HCC202人乳腺原发性导管癌细胞系 复苏时间短 更专注

HCC202人乳腺原发性导管癌细胞系 复苏时间短 更专注
Pan02细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
沙门、志贺氏菌增菌培养基，英文名：Salmonella Shigiella Enrichment Broth，用途：用于沙门氏菌、志贺氏菌的选择性增菌
GC琼脂基础，英文名：GC Agar Base，用途：用于致病性奈瑟氏菌的分离
ST2/o细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
B10BR细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁生长
GRSL细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SCC-15细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：4-1：8传代，2-3天换液1次。
HBL-100细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
改良布氏肉汤培养基，英文名：Brucella Broth,Modified，用途：用于空肠弯曲杆菌的增菌培养
淋病奈瑟菌琼脂培养基基础，英文名：N.gonorrhoeae Agar Medium Base，用途：用于淋病奈瑟菌的分离与培养,需添加7%无菌脱纤维绵羊全血
缓冲蛋白胨水(BPW)，英文名：Buffered Peptone Water，用途：用于沙门氏菌、阪崎杆菌的增菌(日本标准）
8910PM细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
BJ细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：1：2传代
细胞培养实验基本操作：①进无菌室前要彻底洗手，按规定穿隔离衣。开始操作前要用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。②操作者动作要轻，安装吸管帽、打开或封闭瓶口等操作应在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意，金属器械不能在火焰中长时间烧灼，以防退火；烧过的器械要冷却后才能使用；已吸过培养液的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管内的培养液成分如蛋白质等烧焦后会产生有害物质，吸管再用时会将其带到培养液中；胶塞、橡皮乳头及塑料的细胞培养用品过火焰是也不能时间太长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞，同时塑料细胞培养用品也会产生变形影响使用。③使用培养液前不宜过早开瓶，开瓶后的培养液应保持斜位，避免直立，以防止下落细菌的污染。不再使用的培养液应立即封闭瓶口，培养的细胞在处理之前勿过早暴露在空气中。④操作时尽量不要谈话，咳嗽以防止来自唾沫和呼出的气流所造成的污染。⑤吸取培养液、细胞悬液时，应专管专用，一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去，以防止污染扩大或造成培养物之间的交叉污染。⑥操作完毕后应整理好工作台面，用消毒水浸泡的纱布擦拭台面；防止细胞交叉污染：所有从别处转来的或是自己所建的细胞系都要早期留有的充足的冻存储备，一旦怀疑发生交叉污染，可做细胞遗传学方面的鉴定，如发现原有的细胞遗传物发生改变，可以复苏早期冻存的细胞使用。重要细胞系的传代工作应由两人独立进行；无菌室的彻底消毒①新洁尔灭全面彻底擦洗无菌室。使用前应稀释即配即用。新洁尔灭和酒精相比，的优点是便宜，而且可以稀释50倍用，而同样量的酒精价格可能是新洁尔灭的几十倍。②甲醛熏蒸法：甲醛是一种广谱灭菌剂菌，其水溶液和气体对各种细菌、芽孢及真菌等微生物均有杀灭作用。甲醛价廉，熏蒸消毒时不损坏衣服、家具、皮革、橡胶等。市售的甲醛水溶液中一般含37－40%的甲醛。
PC14细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PC-3M-1E8细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
小鼠结合珠蛋白(HP)ELISA试剂盒，英文名：Mouse HP ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠间隙连接蛋白26(CX26)ELISA试剂盒，英文名：CX26 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠YZ素B(INH-B)ELISA试剂盒，英文名：INH-B ELISA Kit，规格：48T/96T
明胶培养基，英文名：Gelatin Medium，用途：用于生化试验（兽药典用）
含0.05%聚山梨酯80的 pH7.0化钠-蛋白胨缓冲液，英文名：Buffered Sodium Chloride-peptone pH 7.0 w Tween 80，用途：用于样品制备
幽门螺杆菌液体培养基基础，英文名：Helicobacter pylori Broth Medium Base，用途：用于幽门螺杆菌的增菌培养,每100ml添加1支幽门螺杆菌选择性添加剂和7ml无菌裂解马血
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可，吸去胰酶后，残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞，连续这样传代，对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去，胰酶润洗吸去，然后37度消化；什么算是消化好了呢？不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了，一般你肉眼观察贴壁细胞层，只要能移动了，多半呈沙壮移动，其实已经可以了，很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞，这是没有必要的。一般能移动了，说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了，细胞之间的附着也已经消失了，细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化，不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好，间隙很大，才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液，之后在贴壁的过程中仍然会聚集，这个是贴壁培养的细胞，尤其是肿瘤细胞的一个特性，无论死活的细胞都是如此，你可以尝试，准备的单个细胞悬液，贴壁后观察细胞，仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此，容易聚集，不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑，这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误，以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来，这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞)，吹打不超过20次后(一般10次即可)，成小规模聚集(10个细胞左右)，是正常的，不要试图再去延长消化时间，或者像有的同学那样吹打1h，等待单细胞悬液出现。
改良亮绿琼脂培养基，英文名：Brilliant Green Agar Modified，用途：用于沙门氏菌选择性分离
人四旋蛋白3(TSPAN3)ELISA试剂盒，英文名：Human TSPAN3 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠生长分化因子2(GDF2)ELISA试剂盒，英文名：GDF2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人脉周蛋白1(PPHLN1)ELISA试剂盒，英文名：Human PPHLN1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒，英文名：PGE2 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠凋亡信号调节激酶I(ASK1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse ASK1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人Fission人1蛋白(FIS1)ELISA试剂盒，英文名：Human FIS1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人泛素连接酶E3A(UBE3A)ELISA试剂盒，英文名：Human UBE3A ELISA Kit，规格：48T/96T
人肝配蛋白B1(EFNB1)ELISA试剂盒，英文名：Human EFNB1 ELISA Kit，规格：48T/96T
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，Z近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
MDCC-MSB-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞背景资料：详见相关文献介绍
BC-022细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素琼脂(MIAC)基础，英文名：MIAC Agar Base，用途：用于克雷伯氏菌选择性分离,每100ml添加1支羧苄青霉素
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)，英文名：Violet-Red Bile Agar with Glucose and Lactose，用途：含乳糖、葡萄糖。用于阪崎肠杆菌的分离
NCI-H841细胞专业复苏；细胞生长特性：混合型生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：3—1：5传代，
改良马丁培养基，英文名：Martin Medium,Modified，用途：用于真菌培养、无菌检查
抗生素培养基3号，英文名：Medium 3（Penassay Broth），用途：用于微生物方法测定抗生素效价
阴沟肠杆菌分离琼脂(ECIA)，英文名：Enterobacter Cloacae Isolation Agar，用途：用于阴沟肠杆菌的分离
亮绿琼脂培养基，英文名：Brilliant Green-Agar Medium，用途：用于药品中沙门氏菌选择性分离
AML12细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
SK-MEL-24细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：星形的；细胞传代方法：1：2-1：4传代，2-3天换液1次。
DPD培养基，英文名：DPD Medium，用途：用于原生质体的培养
普通啤酒琼脂(UBA培养基)，英文名：Universal Beer Agar，用途：用于啤酒腐败菌、厌氧菌的检测
MDA-kb2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
FaDu细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
OCI-LY1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HEC-251细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
沙氏脑心浸液琼脂基础，英文名：Sabouraud Brain Heart Infusion Agar Base，用途：用于真菌的选择性分离,每100ml培养基中添加1支霉素溶液
细胞形态特性：上皮样
毛藓菌琼脂6号，英文名：Trichophyton Agar #6，用途：用于毛藓菌属的鉴定
Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂)，英文名：Pfizer Enterococcus Selective Agar，用途：用于粪链球菌选择性分离
OCI-LY19细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。