NG108-15 [108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞系 传代需要注意哪些点

NG108-15 [108CC15]小鼠神经细胞瘤与大鼠神经胶质瘤之融合细胞系 传代需要注意哪些点
MIN-6细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PC-9细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
NSC-34细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠B细胞淋巴瘤因子3(BCL-3)ELISA检测试剂盒，英文名：BCL-3 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
人巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β)ELISA检测试剂盒，英文名：Human MIP-3β ELISA Kit，规格：48T/96T
2E8细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样　；细胞传代方法：2-4天换液1次。
HRC-99细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触YZ的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素CJ；血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存，并在2周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用75%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，Z小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含10%甘油的完全培养基；包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200～400g离心5分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到Z小体积，不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到Z小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到Z小体积，不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
KYSE270细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：5传代
细胞传代方法：1：6-1：10传代，每周换液2-3次
hUC-MSC细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KYSE520细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠血吸虫(schistosoma)ELISA检测试剂盒，英文名：schistosoma ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)ELISA检测试剂盒，英文名：Mouse APAF1 ELISA Kit，规格：48T/96T
HUT102细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁生长
GM12878细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)ELISA检测试剂盒，英文名：Human MMP-8 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠粒细胞特异性抗核抗体(GSANA)ELISA检测试剂盒，英文名：Mouse GSANA ELISA Kit，规格：48T/96T
人细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA检测试剂盒，英文名：Human ICAM-1/CD54 ELISA Kit，规格：48T/96T
人活化蛋白C抵抗素(APCR)ELISA检测试剂盒，英文名：Human APCR ELISA Kit，规格：48T/96T
人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA检测试剂盒，英文名：Human PACAP ELISA Kit，规格：48T/96T
人黏病毒耐药蛋白1(MX1)ELISA检测试剂盒，英文名：Human MX1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠端粒酶关联蛋白1(TEP1)ELISA检测试剂盒，英文名：TEP1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞背景资料：详见相关文献介绍
CX-1细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BC-020细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
FHC细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SNU-16细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：悬浮聚集；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：3-4天换液1次。
大鼠视网膜母细胞瘤YZ蛋白(PRB)ELISA检测试剂盒，英文名：PRB ELISA Kit，规格：48T/96T
OVCAR-3细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2—1：4传代，每周换液2—3次
HLMVEC细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
接收细胞相关问题：如不能在收到细胞后及时操作细胞，T25及离心管发货的细胞将可以消毒后在37度过夜，血清发货的细胞在室温下静置1-2天(注意不要放冰箱)，干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱，若干冰完全升华，请即刻复苏细胞。T25瓶及离心管在培养箱平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境，同时使部分因运输导致脱落的细胞贴壁，此步骤非常必要。T25瓶如果在显微镜下可以看到部分不贴壁的细胞，可以收集上清后离心(1200rpm，5min)后，将沉淀用新的培养基重悬后接种至新的培养瓶或皿中。部分细胞在运输过程中，由于不断震荡及环境不适，可能导致细胞破碎死亡，从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下，平衡后，贴壁细胞用PBS洗两遍再加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可；悬浮细胞可以离心(1000rpm，3min)收集细胞，并用PBS重悬后再离心一次，再用新的培养基重悬并接种细胞。
MOLP-2细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HL-1细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
小鼠衍生因子/FAM3B抗体(PANDER)ELISA检测试剂盒，英文名：Mouse PANDER ELISA Kit，规格：48T/96T
人分拣连接蛋白7(SNX7)ELISA检测试剂盒，英文名：Human SNX7 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)ELISA检测试剂盒，英文名：MAPK14 ELISA Kit，规格：48T/96T
MPC-83细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LM8细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SNU-354细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
人YbeY金属肽酶(YBEY)ELISA检测试剂盒，英文名：Human YBEY ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠A激酶PRKA锚定蛋白12(Akap12)ELISA检测试剂盒，英文名：Akap12 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
HFF-1细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：5-1：7传代
CF-1 MEF细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA检测试剂盒，英文名：PDGF ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠羧肽酶A2(CPA2)ELISA检测试剂盒，英文名：CPA2 ELISA Kit，规格：48T/96T
KMM1细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MV4-11细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A498细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
细胞形态特性：成纤维细胞样　
PAXC-011细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：3传代，3-4天传1次
HKC细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OVCAR-3细胞实验复苏ZX；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2—1：4传代，每周换液2—3次
人含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)ELISA检测试剂盒，英文名：Human vWA1 ELISA Kit，规格：48T/96T