NG108-15 [108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞系 专注复苏经验十年

NG108-15 [108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞系 专注复苏经验十年
T3T-L1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A2780细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
MDA-MB-468细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2-1：4传代；2-3天换液1次
RTE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：多角；细胞传代方法：1：3传代，3-4天换液一次
Vero E6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PLET琼脂基础，英文名：PLET Agar Base，用途：用于炭疽杆菌的分离和培养,需加入多粘菌素B、溶菌酶
MS培养基，英文名：Murashige & Skoog Medium，用途：含琼脂，广泛用于植物器官、花药、细胞和原生质体的培养
杜氏缓冲液，英文名：Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline(D-PBS)，用途：用于细胞的洗涤、保存和培养,也用于微生物的培养
双抗巧克力琼脂基础，英文名：Bi-Anti Chocolate Agar Base，用途：用于嗜血杆菌和奈瑟菌的培养,每100ml添加1支双抗巧克力琼脂添加剂和5%无菌脱纤维绵羊全血
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
CMT-64细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
EVSA-T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BGC-803细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H23细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代；3-4天1次。
U266[U266B1]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCCIT细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：4—1：8传代，每周换液2—3次
OKa-C-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
IMR-32细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：存在两种细胞类型，小的神经母细胞样细胞和大的透明成纤维样细胞；细胞传代方法：1：2传代
H-EMC-SS细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：4-1：8传代；每周换液3次。
LS513细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3—1：4传代，每周换液2次
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
GC肉汤基础，英文名：GC Broth Base，用途：用于致病性奈瑟氏菌的分离培养,每100ml添加IsoVitaleX添加剂、V-C-NYJ剂（VCN）、无菌血红蛋白各1支
尿素吲哚培养基，英文名：Urea Indole Medium，用途：用于细菌生化鉴定
2216E液体培养基，英文名：Zobell Marine Broth 2216，用途：用于海生细菌的培养
MDCK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
LN-229细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：4-1：6传代；每周换液2-3次
IEC-6[IEC6]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SK-NEP-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1092细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ML-2细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
麦康凯琼脂培养基，英文名：MacConkey Agar Medium，用途：ZG药典2015，用于大肠埃希氏菌选择性分离
结晶紫中性红胆盐-4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷琼脂，英文名：VRBA-MUG，用途：用于大肠杆菌平板计数
细胞形态特性：成纤维细胞样　
固氮(茎瘤)根瘤菌培养基基础，英文名：Azorhizobium Medium Base，用途：用于（茎瘤）根瘤菌培养,每100ml添加1支50%乳酸钠溶液
NZYM肉汤，英文名：NZYM Broth，用途：用于大肠杆菌菌株培养,配方被推荐用于重组l噬菌体的复制
抗生素培养基32号，英文名：Medium 32，用途：用于微生物方法测定抗生素效价
MD琼脂培养基，英文名：Minimal Dextrase Agar Medium，用途：用于酵母菌的筛选
MUG营养琼脂培养基(NA-MUG)，英文名：NA-MUG Agar，用途：用于大肠埃希氏菌滤膜法计数
小鼠血小板型果糖激酶(PFKP)ELISA试剂盒，英文名：Mouse PFKP ELISA Kit，规格：48T/96T
人巨肌酸激酶(MCK)ELISA试剂盒，英文名：Human MCK ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞背景资料：详见相关文献介绍
SRBR3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HMC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
WiDr细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Pt K2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
营养盐琼脂培养基，英文名：Nutrient Salt Agar Medium，用途：用于KJ性能试验,每升培养基中添加0.5g吐温-80
酸性番茄培养基(ATB培养基)，英文名：Acid Tomato Juice Medium，用途：用于酒球菌的分离，每100ml添加1支L-半胱酸溶液
幽门螺杆菌琼脂培养基基础，英文名：Helicobacter pylori Agar Medium Base，用途：用于幽门螺杆菌的分离培养,每100ml添加1支幽门螺杆菌选择性添加剂和7ml无菌裂解马血
MYGP培养基基础，英文名：MYPG Medium Base，用途：用于酵母菌的培养,每升培养基需添加10ml吐温-80
传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。传代细胞培养操作步骤：1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化，2-5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；4)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；5)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；6)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO2培养箱中进行培养；7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2-3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。
细胞传代方法：1：6-1：10传代，每周换液2-3次
缓冲李斯特氏菌增菌肉汤基础(BLEB基础)，英文名：Buffered Listeria Enrichment Broth Base，用途：用于李氏菌的选择性增菌,每225ml添加2支啶酮酸溶液
蜡状芽孢杆菌琼脂基础，英文名：Bacillus Cereus Selective Agar Base，用途：用于蜡样芽孢杆菌的选择性分离，每100ml添加1支多粘菌素B溶液
人血管粘附蛋白1(VAP-1)ELISA试剂盒，英文名：Human VAP-1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人细菌性阴道病(BV)ELISA试剂盒，英文名：Human BV ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠Smad同源物1(Smad1)ELISA试剂盒，英文名：Smad1 ELISA Kit，规格：48T/96T
正确的细胞复苏需知事项：细胞冻存好了，接下来要注意什么问题呢？没错，就是记得到时间了，拿出来复苏。那么，细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢？细胞活力和形态检查的作用何在？活力检查——千万不要使用不健康的细胞，可能有污染(真菌、支原体等)，如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞：补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞，计数活细胞数，用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整)；冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞，有不同类型的冻存液，根据细胞类型选择Z合适的冻存液(常用的冻存液成分有)：5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质；5-15%甘油；如果细胞在无血清培养基内生长，应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型，日期，冻存人等信息，并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Z快的速度转移冻存管知液氮罐内，因此，此步骤Z好使用干冰，或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意，在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息，做好记录是非常非常重要的！还有一个Z重要的，一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞，以免其中的一个液氮罐出现问题！细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要，熟记以下要点：当从液氮罐内取出细胞时，有可能会出现冻存管破裂的情况，使用保护面罩和防护服十分必要；其实，细胞复苏只是一个简单的实验，不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节，不然，也不一定会尽如人意。例如说，人身健康方面：一定要记得做好防冻工作，戴上护目镜；尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
细胞生长特性：贴壁生长
小鼠γ谷酰转移酶1(gGT1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse gGT1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人Runt相关转录因子2(RUNX2)ELISA试剂盒，英文名：Human RUNX2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人IV型胶原(CIV)ELISA试剂盒，英文名：Human CIV ELISA Kit，规格：48T/96T
人神经源素3(NEUROG3)ELISA试剂盒，英文名：Human NEUROG3 ELISA Kit，规格：48T/96T
常见细胞培养中一些问题总结：1)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%，不要低于5%或高过20%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%，可以适量加减；2)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；3)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；4)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久；6)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
MDCK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
MDA-MB-134-VI细胞专业复苏；细胞生长特性：松散贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2—1：4传代，每周换液2—3次
SW579细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
COLO-206F细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HBE135-E6E7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠胃泌素细胞抗体(GCA)ELISA试剂盒，英文名：GCA ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠蛋白二键异构酶(PDI)ELISA试剂盒，英文名：Mouse PDI ELISA Kit，规格：48T/96T