B10BR小鼠永生化黑素细胞系 消化时需注意什么

B10BR小鼠永生化黑素细胞系 消化时需注意什么
K氏培养基基础，英文名：K’s Medium Base，用途：用于饮料中耐热耐酸菌的检测,需使用苹果酸调节pH
BL琼脂基础，英文名：BL Agar Base，用途：用于双歧杆菌的分离和培养,需添加5%脱纤维马血
大鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒，英文名：IL-2R ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒，英文名：Mouse TPO ELISA Kit，规格：48T/96T
TCBS琼脂，英文名：Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrous Agar，用途：用于副溶血性弧菌选择性分离
CaSki细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BHP 10-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MiaPaCa-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁
黄豆粉琼脂培养基，英文名：Bean Agar Medium，用途：用于放线杆菌的筛选和培养
人天门冬酸基转移酶(AST)ELISA试剂盒，英文名：Human AST ELISA Kit，规格：48T/96T
人兴奋性基酸转运蛋白5(EAAT5)ELISA试剂盒，英文名：Human EAAT5 ELISA Kit，规格：48T/96T
人血管紧张素2受体2(AT-2)ELISA试剂盒，英文名：Human AT-2 ELISA Kit，规格：48T/96T
AZ521细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小川氏培养基基础，英文名：Ogawa Medium Base，用途：用于结核杆菌的药敏试验、分离和培养,需添加甘油和全蛋液
改良克氏柠檬酸盐琼脂，英文名：Christensen Citrate Agar , Modified，用途：——用于柠檬酸盐利用实验
库斯特琼脂基础，英文名：Kuster’s Agar Base(Kuster, 1963)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定，每100ml添加1支甘油
桔汁肉汤(10倍浓缩)，英文名：Orange Serum Broth Concentrate 10×，用途：用于耐酸细菌的培养
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
马铃薯琼脂，英文名：Potato Agar，用途：不含葡萄糖，用于霉菌的分离培养
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化，2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；4)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；5)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；6)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO2培养箱中进行培养；7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2～3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；2)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
LUDLU-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
mousepodocyte细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
NKM-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BE(2)C细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
QBC939细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MM96L细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
三糖铁(TSI)琼脂，英文名：Triple Sugar Iron Agar，用途：用于细菌生化试验（GB/SN）,亚铁铵
吡嗪酰胺酶检测酪蛋白大豆琼脂，英文名：Casein Digest Soybean Agar for Pzase Test，用途：用于吡嗪酰胺酶检测，溶解于Tris-马来酸缓冲液(0.2mol/L,pH6)中
NCI-H2009细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：每周换液2-3次。
SK-MEL-28细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCC1187细胞专业复苏；细胞生长特性：混合生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代，每周换液2—3次
人可溶性CD44分子(sCD44)ELISA试剂盒，英文名：Human sCD44 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠糖皮质类固醇受体(GR)ELISA试剂盒，英文名：GR ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞背景资料：永生化黑素细胞
人成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA试剂盒，英文名：Human FGF9 ELISA Kit，规格：48T/96T
BV2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MDCK[NBL-2]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
4T1.2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LUDLU-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
H3255细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
P3HR-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：每2-3天换液
小鼠肌醇3激酶(PI3K)ELISA试剂盒，英文名：Mouse PI3K ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠补体成分8γ(C8γ)ELISA试剂盒，英文名：Mouse C8γ ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒，英文名：AFP ELISA Kit，规格：48T/96T
人三叶因子1(TFF1)ELISA试剂盒，英文名：Human TFF1 ELISA Kit，规格：48T/96T
乳酸菌霉素琼脂2，英文名：Lactobacillus Chloramphenicol Agar 2，用途：——用于干酪乳杆菌和乳酸片球菌的培养
抗生素培养基E(PH7.9)，英文名：Medium E（PH7.9），用途：用于抗生素检验
橄榄油培养基基础，英文名：olive oil medium for Malassezia，用途：用于马拉色菌的培养，每80ml添加3.2ml橄榄油
改良Letheen琼脂基础，英文名：Letheen Agar Base, Modified，用途：用于卫生微生物检测,需添加7g/L吐温80
细胞形态特性：详见细胞说明书
TGBC11TKB细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2传代
SW1353细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
培养细胞真的不难，Z关键几点：1)所有的东西使用Z好的，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；2)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；3)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；4)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；5)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，Z近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；6)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；2)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；4)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；5)晚上离开的时候Z好给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；6)Z好的是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
连四盐肉汤培养基基础，英文名：Fluid Tetrathionate Medium Base，用途：用于沙门氏菌选择性分离,每100ml添加碘溶液、0.1%煌绿溶液各1支
抗生素培养基13号，英文名：Medium 13（Sabouraud LiquidBroth,Modified），用途：用于微生物方法测定抗生素效价
酵母浸粉葡萄糖琼脂，英文名：Yeast Extract Glucose Agar，用途：用于地衣芽孢杆菌、芽孢菌、密执安棍状杆菌、金黄杆菌、蜂房哈夫尼菌、荧光假单胞菌和粘质沙雷氏菌的培养
SNU-368细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
NCI-H2141细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：聚团悬浮；细胞传代方法：3-4天换液1次。
293C18(293E)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW 626细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HUVEC(HUV-EC-C)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CHO-dhFr-细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PPLO 肉汤基础，英文名：PPLO Broth Base，用途：无红,用于支原体的培养
马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，英文名：Potato Dextrose Agar Medium，用途：ZG药典2015，用于霉菌和酵母菌计数
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-70℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml；培养细胞12到24小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约80x离心2到3分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约1012个，可以区分为200多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
BPH-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
GT1.1 /GT1-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
JB6-C30细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)ELISA试剂盒，英文名：PICK1 ELISA Kit，规格：48T/96T