Kasumi-6急性髓系细胞白血病细胞系 专业复苏 传代稳定

Kasumi-6急性髓系细胞白血病细胞系 专业复苏 传代稳定
UMO培养基，英文名：UM Medium without 2,4-D and KT，用途：用于诱导体胚分化
V-P半固体琼脂(VP)，英文名：Voges-Proskauer Semisolid Agar，用途：用于细菌V-P试验
哥伦比亚CNA琼脂/哥伦比亚CNA血琼脂基础，英文名：Columbia CNA Agar，用途：用于G+球菌的选择性分离,添加羊血制备哥伦比亚CNA血琼脂
改良巴尔斯氏培养基基础(含2.5%NaCl)，英文名：Baar,s Medium for Sulfate Reducers, Modified with，用途：用于脱肠球菌等盐还原细菌的培养，每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
D2a培养基，英文名：D2a Medium，用途：用于原生质体的培养，需添加5%椰子乳
细胞形态特性：成髓细胞
细胞复苏后贴壁细胞较少的问题分析：总结1：复苏过程没有问题，是否是从液氮拿出直接放入温水，还有培养箱，二氧化碳浓度，培养基、PH值等环节。要么加高浓度FBS 15-20%，看看能否帮助贴壁，当然也需要考虑血清问题，还有确信拿来的细胞没问题。总结2：首先应该怀疑冻存，实际上复苏出问题的可能非常小，因为操作简单，而且死板。1、你冻存的时候是不是消化的时间过长，这是一般人所注意不到的，即使书上也不讲这个问题，太长的消化时间会让细胞复苏时失去贴壁能力，表现为先贴后死，原因是在你复苏的时候细胞已进入凋亡程序，不可逆转的死亡。2、你的冻存液好不好，是什么，甘油还是DMSO，质量非常重要，否则也会死亡。3、你的冻存液的量加的是不是太多，ATCC推荐是不超过7%，大于5%，太多也不好。4、你在冻存的时候是不是把DMSO混均匀，这个有一些影响，但不算太大。5、你的冻存是否按部就班，就是所温度梯度是不是把握严格，很多人容易忘却这个事情，因为这个东西流程长。6、如果你细胞污染，你是否能很快看到，我比我的导师能早一天看到污染。从这个角度讲建议去除离心这步。7、你的细胞在冻存前是否过密。还有，不赞成孵箱污染这个概念的，所有在一个孵箱里的细胞都污染一个细菌的话，这个细菌是源于孵箱的，但这不代表孵箱污染，因为孵箱无论你如何处理都有大量的细菌，问题在操作。每次污染的原因都要尽可能的找，以后就不犯同样的问题，这个很重要，不能靠猜，否则你就有可能细胞养绝换课题，这个见得太多了，别不当会事。
细菌L型分离琼脂，英文名：L-Bacterial Isolation Agar，用途：用于样本中L型细菌的分离培养
BDS培养基，英文名：Bacteroid Selective Agar，用途：用于拟杆菌的选择性分离
WPMY-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成肌细胞；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
QBC939细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Raw246.7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCE-T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2030[H2030]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HLF-a细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CF-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞背景资料：详见相关文献介绍
GTL16细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A-375细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RBMVEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1048[H1048]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
End1/E6E7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A-431[A431]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW48细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：3传代,2-3天传一代
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射30分钟灭菌，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以70%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在ZY无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:4℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指56℃，30分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到56℃后，将血清放入，待温度升高到56℃后计时，一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
大鼠着丝粒蛋白1(CENP1)ELISA试剂盒，英文名：CENP1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：每周2-3次。
人原肌球蛋白2β(TPM2)ELISA试剂盒，英文名：Human TPM2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人黑素曲菌素(MREG)ELISA试剂盒，英文名：Human MREG ELISA Kit，规格：48T/96T
人尿皮质素2(UCN2)ELISA试剂盒，英文名：Human UCN2 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒，英文名：MMP-4 ELISA Kit，规格：48T/96T
NCI-H217细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：4传代，每周2-3次。
SGC-996细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H522 [H522]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW900细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞培养温度：维持培养细胞旺盛生长，必须有恒定而适宜的温度。不同种类的细胞对培养温度要求也不同。人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃，偏离这一温度范围，细胞的正常代谢会受到影响，甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强，温度上升不超过39℃时，细胞代谢与温度成正比；人体细胞在39-40℃1小时，即能受到一定损伤，但仍有可能恢复；在40-41℃1小时，细胞会普遍受到损伤，仅小半数有可能恢复；41-42℃1小时，细胞受到严重损伤，大部分细胞死亡，个别细胞仍有恢复可能；当温度在43℃以上1小时，细胞全部死亡。相反，温度不低于0℃时，对细胞代谢虽有影响，但并无伤害作用；把细胞放入25－35℃时，细胞仍能生存和生长，但速度减慢；放在4℃数小时后，再回到37℃培养，细胞仍能继续生长。细胞代谢随温度降低而减慢。当温度降至冰点以下时，细胞可因胞质结冰受损而死亡。但是，如果向培养液中加入一定量的冷冻保护剂(二甲亚砜或甘油)，可在深低温下如－80℃或－196℃(液氮)长期保存。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
曙红亚甲蓝琼脂培养基(EMB)，英文名：Eosin-Methylene Blue Lactose Agar，用途：用于大肠菌群测定
SSDC培养基/沙门氏菌-志贺氏菌琼脂(含脱氧胆盐化钠)，英文名：SSDC Medium，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的选择性分离
MKTTn肉汤基础，英文名：Muller Kauffmann Tetrathionate Novobiocin Broth Ba，用途：用于沙门氏菌增菌,每100ml中添加1支碘溶液和2支新生霉素储备液
月桂基盐胰蛋白胨肉汤-MUG (LST-MUG)，英文名：Lauryl Sulfate Tryptose Broth-MUG，用途：用于大肠杆菌荧光检测
麦芽糖酵母浸粉琼脂，英文名：Maltose yeast extract agar (Okazaki and Okami, 197，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
山梨醇麦康凯半固体培养基，英文名：Sorbitol MacConkey Semi-solid Medium，用途：用于大肠埃希氏菌O157菌种保存
水合乳糖肉汤，英文名：Lactose Monohydrate Broth，用途：用于大肠菌群测定
盐蛋白胨水培养基，英文名：Nitrate peptone water Medium，用途：用于细菌的盐分解试验
抗生素培养基4号，英文名：Medium 4（Yeast Beef Agar），用途：用于微生物方法测定抗生素效价
沙氏葡萄糖液体培养基，英文名：Sabouraud’s Glucose Broth Medium，用途：用于真菌培养
细胞生长特性：悬浮生长
麸皮液体培养基，英文名：Wheat Bran Medium，用途：用于细菌、真菌的培养
GC琼脂基础，英文名：GC Agar Base，用途：用于致病性奈瑟氏菌的分离
BBM琼脂培养基，英文名：Bold’s Basal Medium with Agar，用途：用于藻类尤其是绿藻的培养与保存
Cattle chondrocytes细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NRK-52E细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
M1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RH-30细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HEEpiC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ECA细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
GT38细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
QGY-7701细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满
FU-MMT-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CNE1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A875细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：多角形；细胞传代方法：1：3传代；3-4天1次。
CV-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人噬酸性细胞趋化因子(Eotaxin)ELISA试剂盒，英文名：Human Eotaxin ELISA Kit，规格：48T/96T
人黏蛋白10(CDH10)ELISA试剂盒，英文名：Human CDH10 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠甘露聚糖结合凝集素关联丝酸蛋白酶1(MASP1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse MASP1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠Toll样受体2(TLR2)ELISA试剂盒，英文名：TLR2 ELISA Kit，规格：48T/96T