95C人肺巨细胞癌细胞系 复苏实验室稳定传代

95C人肺巨细胞癌细胞系 复苏实验室稳定传代
SU-DHL-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
0.5%葡萄糖肉汤培养基，英文名：0.5% Glucose Broth Medium，用途：用于无菌检查
乳酸菌霉素琼脂1，英文名：Lactobacillus Chloramphenicol Agar 1，用途：——用于干酪乳杆菌的培养
孟加拉红培养基(虎红培养基)，英文名：Rose Bengal Medium，用途：用于真菌的分离和计数
细胞生长特性：贴壁
化钠多粘菌素B肉汤(SPB)基础，英文名：Sodium Chloride Polymyxin Broth Base，用途：用于副溶血性弧菌选择性增菌,每100ml添加1支多粘菌素B（2.5万单位）
沙氏葡萄糖琼脂培养基/沙氏琼脂培养基(SDA)，英文名：Sabouraud Dextrose Agar，用途：用于霉菌、酵母菌的计数和培养
MRS培养基(改良MRS培养基基础)，英文名：MRS Medium(Modified MRS Medium Base)，用途：用于乳酸菌计数,改良MRS培养基每100ml需添加1支莫匹罗星锂盐储备液
NCI-H1838[H1838]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
GIST-48细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
WM-266-4细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
大鼠激肽释放酶7(KLK7)ELISA试剂盒，英文名：KLK7 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠己糖激酶1(HK1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse HK1 ELISA Kit，规格：48T/96T
抗生素培养基3号，英文名：Medium 3（Penassay Broth），用途：用于微生物方法测定抗生素效价
细胞复苏基本方法：1．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。3．剪开纱布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加10ml培养液，吹打使细胞悬浮。4．低速离心（500～1000转/分）5分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。5．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。收到T25 flask细胞时，处理方式为：在寄送过程中，为避免起泡造成细胞脱落死亡，T25 flask均加满培养基。请检查flask外观，并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象，若有任何问题，不要打开盖子，请立即通知细胞实验室。将原封之T25 flask静置于37°C，5%CO2培养箱中，使细胞回温至37°C，并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后，于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用)，仅留约5-10ml培养基于flask内，依一般培养方式再将细胞置入培养箱中，或细胞已长满盘，则将细胞做传代培养。
Grein – Meyers 琼脂，英文名：Grein and Meyers Agar(Grein and Meyers, 1958)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
改良Letheen琼脂基础，英文名：Letheen Agar Base, Modified，用途：用于卫生微生物检测,需添加7g/L吐温80
改良GC肉汤基础，英文名：Modified Giolitti-Cantoni Broth Base，用途：用于葡萄球菌MPN计数,需添加0.1ml1%亚碲酸钾溶液(1%亚碲酸钾溶液)
MS大量元素，英文名：Murashige & Skoog Macronutrients，用途：用于植物组织培养
Granta-519细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞形态特性：详见细胞说明书
ESC-410细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KFB细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NUGC3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NB-4细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RWPE1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠趋化因子IP-4(IP-4)ELISA试剂盒，英文名：IP-4 ELISA Kit，规格：48T/96T
人泛素关联蛋白2(UBAP2)ELISA试剂盒，英文名：Human UBAP2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人原黏素α5(PCDHα5)ELISA试剂盒，英文名：Human PCDHα5 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠补体成分1受体(C1r)ELISA试剂盒，英文名：Mouse C1r ELISA Kit，规格：48T/96T
人乳腺丝抑蛋白(Maspin)ELISA试剂盒，英文名：Human Maspin ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
胰化大豆坚固绿琼脂(TSAF)，英文名：Tryptic Soy Fast Green Agar，用途：用于滤膜法细菌总数测定
1%吐温80-玉米琼脂培养基基础，英文名：1% Tween80-Corn Meat Agar Medium Base，用途：用于白色念珠菌产芽管试验,每100ml添加1ml吐温80(吐温80)
Middle Brook 7H10琼脂基础，英文名：Middle Brook 7H10 Agar Base，用途：用于分枝杆菌分离培养,每180ml添加1支甘油和4支Middlebrook OADC增菌液
酵母基础，无维生素，英文名：Vitamin Free Yeast Base，用途：用于通过维生素的利用对酵母菌进行分类
KF链球菌琼脂，英文名：KF Streptococcus Agar，用途：用于肠球菌、链球菌滤膜法计数和检验，每100ml培养基添加1支1%TTC溶液
U-118 MG细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：混合型；细胞传代方法： 消化3-5分钟。1：2传代。3天内可长满。
RBE4细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RPTEC Cell细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3—1：4传代，每周换液2—3次
HPA-s细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Eugon LT 100肉汤基础，英文名：Eugon LT 100 Broth Base，用途：用于中细菌总数的测定,每200ml添加1支吐温80
WEHI-3细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OCI-LY7细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 606.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2—1：3传代，2—3天换液一次
细胞背景资料：肺巨细胞癌
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。1)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；2)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；3)超净台的风机不能过大，风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染；4)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。
Hs 606.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2—1：3传代，2—3天换液一次
LCC1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCT-15[HCT15]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HSAS3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCC-95细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MCF 7B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人丝酸/苏酸激酶11(STK11)ELISA试剂盒，英文名：Human STK11 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
大鼠线粒体解偶联蛋白2(UCP2)ELISA试剂盒，英文名：UCP2 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠补体成分5a受体1(C5aR1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse C5aR1 ELISA Kit，规格：48T/96T
真杆菌选择性琼脂基础(ESA)，英文名：Eubacterium Selective Agar，用途：用于真杆菌的选择性分离
Slantz and Bartley 培养基，英文名：Slantz and Bartley medium，用途：用于肠球菌、粪链球菌的分离和培养
胰蛋白胨大豆琼脂/胰化大豆蛋白琼脂(TSA)，英文名：Tryptic Soy Agar，用途：用于细菌的计数和培养
OCM-1A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞（绝大部分1min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化。2，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-3细胞），吹打不超过20次后（一般10次即可），成小规模聚集（10个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打1h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），比如HCT15, LS411和KM12，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100mm dish，一次Z多加入500ul，就足够了，一般我加300ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙状移动。
HMVEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1869[H1869]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。