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传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化，2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；4)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；5)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；6)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO2培养箱中进行培养；7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2～3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；2)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
大鼠载脂蛋白D(APOD)ELISA试剂盒，英文名：APOD ELISA Kit，规格：48T/96T
COV434细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2传代
CNE2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人弹性蛋白酶3A(ELA3A)ELISA试剂盒，英文名：Human ELA3A ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
KLN205细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KBM5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NUGC-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：6传代
SW626细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW 1353[SW 1353,SW-1353]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
pH7.2盐缓冲液，英文名：pH7.2 PBS Broth，用途：用于样品的稀释
巧克力血琼脂培养基基础，英文名：Chocolate Blood Agar Medium Base，用途：用于奈瑟球菌、流感嗜血杆菌的培养,需添5%~10%无菌脱纤维绵羊全血
改良运送培养基，英文名：Modified Transport Medium，用途：用于运送厌氧菌标本
酵母浸粉葡萄糖琼脂，英文名：Yeast Extract Glucose Agar，用途：用于地衣芽孢杆菌、芽孢菌、密执安棍状杆菌、金黄杆菌、蜂房哈夫尼菌、荧光假单胞菌和粘质沙雷氏菌的培养
细胞形态特性：成纤维细胞
麦康凯肉汤，英文名：MacConkey Broth，用途：用于肠道菌选择性增菌
6.5%化钠葡萄糖琼脂，英文名：6.5%Sodium Dextrose Agar，用途：用于肠球菌确证和培养
乳糖肉汤，英文名：Fluid Lactose Medium，用途：用于大肠菌群测定及沙门氏菌前增菌
营养肉汤(NB)，英文名：Nutrient Broth，用途：用于细菌的培养和增菌
细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用，近年来细胞学蓬勃发展，并取得了重大的进展，细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。细胞实验谨慎复杂，需要的实验设备种类繁多，下面就一些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍：CO2培养箱是细胞培养的必备仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染，因此，CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要。纯水系统：细胞培养用水一般要求双蒸水，实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的，而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡，血清中内毒素含量越低，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高，会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。超净工作台/生物安全柜：细胞培养对无菌环境要求很高，在细胞操作时，一般需要在100级空气质量条件下进行，因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。液氮罐：为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性。超低温冰箱：细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般4℃下存放30min，转放-20℃ 1 hour，再转入-70至-80℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-196℃)，这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于超低温冰箱保存。恒温水浴：从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。离心机：细胞培养需要离心收集传代细胞，所以需要配置低速的常温离心机，对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。移液器和细胞培养的大量耗材：细胞实验中有大量频繁的移液操作，因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量极大。除上述仪器外，高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的必备仪器，发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
大鼠白介素2受体(IL-2R)ELISA试剂盒，英文名：IL-2R ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体-R4(STRAIL-R4)ELISA试剂盒，英文名：Mouse STRAIL-R4 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠层粘连蛋白β1(LAMβ1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse LAMβ1 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞背景资料：详见相关文献介绍
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，Z近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
CCRF-SB细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
H4IIEC3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HFF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：5—1：7传代
沙氏葡萄糖液体培养基/沙氏葡萄糖肉汤(SDB)，英文名：Sabouraud Dextrose Broth，用途：用于霉菌、酵母菌的培养
抗生素培养基8号，英文名：Medium 8，用途：用于微生物方法测定抗生素效价
Eugon LT 100琼脂基础，英文名：Eugon LT 100 Agar Base，用途：用于中细菌总数的测定,每200ml添加1支吐温80
酵母粉葡萄糖霉素琼脂(YGC)，英文名：Yeast Extract Glucose Chloramphenicol Agar，用途：用于霉菌酵母菌的分离和计数
小鼠轴蛋白YZ蛋白2(AXIN2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse AXIN2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人Ⅲ型前胶原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒，英文名：Human PⅢNP ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠N-myc下游调节基因2(NDRG2)ELISA试剂盒，英文名：NDRG2 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠血小板激活因子(PAF)ELISA试剂盒，英文名：PAF ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
Nutu19细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CCD-18Co细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
DH-82细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MEG-01细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Romas细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ECC12细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
MOVAS细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒，英文名：αHSG ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：2-1：5传代，2-3天换液1次。
RMD9细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
bEnd.3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HMC3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
K7M2wt细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长 ；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
Chang liver细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
EL4细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
双歧杆菌生化管用基础培养基，英文名：Bifidobacterium Biochemical tests Base Medium，用途：用于双歧杆菌糖发酵生化试验
Dubos油酸琼脂基础，英文名：Dubos Oleic Agar Base，用途：用于肺结核杆菌的分离培养,每90ml添加5支Dubos油酸琼脂基础添加剂和1-2支青霉素溶液
察氏琼脂，英文名：Czapek Dox Agar，用途：用于青霉和曲霉的分离鉴别
LAMVAB琼脂基础，英文名：LAMVAB Agar Base，用途：用于乳酸杆菌的分离,每100ml添加1支万古霉素溶液
细胞生长特性：贴壁生长
NTera-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
AMO-1细胞专业复苏；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HNE1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1341[H1341]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
R3/1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
VERO细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
明胶盐缓冲液，英文名：Gelatin PBS Broth，用途：用于肉毒梭菌和肉毒毒素检样的制备
高氏合成一号液体培养基，英文名：Gauze’s Synthetic Broth Medium，用途：用于放线菌的培养
发根农杆菌培养基(YEB)，英文名：Agrobacterium rhizogene Medium，用途：用于发根农杆菌的培养
毛藓菌琼脂3号，英文名：Trichophyton Agar #3，用途：用于毛藓菌属的鉴定
大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA试剂盒，英文名：gp130 ELISA Kit，规格：48T/96T
