基，英文名：Mannitol Fermentation Medium，用途：用于甘露醇发酵试验
Stuart运送培养基，英文名：Stuart Transport Medium，用途：用于致病菌标本的采集、运输和保存
葡萄糖半固体琼脂，英文名：Dextrose Semisolid Agar，用途：用于葡萄糖利用(产酸、产气)实验
山梨醇麦康凯琼脂(CT-SMAC琼脂基础)，英文名：Sorbitol MacConkey Agar (CT-SMAC Agar Base)，用途：用于O157菌选择性分离,每100ml中添加亚碲酸钾溶液和头孢克肟溶液各1支,组成改良山梨醇麦康凯琼脂
人3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)ELISA试剂盒，英文名：Human HMGCS1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
人鼠嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)ELISA试剂盒，英文名：Human ECF ELISA Kit，规格：48T/96T
HEL 92.1.7细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：成淋巴细胞；细胞传代方法：每周2-3次。
HS776T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TYK-nu细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
HT细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：每2-3天换液
Waksman液体培养基，英文名：Waksman Medium，用途：用于氧化杆菌的培养
T1N1琼脂，英文名：T1N1 Agar，用途：用于霍乱弧菌的纯化
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
碎肉培养基基础，英文名：Broken Meat Medium Base，用途：用于杆菌的培养,需添加庖肉牛肉粒
志贺氏菌增菌肉汤基础，英文名：Shigella Broth Base，用途：用于志贺氏菌选择性增菌,每225ml中添加1支新生霉素溶液
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)，英文名：Violet-Red Bile Agar with Glucose and Lactose，用途：含乳糖、葡萄糖。用于阪崎肠杆菌的分离
M9CA肉汤，英文名：M9CA Broth，用途：用于培养重组大肠杆菌菌株
改良Letheen琼脂基础，英文名：Letheen Agar Base, Modified，用途：用于卫生微生物检测,需添加7g/L吐温80
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
小鼠可溶性血小板内皮细胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA试剂盒，英文名：Mouse sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠白介素12(IL-12/P40)ELISA试剂盒，英文名：IL-12/P40 ELISA Kit，规格：48T/96T
人可溶性E选择素(Ses)ELISA试剂盒，英文名：Human Ses ELISA Kit，规格：48T/96T
培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染)，在冻存前1d换液；2)按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×10／ml左右密度，离心，去上清；3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml)，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO)或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外；4)分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液；5)旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记；6)冻存：在特殊的仪器或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min时间内，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞内水分透出，太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套，以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管；2)迅速放入36℃～37℃水浴，不时摇动，使其急速融化，30～60s内完成；3)冻存管用70％酒精擦拭消毒后，打开盖子，用吸管将细胞悬液注入离心管中，再滴加10ml培养液；4)低速离心(500～1000r／min) 5min，去上清后再用培养液洗一次；5)用培养液适当稀释后，装入培养瓶37℃培养，次日更换一次培养液后，继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分，密度应达到10／ml，在融后稀释20倍时，仍能保持5×10／ml数量。
酸性肉汤，英文名：Acid Broth，用途：用于酸性罐头食品无菌检验
细胞形态特性：详见细胞说明书
金氏B培养基，英文名：King’s B Medium，用途：用于绿脓杆菌产荧光鉴定,每100ml添加1ml甘油(甘油)
甘露醇化钠琼脂琼脂培养基，英文名：Mannitol Salt Agar，用途：ZG药典2015，用于金黄色葡萄球菌选择性分离
NHEK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
NCI-H209[H209]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 274.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2传代,每周换液2-3次。
SNU-C2B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCT-8[HRT-18]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。