RCC10RGB人肾细胞癌细胞系 专业复苏 传代稳定
牛津琼脂(OXA)基础,英文名:Oxford Agar Base,用途:用于李氏菌分离,每100ml添加多粘菌素E1支
Hayflick培养基,英文名:Hayflick Medium,用途:需添加马血清、青霉素
抗生素培养基F(PH6.1),英文名:Medium F(PH6.1),用途:用于抗生素鉴定
叠氮钠血琼脂基础,英文名:Azide Blood Agar Base,用途:用于链球菌和葡萄球菌分离和溶血试验,需添加5%绵羊血
胰酪蛋白胨葡萄糖酵母浸粉牛肉浸粉培养基(TPGYB),英文名:Trypticase peptone Glucose Yeast Extract Beef,用途:用于肉毒梭菌增菌培养
细胞形态特性:详见细胞说明书
正确的细胞复苏需知事项:细胞冻存好了,接下来要注意什么问题呢?没错,就是记得到时间了,拿出来复苏。那么,细胞复苏的过程中又有哪些该注意的事项呢?细胞活力和形态检查的作用何在?活力检查——千万不要使用不健康的细胞,可能有污染(真菌、支原体等),如果发现有污染毫不犹豫的丢弃!形态检查——检查细胞的固有形态和生长行为。冻存细胞:补充新的培养液——在您开始冻存细胞的前一天补充新的培养液。在细胞长至70%单层时收获细胞,计数活细胞数,用冻存液调整细胞密度~5 x106 Cell s/ml (根据不同的细胞类型调整);冻存液——用冻存液洗细胞并用冻存液重悬细胞,有不同类型的冻存液,根据细胞类型选择Z合适的冻存液(常用的冻存液成分有):5-10% DMSO——注意确保DMSO不含有其他的毒性物质;5-15%甘油;如果细胞在无血清培养基内生长,应在50%条件培养基内(细胞在无血清培养基内生长24小时)内冻存和复苏。在冻存管上标记好细胞类型,日期,冻存人等信息,并保证每冻存管不超过1.5ml。放入液氮罐之前记录冻存管的数量和位置。以Z快的速度转移冻存管知液氮罐内,因此,此步骤Z好使用干冰,或者把冻存管浸入装有液氮的小盒内。此外还要注意,在冻存管上没有足够的空间记录细胞的详细信息,做好记录是非常非常重要的!还有一个Z重要的,一定要在异地的液氮罐内保存同样的一份细胞,以免其中的一个液氮罐出现问题!细胞正确的复苏方式和正确的冻存方式同样重要,熟记以下要点:当从液氮罐内取出细胞时,有可能会出现冻存管破裂的情况,使用保护面罩和防护服十分必要;其实,细胞复苏只是一个简单的实验,不过这其中却不可避免有一些需要注意的细节,不然,也不一定会尽如人意。例如说,人身健康方面:一定要记得做好防冻工作,戴上护目镜;尽量降低DMSO对细胞的损伤等等。
CCFA琼脂基础,英文名:Cycloserine Cefoxitin Fructose Agar Base,用途:用于艰难梭菌的选择性分离.每200ml添加1支D-环丝酸溶液、2支50%卵黄盐水悬液、1支头孢西丁溶液
艾默生YpSs琼脂/酵母-淀粉琼脂,英文名:Emerson YpSs Agar/ Yeast protein Soluble starch Ag,用途:用于异水霉属及其他霉菌的培养
143TK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
L-929细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:8传代
TG-905细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
bEnd.3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW1271细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
VMR106细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MSC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞背景资料:详见相关文献介绍
HUVSMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
AR42J细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
MCF-7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代,3-4天长满
SNU475细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CCD-18Co细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NHDF细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2传代
MDA-MB-361细胞专业复苏;细胞生长特性:松散贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法: 1:2—1:6传代,每周换液2—3次
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制好的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋好冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做好标记;6)冻存:在特殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
小鼠丙肝抗体IgA(HCV IgA)ELISA试剂盒,英文名:Mouse HCV IgA ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人胱天蛋白酶12(CASP12)ELISA试剂盒,英文名:Human CASP12 ELISA Kit,规格:48T/96T
人肌酸激酶同工酶MB(CKMB)ELISA试剂盒,英文名:Human CKMB ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠增殖诱导配体(APRIL/CD256)ELISA试剂盒,英文名:APRIL/CD256 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠溶性糖蛋白130(sgp130)ELISA试剂盒,英文名:sgp130 ELISA Kit,规格:48T/96T
EAG3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HUAEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MDA-kb2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Ava-82细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍:1)CO2培养箱:CO2培养箱是细胞培养的必备仪器,它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境,如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染,因此,CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要;2)烘箱(干燥箱):用于细胞培养的一些器械、器皿必须烘干后才能使用,玻璃器皿等须干热消毒。干热消毒时,烘箱内温度一般要达到160℃以上,通常使用鼓风式烘箱。其优点是温度均匀、效果较好,缺点是升温过程较慢。升温时不能先升温后鼓风而应鼓风与升温同时开始,至100℃时,停止鼓风。需注意避免包裹器皿的纸或棉花烧焦,烧焦的碎屑可影响细胞的生长。消毒后不能立即打开箱门,以免骤冷导致玻璃器皿破裂,应等温度自然下降至100℃以下后可开门。3)超净工作台/生物安全柜:细胞培养对无菌环境要求很高,在细胞操作时,一般需要在100级空气质量条件下进行,因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。4)液氮罐:为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃,因此,需要液氮罐。在此环境中,一般细胞可以保存十年具有活性。5)超低温冰箱:细胞的冻存过程需要一系列程序降温,一般4℃下存放30min,转放-20℃ 1 hour,再转入-70至-80℃过夜,之后才可以转移到液氮内(-196℃),这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月,对于不需要长期冻存的细胞,可暂时放于超低温冰箱保存。6)恒温水浴:从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养,因此,恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。7离心机:细胞培养需要离心收集传代细胞,所以需要配置低速的常温离心机,对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。除上述仪器外,移液器、高压灭菌锅、倒置显微镜、荧光显微镜也是细胞培养的必备仪器,发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
选择性牛心汤增菌培养基,英文名:Selective Cattle Heart Enrichment Broth,用途:用于链球菌选择性增菌
GN增菌液(革兰氏阴性细菌增菌肉汤),英文名:Gram Negative Enrichment Broth,用途:用于革兰氏阴性细菌尤其是志贺氏菌的增菌
含0.05%聚山梨酯80的 pH7.0化钠-蛋白胨缓冲液,英文名:Buffered Sodium Chloride-peptone pH 7.0 w Tween 80,用途:用于样品制备
选择性APS肉汤基础/选择性APS LB肉汤基础,英文名:Select APS LB Broth Base,用途:非动物源配方,用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养
念珠菌显色培养基,英文名:Candida Chromogenic Medium,用途:用于念珠菌快速检测
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
糖发酵培养基基础,英文名:Sugar Fermentation Medium Base,用途:麝香草蓝为指示剂,需加糖,用于糖发酵试验
pH7.2盐缓冲液,英文名:pH7.2 PBS Broth,用途:用于样品的稀释
7.5%化钠肉汤,英文名:7.5%Sodium Chloride Broth,用途:——用于微生态活菌制品中金黄色葡萄球菌的检测
抗生素培养基C(PH7.0),英文名:Medium C(PH7.0),用途:用于抗生素检测
Korser氏柠檬酸盐肉汤,英文名:Korser’s Citrate Broth,用途:用于柠檬酸盐利用实验
细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分
改良Camp-BAP琼脂基础,英文名:Camp-BAP Agar,Modified,用途:用于弯曲杆菌选择性分离,每100ml添加改良Camp-BAP琼脂基础添加剂A、改良Camp-BAP琼脂基础添加剂B各1支
3%NaCl甘露醇发酵培养基,英文名:Mannitol Fermentation Medium with 3%Nacl,用途:用于弧菌的甘露醇发酵试验
TPY琼脂培养基,英文名:TPY Agar Medium,用途:用于双歧杆菌的分离培养
OE33细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
HL7702[L02]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SNU182细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SP2/o细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SNU-C2A细胞专业复苏;细胞生长特性:松散附着、多单元的聚合;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:每周两次换液
SK-RC-52细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
BT-20细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2—1:4传代,2—3天换液一次
EA.hy926细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW 626[SW-626,SW626]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
OVCAR5细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
mpc-5细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
RL-952细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠极低密度脂蛋白受体(VLDLR)ELISA试剂盒,英文名:VLDLR ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠Ⅲ型前胶原C端肽(PⅢCP)ELISA试剂盒,英文名:Mouse PⅢCP ELISA Kit,规格:48T/96T
人血小板反应蛋白3(THBS3)ELISA试剂盒,英文名:Human THBS3 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠神经黏蛋白(CDHN)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CDHN ELISA Kit,规格:48T/96T