NG108-15 [108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞系 传代很慢要怎么操作

NG108-15 [108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞系 传代很慢要怎么操作
NCI-H1299细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；多角形；细胞传代方法：1：2传代；3天传代一次。
改良克氏柠檬酸盐琼脂，英文名：Christensen Citrate Agar , Modified，用途：——用于柠檬酸盐利用实验
明胶盐缓冲液，英文名：Gelatin PBS Broth，用途：用于肉毒梭菌和肉毒毒素检样的制备
Bolton肉汤基础，英文名：Bolton Broth Base，用途：用于弯曲菌选择性增菌,每100ml添加1支Bolton肉汤基础添加剂和5ml Bolton肉汤基础添加剂
细胞复苏相关注意事项：1.取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。2.冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜(DMSO )对细胞不是完全，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作较大，因此，必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜(DMSO)Z好选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。4.离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜(DMSO)，DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无异常。5.细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml-15ml培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。6.复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。7.加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是1%。所以如果你的冻存液的浓度是10%DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。
细胞背景资料：详见相关文献介绍
高盐察氏培养基，英文名：Salt Czapek Dox Medium，用途：用于霉菌总数的测定
史娃兹鉴别培养基(SDM)，英文名：Schwartz Differential Medium，用途：用于啤酒野生酵母的检验
酪胨-大豆卵磷脂-吐温20液体培养基基础，英文名：Fluid Casein Digest-Soy Lecithin-Polysorbate 20 Me，用途：用于药品稀释,每升培养基需添加40ml吐温20
固氮螺菌液体培养基，英文名：Azospirillum Broth Medium，用途：用于固氮螺菌的培养
Hs 839.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2传代，2-3天换液1次。
3AO细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
UM-RC-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒，英文名：Human MCP-4/CCL13 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠天冬酸基转移酶(AST)ELISA试剂盒，英文名：AST ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠蛋白激酶Cθ(PKCθ)ELISA试剂盒，英文名：PKCθ ELISA Kit，规格：48T/96T
人肌球蛋白ⅠE(MYO1E)ELISA试剂盒，英文名：Human MYO1E ELISA Kit，规格：48T/96T
3%NaCl赖酸脱羧酶试验培养基，英文名：Lysine-decarboxylase Test Medium with 3%NaCl，用途：用于弧菌的赖基酸脱羧酶试验
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
铜培养基，英文名：Bluestone Medium，用途：用于啤酒野生酵母的检验
培养细胞真的不难，Z关键几点：1)所有的东西使用Z好的，如果你用的血清、培养皿、培养基、胰酶什么的都是进口的，真的很难相信你会把细胞养坏；2)动作要快，胰酶消化，换液什么，细胞暴露在空气中的时间越少越好。另外，要掌握好胰酶消化时间，所谓的细胞状态差，很多时候是传代的原因；3)有时间的话，需要细胞计数，传相应数目的细胞到培养皿中，可以大致清楚细胞的生长曲线，不会临时要处理，手足无措；4)要做什么心里要非常清楚，合理安排时间，传代细胞的实验穿插进行，可以节省很多时间，也不会耽误别人的实验；5)个人的实验器具自己收一套，不要和别人混用，Z近换了什么新的东西稍微记一下，试剂一旦怀疑污染，马上丢；6)传代细胞不能进去太多人，避免相互干扰。每天对待细胞比孝敬爹妈还用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丢了，培养细胞时有哪些经验教训可以分享呢?1)严格无菌操作，多喷喷酒精，要是对灭菌的东西不放心，自己包自己送自己烘干；2)不要和别人共用试剂耗材，自己准备一套；3)有可能的话在拿到新细胞的时候做好支原体衣原体检测；4)水浴锅很脏，生化培养箱要是得手动加湿的话盘里的水也会很脏，勤换(灭菌水加进去)；5)晚上离开的时候Z好给传代细胞照紫外，超净台是用完就开；6)Z好的是同一时间就你一个人在用传代细胞在养细胞。
184A1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CL-40细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW 1088[SW-1088]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
UWB1.289细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
WPMY-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成肌细胞；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
NCI-H1915[H1915]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞培养相关培养基选购基本指南：如何选择培养基：经常听到有人问，这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单，也可以好复杂。为什么这样说呢?如果这种细胞是购自一些细胞库，那很简单，问供应商就行了。或者找到相关的文献，作为参考。培养基这么多种，要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的，或者是专门针对某一种细胞的，如昆虫基本培养基和神经祖细胞基础培养基， 但是大部分液体培养基都是专利配方的，也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐，然后用自己的细胞做几次传代培养来选出Z合适的培养基。毕竟实践出真知。怎么样才可以买到好的培养基产品：首先，当然需要找对品Pai，其次是找对自己所在区域的品Pai代理商，针对自己所养的细胞，咨询供应商该选用哪种的培养基进行培养，这样就可以买到好的而且适合自己的培养基产品。关于培养基品Pai，目前公司所知道的高校实验室有些同学在用Corning系列培养产品，也有同学在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品Pai的产品。培养基的选择和使用；MEM：成分简单，贴壁细胞；DMEM：分高糖型和低糖型；IDMEM：适合细胞密度低，生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选，DNA转染后转化细胞的筛选培养；RPM1640：应用Z广泛的培养基之一。悬浮细胞培养，主要针对淋巴细胞，也适合其他细胞；199、109培养基：成分齐全，培养效果较好；F10培养基：适合小鼠及人类二倍体细胞培养；F12培养基：适合单细胞分离培养及无血清培养；McCoy’s培养基：特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。
细胞传代方法：1：6-1：10传代，每周换液2-3次
HSAS2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SCC-9细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
COLO 201细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮+贴壁；细胞形态特性：淋巴细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SPCA-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
阿须贝氏甘露醇培养基，英文名：Ashby’S Mannitol Medium，用途：用于固氮菌的培养
碱性蛋白胨水，英文名：Alkaline Peptone Water，用途：用于致病性嗜水气单胞菌的培养
念珠菌显色培养基，英文名：Candida Chromogenic Medium，用途：用于念珠菌快速检测
细菌保存培养基(半固体)，英文名：Bacteria Save Medium,Semisolid，用途：用于菌种培养与保存
AK琼脂2号，英文名：AK Agar #2（Sporulating），用途：用于检测牛奶和乳制品中抗生素残留时孢子液制备
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
Rca-B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CL1-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KYSE450细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
葡萄糖蛋白胨琼脂，英文名：Dextrose Peptone Agar，用途：用于真菌的检测,选择性添加霉素霉素溶液
WL营养琼脂(WLN琼脂)/WL鉴别培养基基础(WLD培养基基础)，英文名：Wallerstein Laboratory Nutrient Agar，用途：制成WL鉴别培养基
去氧胆酸盐柠檬酸盐琼脂，英文名：Deoxycholate Citrate Agar，用途：用于沙门氏菌选择性分离
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
改良Letheen琼脂基础，英文名：Letheen Agar Base, Modified，用途：用于卫生微生物检测,需添加7g/L吐温80
小鼠淀粉样蛋白β1-40(Aβ1-40)ELISA试剂盒，英文名：Mouse Aβ1-40 ELISA Kit，规格：48T/96T
人前胶原C端蛋白酶增强子1(PCPE1)ELISA试剂盒，英文名：Human PCPE1 ELISA Kit，规格：48T/96T
化钠三糖铁琼脂，英文名：NaCl TSI Agar，用途：含1.5%NaCl,用于弧菌生化试验
细胞生长特性：贴壁生长
细胞形态特性：成纤维细胞样　
胰蛋白胨大豆琼脂/胰化大豆蛋白琼脂(TSA)，英文名：Tryptic Soy Agar，用途：用于细菌的计数和培养
FC33细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CRFK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RBL-2H3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
人L1-细胞粘附分子(L1CAM)ELISA试剂盒，英文名：Human L1CAM ELISA Kit，规格：48T/96T
人细胞分裂周期蛋白23(CDC23)ELISA试剂盒，英文名：Human CDC23 ELISA Kit，规格：48T/96T