RHD（igm）血型定型试剂（单克隆抗体）

1. 平板法（玻片法）
（1） 加1滴抗D试剂于玻片上。
（2） 再加1滴35-45％的被检红细胞悬液。该红细胞悬液可以是盐水悬液，也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞。
（3） 在圆形的玻片区域中混匀，（直径约为20mm大小），前后缓慢摇晃玻片。2分钟左右肉眼判读结果。不要将试剂的干燥与凝集相混淆。
（4） 如果呈阴性，需用试管法重做一遍试验。
2. 试管法
（1） 加1滴抗D试剂于一支预先标记好的试管中（75×12mm或75×10mm）。
（2） 再加1滴约3-5％的被检红细胞悬液于试管中。混匀。
（3） 离心，速度和时间可选择以下二种之一： a) 转速1000rpm，时间1分钟； b) 转速3400rpm，时间15秒。
（4） 检查是否有溶血（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染），然后轻轻摇晃，使细胞再悬浮起来。
（5） 观察凝集状况，并立即记录结果。必要时可借助显微镜。
（6） 若是阴性结果，需在37℃孵育15-30分钟，然后再离心观察结果。结果若呈阴性需进一步确认是否是弱D。
3. 微量板法（U型板）
（1） 加1滴抗D试剂于U型底的微孔中。
（2） 再在微孔中加1滴约3-5％的被检红细胞悬液，细胞悬液需事先制备于生理盐水中。
（3） 用机械的方法将U型板混匀。
（4） 用板式离心机离心：2000rpm，时间30秒。不同的离心机、不同的微量板所需要的离心条件有所区别，正确实验的结果需要适当的离心，使反应板产生清晰的细胞扣及透亮的上清液。 （5） 检测溶血情况（溶血可能是阳性结果，或者是细菌污染）。