HREpiC人肾脏上皮细胞系 专业实验人员复苏

HREpiC人肾脏上皮细胞系 专业实验人员复苏
NCI-H2171细胞实验室；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：聚团悬浮；细胞传代方法：3-4天换液1次。
NCI-H1623[H1623]细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
很多朋友讨论细胞培养问题，见到很多很好的经验总结，这里说一些我个人的经验，因为一些比较特殊的原因，我自己培养接触过近300种细胞，常用于做实验的，累积有百余种，可以说遇到过许多各式各样古怪的细胞。这里挑细胞消化开始做我的篇ZT，并不是因为细胞消化Z重要，而是近期看到大家频繁讨论这个话题，我就抛砖引玉，下面几点拙见，可能与其它朋友总结的一些经验有点出入，仅供大家参考。许多同学对细胞消化做了许多研究，得出了很多有价值的经验，也见到很多人的困惑。其实细胞培养，尤其是细胞系的培养，就消化而言，不是太难，做得多了，善于总结经验，就能把细胞越养越好。一般的程序步骤，细节操作，我这里就不讲了，只讲一些基本操作背后的知识，如果不对之处，欢迎指正，总结下来，细胞培养中消化很重要，但其实消化并不是细胞培养的关键所在(虽然很重要)，关键所在是细胞来源，血清质量和水源(自己配制溶液的话)。我看到版上许多人养细胞遇到各种各样的问题，很多时候bottleneck没有找到，虽然通过其它方法有所改善，但仍然是事倍功半。因为人们往往注意自己的操作，总觉得自己没有经验，而忽视试剂，溶液尤其是细胞的质量，后者其实才是许多细胞培养实验室常见的问题。
EAG3细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
VMRC-RCZ细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：6传代
小鼠凋亡相关因子(FAS)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse FAS ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
大鼠B细胞淋巴瘤因子10(BCL-10)ELISA定量试剂盒，英文名：BCL-10 ELISA Kit，规格：48T/96T
人胸腺肽β10(TMSβ10)ELISA定量试剂盒，英文名：Human TMSβ10 ELISA Kit，规格：48T/96T
293 Cells,low passage细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H660细胞实验室；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：2-3天换液1次。
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞（绝大部分1min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化。2，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-3细胞），吹打不超过20次后（一般10次即可），成小规模聚集（10个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打1h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），比如HCT15, LS411和KM12，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100mm dish，一次Z多加入500ul，就足够了，一般我加300ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙状移动。
公司主营ATCC、DSMZ、RIKEN、ScienCell、INCELL、Promocell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外大学来源细胞系及原代细胞，全程提供细胞系背景、生长特性、来源、器官、类型、形态、培养条件、应用、系、疾病、组织、冻存条件、传代方法等复苏及冻存说明书信息，我们拥有丰富的细胞系培养经验，能提供细胞培养全方位的技术支持，让您实验再无烦扰！公司由在国外工作和学习多年的留学人员创办，由国内ZG科学院上海生物化学与细胞生物学研究所，复旦大学，同济大学等多名工作在线的细胞培养专家，提供细胞培养技术支持。公司依靠自身一些的技术和理念，以世界的技术支撑阵容，提供一系列细胞相关的技术服务。为ZG的生命科学事业赶超欧美，提供了重要的基石；公司将依靠自主研究开发的高技术高质量和有的价格竞争力的产品，立足国内，面向世界。力争打破国外大公司在细胞培养科学领域接近垄断的地位，为ZG在生命科学的这一领域一席之地。公司筹划未来三年内，在沈阳、济南、北京、西安、宁夏、武汉、等国内代表城市建立细胞培养分实验室，以便更好的服务国内广大医院、大学、制药企业等，你们的每一份关心和支持，都是我们前进的动力！
小鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse AFP ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠免疫核糖核酸(IIRNA)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse IIRNA ELISA Kit，规格：48T/96T
SW480细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代，1-2天换液一次
细胞背景资料：详见相关文献介绍
RS4;11细胞实验室；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：成淋巴细胞；细胞传代方法：每周2-3次
LM-3细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人核糖核酸YZ因子(RI)ELISA定量试剂盒，英文名：Human RI ELISA Kit，规格：48T/96T
HBE细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
MKN-28细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
SW1783细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1755细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
人GDP解离YZ因子1(GDI1)ELISA定量试剂盒，英文名：Human GDI1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠内皮素受体A(ETRA)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse ETRA ELISA Kit，规格：48T/96T
人肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)ELISA定量试剂盒，英文名：Human HB-EGF ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A375[A-375]细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CMT93细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HAmEpiC细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
U118MG细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠O-6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMP)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse MGMP ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠胱天蛋白酶11(CASP11)ELISA定量试剂盒，英文名：CASP11 ELISA Kit，规格：48T/96T
Hacat细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
P3X63-Ag8.653细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
tpc-1细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
NCI-H2066细胞实验室；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：聚团悬浮；细胞传代方法：每周换液2-3次
NCI-H1975[H-1975,H1975]细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠Ⅳ型胶原(COL4)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse COL4 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse OIT3 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse AT ELISA Kit，规格：48T/96T
人C4结合蛋白(C4BP)ELISA定量试剂盒，英文名：Human C4BP ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠CCAAT增强子结合蛋白γ(CEBPγ)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse CEBPγ ELISA Kit，规格：48T/96T
C4-2细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SU-DHL-10细胞实验室；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
HEKa细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
VMM细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸氧化酶1(NOX1)ELISA定量试剂盒，英文名：Human NOX1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse MIP1α ELISA Kit，规格：48T/96T
人凝血因子Ⅻ(F12)ELISA定量试剂盒，英文名：Human F12 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠组织蛋白酶B(CTSB)ELISA定量试剂盒，英文名：CTSB ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞形态特性：详见细胞说明书
SK-MEL-3细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：3-1：5传代，2-3天换液1次。
MGC-803细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，2-3天换液一次
TMK-1细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 695T细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2-1：4传代，2-3天换液1次。