VSC4.1大鼠脊髓前角运动神经元瘤细胞系 能稳定传代多少次
CaES-17细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
Hs 578Bst细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H157细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
TGW细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:神经元细胞;细胞传代方法:1:2传代
SCC-9细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
养科研细胞是生物医学研究的基本功。有三个小经验可以和大家分享一下:1)不要烧瓶口。大多数人都喜欢在酒精灯的火焰上关瓶子,觉得这样可以避免污染。不知道大家是不是有培养基怎么越用越发紫的困惑?知道为什么吗?烧瓶口烧的。培养基一般都是用碳酸/碳酸跟作缓冲体系。瓶口在火焰上的时候,炽热的空气进入瓶内。塞紧塞子放入冰箱后,空气变冷,压力骤降,培养基中的碳酸就会转化成二氧化碳,释放出来。培养基中的碳酸少了,当然会变碱。如果不烧瓶口的话,你会发现培养液变碱的速度会大大减慢。(当然多多少少还是会有一点越用越碱,因为室温还是比冰箱内的温度高),其实烧瓶口防止污染纯粹是心理安慰。不妨试一下把手指在火上晃几下,你会发现根本就不会烧疼。如果有细菌的话,这么晃两下也烧不死多少。要想烧死全部细菌,除非把瓶口和塞子烧红。我在国内从来就不烧瓶口。来以后发现这里更彻底,超净台内根本就不点酒精灯;2)不要频繁看细胞。对于初学者而言,养细胞就像养孩子一样,有空就要去看看。细胞越是养不好,就越是经常去看。实际上看细胞对细胞的生长没有任何好处,特别是对原代细胞或是免疫磁珠分选后,密度特别低的细胞。培养基中的生长因子是非常有限的。细胞好不容易自分泌一点儿促生长的因子在其周围,形成有利于生长的局部环境。你跑去看细胞,培养瓶这么一晃,把因子都给晃散了。经常可以看到新手一天到晚都在看细胞,细胞老是长不好。老手细胞一扔好几天不管,细胞疯长;3)不要怕消化。在传代的时候,初学者往往生怕细胞消化过度,早早地终止消化。细胞没下来就使劲吹灯,吹得满瓶子都是气泡。在我看来,用力吹打对细胞的损伤比消化更大。我师兄在做血管平滑肌原代的时候,37度消化过夜,细胞也没事。我一般是等细胞完全变圆后才中止消化。细胞轻轻一晃就能下来。还有,动作要轻柔,尽量不要产生气泡。气泡在破裂时的机械应力相当大,对细胞的伤害也是很大的。
QG-56细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
麦康凯琼脂基础,英文名:MacConkey Agar Base,用途:不含碳水化合物,用于大肠杆菌的发酵研究
AHM鉴别培养基,英文名:Aeromonas hydrophila Medium,用途:用于致病性嗜水气单胞菌的鉴别
碎肉碳水化合物肉汤基础,英文名:Chopped Meat Carbohydrate Broth(CMC),用途:用于厌氧菌特别是专性厌氧菌的培养,含VK ,需添加庖肉牛肉粒
细胞形态特性:详见细胞说明书
阿须贝氏无氮培养基,英文名:Ashby’s Nitrogen-Free Agar,用途:用于固氮菌的培养
大鼠脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒,英文名:ENK ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠Smad同源物1(Smad1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse Smad1 ELISA Kit,规格:48T/96T
精酸双水解酶试验培养基/精酸脱羧酶肉汤,英文名:Double-arginine Hydrolase Test Medium,用途:用于细菌的精酸双水解酶试验
李氏增菌肉汤(LB1,LB2)基础,英文名:Listeria Enrichment Broth Base,用途:用于李斯特氏菌增菌,每225ml添加啶酮酸溶液1支组成LB1,每200ml添加啶酮酸溶液1支组成LB2 ,备用。
RWPE-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代。
AAV-293细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
Capan-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2-1:4传代,2-3天换液1次。
大鼠IPO-38蛋白(IPO-38)ELISA试剂盒,英文名:IPO-38 ELISA Kit,规格:48T/96T
Dey/Engley中和琼脂基础,英文名:Dey/Engley Neutralizing Agar Base,用途:用于样品的制备和细菌培养,每200ml添加1支吐温80
马铃薯琼脂,英文名:Potato Agar,用途:不含葡萄糖,用于霉菌的分离培养
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
MH肉汤Ⅱ(阳离子调节)/CAMHB,英文名:Mueller Hinton Ⅱ Broth(Cation-Adjusted)/CAMHB,用途:即CAMHB,用于细菌的敏感性试验
细胞背景资料:神经元瘤
NCTC clone 929(L929)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)ELISA试剂盒,英文名:Human STEAP2 ELISA Kit,规格:48T/96T
SHI-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-N87[N87]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NH-6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2传代;每周换液2-3次
人磷脂爬行酶4(PLSCR4)ELISA试剂盒,英文名:Human PLSCR4 ELISA Kit,规格:48T/96T
人2',5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)ELISA试剂盒,英文名:Human OAS2 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人淋巴毒素β(LTβ)ELISA试剂盒,英文名:Human LTβ ELISA Kit,规格:48T/96T
人低分子肝素(LMWH)ELISA试剂盒,英文名:Human LMWH ELISA Kit,规格:48T/96T
OGY琼脂基础,英文名:Oxytetracycline Glucose Yeast Agar,用途:用于霉菌、酵母菌计数,葡萄糖10g/L,每100ml添加1支土霉素溶液
EC肉汤,英文名:EC Broth,用途:用于大肠杆菌和粪大肠菌群的测定
细胞培养实验中常见问题总结:1)一般客户拿到细胞后,应该注意什么?客户收到细胞后先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况,请在显微镜下观察细胞密度,如为贴壁细胞,未超过80%汇合度时,将培养瓶中培养液吸出,留下10ml培养液继续培养;超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞,吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快递细胞多久能到,是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞?我们采用快递发货,一般外地2--3天,寄细胞前请确认当地温度,如果气温低于4度的,则采用邮寄冻存细胞;3)可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基,若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基,细胞大都无法立即适应,造成细胞无法存活;4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类?不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清,在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
HCT-8 [HRT-18]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW480[SW-480]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
C3H/10T1/2,Clone8细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SK-GT-4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HSF细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞传代方法:1:2传代
HLEB3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
TGE琼脂,英文名:Tryptone Glucose Extract Agar,用途:用于菌落总数测定
YPGA培养基,英文名:Yeast extract Peptone Glucose Medium,用途:用于甘蔗流胶病菌检验
细胞生长特性:贴壁
UM琼脂培养基,英文名:Uchimiya and Miurashige Medium,用途:用于诱导愈伤组织形成
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析:总结1:复苏过程没有问题,是否是从液氮拿出直接放入温水,还有培养箱,二氧化碳浓度,培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%,看看能否帮助贴壁,当然也需要考虑血清问题,还有确信拿来的细胞没问题。总结2:首先应该怀疑冻存,实际上复苏出问题的可能非常小,因为操作简单,而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长,这是一般人所注意不到的,即使书上也不讲这个问题,太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力,表现为先贴后死,原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序,不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好,是什么,甘油还是DMSO,质量非常重要,否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多,ATCC推荐是不超过7%,大于5%,太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀,这个有一些影响,但不算太大。5、你的冻存是否按部就班,就是所温度梯度是不是把握严格,很多人容易忘却这个事情,因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染,你是否能很快看到,我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有,不赞成孵箱污染这个概念的,所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话,这个细菌是源于孵箱的,但这不代表孵箱污染,因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌,问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找,以后就不犯同样的问题,这个很重要,不能靠猜,否则你就有可能细胞养绝换课题,这个见得太多了,别不当会事。
抗生素培养基A(PH8.0),英文名:Medium A(PH8.0),用途:用于抗生素检测
麦康凯(MAC)肉汤(CT-MAC肉汤基础),英文名:MacConkey Broth(CT-MAC Broth Base),用途:含结晶紫、中性红,用于O157菌选择性增菌,每100ml添加亚碲酸钾溶液和头孢克肟溶液各1支
曲霉素琼脂(AFPA)基础,英文名:AFPA Agar Base,用途:用于曲霉菌和寄生曲霉的分离培养,每100ml添加1支霉素溶液
桔汁琼脂(OSA),英文名:Orange Serum Agar,用途:用于耐酸细菌的分离培养
克氏双糖铁琼脂(KI),英文名:Kligler Iron Agar,用途:用于细菌的复合生化试验
MT2细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。