95D人肺巨细胞癌细胞系 复苏实验室稳定传代

95D人肺巨细胞癌细胞系 复苏实验室稳定传代
NCI-H1819[H1819]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
亮绿琼脂培养基，英文名：Brilliant Green-Agar Medium，用途：用于药品中沙门氏菌选择性分离
布鲁氏菌培养基基础，英文名：Brucella Medium Base，用途：每100ml添加5%血清以及1支布鲁氏菌选择性添加剂或改良布鲁氏菌选择性添加剂制备血清-葡萄糖-抗生素培养基
1/2MS培养基，英文名：1/2 Murashige & Skoog Medium，用途：大量元素减半，微量元素和维生素不变，不含琼脂和蔗糖
细胞生长特性：贴壁
Tergitol-7琼脂，英文名：Tergitol-7 Agar，用途：用于大肠菌群鉴定,每100ml添加2支0.05%TTC溶液
胰蛋白胨大豆琼脂/胰化大豆蛋白琼脂(TSA)，英文名：Tryptic Soy Agar，用途：用于细菌的计数和培养
黄原胶液体发酵培养基(淀粉)，英文名：Xanthan gum Fluid Medium with Starch，用途：以淀粉为碳源,用于黄原胶生产
RH30[RC13,RMS13,SJRH30]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HUASMC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PAEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA试剂盒，英文名：Human Gp49a ELISA Kit，规格：48T/96T
人血管紧张素II受体2(ANGⅡR2)ELISA试剂盒，英文名：Human ANGⅡR2 ELISA Kit，规格：48T/96T
6.5%化钠葡萄糖琼脂，英文名：6.5%Sodium Dextrose Agar，用途：用于肠球菌确证和培养
细胞培养中支原体污染的经验分享：支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长，营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%，支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达，又不能通过可视法对其进行检测，而且它对细胞的生长率影响较小，不易引起注意。国内外研究表明，95%以上是以下四种支原体：口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii)，为牛源性。以上是Z常见的污染细胞培养的支原体菌群，但能够污染细胞的支原体种类是很多的，国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中，主要从以下几个方面来预防支原体的污染：控制环境污染;严格实验操作；细胞培养基和器材要保证无菌；在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后，特别是重要的细胞株，有必要清除支原体，常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体Z突出的结构特征是没有细胞壁，一般来讲，对作用于细胞壁生物合成的抗生素，如万古霉素等完全不敏感；对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体Z有YZ活性及常用于支原体感染ZL的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小YZ作用，所以常不用来作为支原体感染的化学ZL剂。
乳糖胆盐发酵培养基，英文名：Lactose Bile Broth，用途：用于大肠菌群测定
亚铁琼脂，英文名：Ferrous sulfate Agar，用途：用于细菌试验
葡萄糖半固体琼脂，英文名：Dextrose Semisolid Agar，用途：用于葡萄糖利用(产酸、产气)实验
PPLO 肉汤基础，英文名：PPLO Broth Base，用途：无红,用于支原体的培养
HECCL-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞形态特性：详见细胞说明书
CBRH-7919细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OCI-LY7细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LN382细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RCC4细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
C8-D1A [Astrocyte type I clone]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：神经元细胞；细胞传代方法：1：4-1：6传代；每周换液2-3次。
大鼠骨成型蛋白2(BMP2)ELISA试剂盒，英文名：BMP2 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠白细胞分化抗原19(CD19)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CD19 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒，英文名：MIP-2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人C-型凝集素域家族11成员A(CLEC11A)ELISA试剂盒，英文名：Human CLEC11A ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt)ELISA试剂盒，英文名：Mouse Hpt ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
SB琼脂，英文名：Super Broth Agar，用途：用于基因工程大肠杆菌的计数和培养
抗生素培养基13号，英文名：Medium 13（Sabouraud LiquidBroth,Modified），用途：用于微生物方法测定抗生素效价
淀粉酪蛋白琼脂(SCA)，英文名：Starch Casein Agar(Kuster and Williams, 1964)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
支原体肉汤基础(Frey)，英文名：Mycoplasma Broth Base（Frey），用途：无红,用于支原体培养,每 100ml 添加 10ml 马血清
ER培养基，英文名：ER Medium，用途：广泛用于植物组织培养
SW13细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
DMS 273细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NK-92MI[NK92MI]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BV2细胞专业复苏；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
APT琼脂，英文名：APT Agar，用途：用于乳酸菌的分离培养
PCK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Jurkat D,E细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2171[H2171]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞背景资料：巨细胞肺癌
【细胞培养中原虫的污染情况总结】原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，形成恶性循环。污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中(不加细胞)，37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。也可以在培养基中事先加入双抗(酸链霉素和苄青霉素)。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。1)孵箱应定期用三氧机消毒或者紫外光照射，并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水；2)超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素；3)超净台的风机不能过大，风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染；4)无菌室经甲醛熏蒸消毒后，可用同等量的喷洒中和，约几小时即可进入操作。
SNU-C2A细胞专业复苏；细胞生长特性：松散附着、多单元的聚合；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：每周两次换液
NS20Y细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ADTC5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PA317细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Ana-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
Bel-7405细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人趋化因子C-C-基元配体1(CCL1)ELISA试剂盒，英文名：Human CCL1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
人抗浦肯野细胞抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)ELISA试剂盒，英文名：Human PCA-1/Yo ELISA Kit，规格：48T/96T
人硬皮病抗体70(Scl-70 Ab)ELISA试剂盒，英文名：Human Scl-70 Ab ELISA Kit，规格：48T/96T
盐还原菌培养基F，英文名：Postgate’s Medium F for Sulfate Reducers，用途：含琼脂,用于脱微生物的培养和计数,每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
根瘤菌培养基YM，英文名：Nodule Bacteria Medium YM，用途：用于根瘤菌的培养
巧克力血琼脂培养基基础，英文名：Chocolate Blood Agar Medium Base，用途：用于奈瑟球菌、流感嗜血杆菌的培养,需添5%~10%无菌脱纤维绵羊全血
C8-D1A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞消化过程总结：其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞（绝大部分1min不到）。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化。2，什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了（虽然没有呈现很广的离散分布）。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液（不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开）。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的（比如Calu-3细胞），吹打不超过20次后（一般10次即可），成小规模聚集（10个细胞左右），是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打1h，等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞（润洗方法5min还不能消化），比如HCT15, LS411和KM12，这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育，但也不需要很多，一般100mm dish，一次Z多加入500ul，就足够了，一般我加300ul。即使这样难消化的细胞，一般不超过5min，即可见细胞成片移动，就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候，比如tsDC细胞，但也只要用少量胰酶孵育，3min左右即可看到成片沙状移动。
ECA109细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SNU-449细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；多角形；细胞传代方法：1：5-1：10传代；每周2-3次