hEM1人永生化子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞系 能稳定传代多少次

hEM1人永生化子宫内膜异位症患者在位内膜间质细胞系 能稳定传代多少次
HFL-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
143TK-细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
VP267细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1092[H1092]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BIU-87细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。传代细胞培养操作步骤：1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化，2-5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；4)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；5)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；6)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO2培养箱中进行培养；7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2-3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。
HLEC(晶状体)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤(TPGY)，英文名：Tryptone Glucose Yeast extract Broth，用途：用于细菌增菌培养
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(亮酸缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Leuci，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
YPD琼脂，英文名：YPD Agar，用途：用于分子生物学实验中酵母菌的培养和保存
细胞形态特性：详见细胞说明书
察氏酵母膏琼脂(CYA)，英文名：Czapek Yeast Exatract Agar，用途：用于霉菌的分离和培养
小鼠原肌球调节蛋白3(TMOD3)ELISA试剂盒，英文名：Mouse TMOD3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人骨素(OC)ELISA试剂盒，英文名：Human OC ELISA Kit，规格：48T/96T
LAPT肉汤，英文名：LAPT Broth，用途：基础培养基,用于乳酸菌的培养
SIM动力培养基，英文名：SIM Power Medium，用途：用于细菌动力试验
SK-BR-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满
SW527细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
RTE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人核苷化酶(NP)ELISA试剂盒，英文名：Human NP ELISA Kit，规格：48T/96T
轻唾琼脂培养基(MSA)基础，英文名：Mitis Salivarius Agar Base，用途：用于轻唾链球菌的分离培养,每200ml添加1支亚碲酸钾溶液
药敏试验肉汤，英文名：Sensitivity Disk Broth，用途：用于抗生素药敏试验
pH7.4盐缓冲液(PBS)，英文名：pH7.4 PBS Broth，用途：用于样品制备
桔汁肉汤(10倍浓缩)，英文名：Orange Serum Broth Concentrate 10×，用途：用于耐酸细菌的培养
细胞背景资料：子宫内膜间质细胞；永生化；女性
G401细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠组织蛋白酶D(CTSD)ELISA试剂盒，英文名：CTSD ELISA Kit，规格：48T/96T
MOLM-13细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCGC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CAL62细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒，英文名：Human BMP-2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人抗存活素抗体/生存蛋白(Surv)ELISA试剂盒，英文名：Human Surv ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人胞浆抗蛋白水解酶3(CAP3)ELISA试剂盒，英文名：Human CAP3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人谷胱甘肽S-转移酶Ω1(GSTo1)ELISA试剂盒，英文名：Human GSTo1 ELISA Kit，规格：48T/96T
DCR培养基，英文名：DCR Medium，用途：含蔗糖和琼脂，用于松、杉等植物的组织培养
麦芽糖酵母浸粉琼脂，英文名：Maltose yeast extract agar (Okazaki and Okami, 197，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
培养细胞真的不难，Z关键几点：1)所有的东西使用Z好的，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；2)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；3)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；4)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；5)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，Z近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；6)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；2)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；4)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；5)晚上离开的时候Z好给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；6)Z好的是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
CEM-T4细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HcerEpic细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
T98细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ESC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A-375[A375]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NALM-6细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
改良爱德华培养基基础，英文名：Edwards Medium Base,Modified，用途：用于无乳链球菌的选择性分离,每升添加5～7%无菌脱纤维绵羊全血
山梨醇麦康凯琼脂(CT-SMAC琼脂基础)，英文名：Sorbitol MacConkey Agar (CT-SMAC Agar Base)，用途：用于O157菌选择性分离,每100ml中添加亚碲酸钾溶液和头孢克肟溶液各1支,组成改良山梨醇麦康凯琼脂
细胞生长特性：贴壁
放线菌肉汤，英文名：Actinomycete Broth，用途：用于放线菌的培养
细胞复苏相关注意事项：1.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。2.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)Z好选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。4.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。5.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
葡萄糖琼脂，英文名：Dextrose Agar，用途：用于肠杆菌生化试验
萨氏液体培养基(SDY培养基)，英文名：Sabouraud Dextrose Medium with Yeast Extract，用途：——用于真菌的培养
2216E琼脂，英文名：Zobell Marine Agar 2216，用途：用于海生细菌的培养和计数
泛酸测定培养基，英文名：Pantothenic Acid Assay Medium，用途：用于泛酸的测定
YPD肉汤，英文名：YPD Broth，用途：用于分子生物学实验中酵母菌的培养和保存
SHG-44细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。