ECV-304[ECV304,ECV304]人脐静脉内皮细胞系 专业实验人员复苏

ECV-304[ECV304,ECV304]人脐静脉内皮细胞系 专业实验人员复苏
NCI-H2286[H2286]细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HNE3细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
【胰蛋白酶消化操作】1)加入消化液：小心吸出旧培养液，用PBS清洗(冲洗)，加入适量消化液(胰蛋白酶液)，注意消化液的量以盖住细胞Z好，消化温度是37℃；2)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度；(3)吸弃消化液加入培养液：弃去胰蛋白酶液，注意更换吸管，加入新鲜的培养液。【吹打分散细胞操作】1)吹打制悬：用滴管将已经消化细胞吹打成细胞悬液；2)吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10ml离心管中；3)平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1000转/分钟离心6-8分钟；4)弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2ml培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。【分装稀释细胞操作】1)显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml。要做好标记；2)分装：将细胞悬液吸出分装至2～3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖；3)继续培养：用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。
JB6Cl30-7b细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
Jurkat, Clone E6-1细胞实验室；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠天冬酸基转移酶(AST)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse AST ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
小鼠凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX1)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse LOX1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人基质细胞抗原1(BST1)ELISA定量试剂盒，英文名：Human BST1 ELISA Kit，规格：48T/96T
SW-13细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
COR-L88细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞培养过程中相关问题总结：悬浮性细胞应如何继代处理？一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中，稀释细胞浓度即可，若培养液太多时，可将培养角瓶口端稍微抬高，直到无法容纳为止。分瓶时取出一部份含细胞之培养液至另一新的培养角瓶，加入新鲜培养基稀释至适当浓度，重复前述步骤即可。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速？欲回收动物细胞，其离心速率一般为300xg(约1,000rpm)，5-10分钟，过高之转速，将造成细胞死亡；细胞之接种密度为何？依照细胞株基本数据上之接种密度或稀释分盘之比例接种即可。细胞数太少或稀释的太多亦是造成细胞无法生长之一重要原因；细胞冷冻培养基之成份为何？动物细胞冷冻保存时Z常使用的冷冻培养基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原来细胞生长用之新鲜培养基均匀混合之。注意：由于DMSO稀释时会放出大量热能，故不可将DMSO直接加入细胞液中，必须使用前先行配制完成；DMSO之等级和无菌过滤之方式为何？冷冻保存使用之DMSO等级，必须为Tissue culture grade之DMSO，其本身即为无菌状况，次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中，保存于4°C，避免反复冷冻解冻造成DMSO之裂解而释出有害物质，并可减少污染之机会。若要过滤DMSO，则须使用耐DMSO之Nylon材质滤膜；冷冻保存细胞之方法？冷冻保存方法一：冷冻管置于4°C 30~60分钟→ (-20°C 30分钟)→-80°C 16~18小时(或隔夜)→液氮槽vaporphase长期储存。冷冻保存方法二：冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3°C至–80°C以下，再放入液氮槽vapor phase长期储存。-20°C不可超过1小时，以防止冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80°C冰箱中，惟存活率稍微降低一些；细胞欲冷冻保存时，细胞冷冻管内应有多少细胞浓度？冷冻管内细胞数目一般为1x10(6)cells/ml vial，融合瘤细胞则以5x10(6)cells/ml vial为宜；应如何避免细胞污染？细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之Z好方法；如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？直接灭菌后丢弃之。
细胞传代培养的胰酶消化法：传代培养：是指细胞从一个培养瓶以1：2或1：2以上的比例转移，接种到另一培养瓶的培养。传代细胞，可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代，部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代，或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。实验步骤：①入无菌室之前用肥皂洗手，再用75% 的酒精擦拭消毒双手；②倒置显微镜下观察细胞形态，确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热；③超净台台面应整洁，用75%酒精棉球擦拭清洁；④打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右，关闭紫外灯，打开风机清洁空气除去臭氧；⑤点燃酒精灯;取出无菌试管，巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内；⑥将培养用液瓶口用75%酒精消毒，过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上；⑦倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基，或用少量胰酶涮洗一下；⑧每个大培养瓶加入1ml胰酶，小培养瓶用量酌减，盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶，使细胞脱离胰酶，然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中；⑨加入少量的含血清的新鲜培养基，反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散，再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液，然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖，适度拧紧后稍回转，以利于CO2的进入，将培养瓶放回CO2培养箱；⑩对悬浮培养细胞，步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清，加入新鲜培养基，然后分装到各瓶中。
大鼠ADP核糖转移酶(ART)ELISA定量试剂盒，英文名：ART ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠间隙连接蛋白37(CX37)ELISA定量试剂盒，英文名：CX37 ELISA Kit，规格：48T/96T
MAEC细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞背景资料：详见相关文献介绍
S180细胞实验室；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A3细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠肺炎支原体抗体IgG(MP IgG)ELISA定量试剂盒，英文名：MP IgG ELISA Kit，规格：48T/96T
HCC1143细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2—1：4传代，每周换液2—3次
HGC-27细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满
SNU-C2A细胞实验室；细胞生长特性：松散附着、多单元的聚合；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：每周两次换液
GES1细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠p53正向凋亡调控因子(PUMA)ELISA定量试剂盒，英文名：PUMA ELISA Kit，规格：48T/96T
人嗅素3(OLFM3)ELISA定量试剂盒，英文名：Human OLFM3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人成纤维细胞生长因子17(FGF17)ELISA定量试剂盒，英文名：Human FGF17 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MDA-MB-330细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
L615细胞实验室；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KYSE-150细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
PC14细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse TRAb ELISA Kit，规格：48T/96T
人脆性X智力迟钝蛋白1(FMR1)ELISA定量试剂盒，英文名：Human FMR1 ELISA Kit，规格：48T/96T
HHSEC细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
C3A细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
WM-266-4细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
NCI-H2452[H2452]细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PLMVEC细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人CD8+分子(CD8+)ELISA定量试剂盒，英文名：Human CD8+ ELISA Kit，规格：48T/96T
人B细胞受体(BCR)ELISA定量试剂盒，英文名：Human BCR ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
小鼠B细胞激活因子受体(BAFFR)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse BAFFR ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠生长调节致癌基因y/黑素瘤生长刺激因子(BGOy/MGSA)ELISA定量试剂盒，英文名：Mouse BGOy/MGSA ELISA Kit，规格：48T/96T
人胞浆-5',3'-核苷酸酶(NT5C)ELISA定量试剂盒，英文名：Human NT5C ELISA Kit，规格：48T/96T
SV-HUC-1细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
MT2细胞实验室；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
YD15细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CCC-HEH细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠降素(CT)ELISA定量试剂盒，英文名：CT ELISA Kit，规格：48T/96T
人抗子宫内膜抗体(EMAb)ELISA定量试剂盒，英文名：Human EMAb ELISA Kit，规格：48T/96T
人激肽原1(KNG1)ELISA定量试剂盒，英文名：Human KNG1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人细胞附着蛋白相互作用蛋白(CYTIP)ELISA定量试剂盒，英文名：Human CYTIP ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞形态特性：详见细胞说明书
HO-8910PM细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
RASMCs细胞实验室；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
AM-38细胞实验室；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2传代
H-4-11-E细胞实验室；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。