KS-1人脑胶质母细胞瘤细胞系 细胞培养平台直销价
传代培养及其操作步骤:原代细胞培养成功以后,需要进行分离培养,否则细胞会因生存空间不足或密度过大,营养障碍,影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株),可以进行细胞克隆,易于保存,但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料,便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液;2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜;3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化,2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察,当发现胞质回缩、细胞间隙增大后,应立即中止消化;4)吸出消化液,向瓶内加入Hanks液少量,轻轻转动培养瓶,把残留消化液冲掉,然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化,在吸除胰蛋白液后,可直接加入少量含血清的培养液,终止消化;5)使用弯头吸管,吸取瓶内培养液,按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞,使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔,以防用力过猛损伤细胞;6)用计数板计数后,分别接种于新的培养瓶中,置CO2培养箱中进行培养;7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2~3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面,即可使用;也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间,消化时间过短时,细胞不宜从瓶壁脱落,过长的消化会导致细胞脱落、损伤;2)掌握好消化浓度,当消化液浓度过高时,消化时间应缩短,过低时细胞消化时间相对延长。
人抗中性粒细胞抗体(ANA)ELISA试剂盒,英文名:Human ANA ELISA Kit,规格:48T/96T
CMECs细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
C8161细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠复制启动因子1(REPIN1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse REPIN1 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
M07e细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MGH-u3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LN18细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GI-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
HSF2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
ZG蓝琼脂,英文名:China Blue Agar,用途:用于肠道致病菌的选择性分离
蔗糖胰蛋白胨肉汤,英文名:Sucrose Tryptone Broth,用途:用于致病性嗜水气单胞菌的斑点酶联免疫试验
MFC琼脂,英文名:MFC Agar,用途:用于大肠菌群的滤膜法检测
哥伦比亚琼脂培养基基础,英文名:Columbia Agar Base,用途:用于梭菌检验,每100ml添加1支庆大霉素
细胞形态特性:成纤维细胞
改良Letheen肉汤基础,英文名:Letheen Broth Base ,Modified,用途:用于卫生微生物检测,每200ml添加1支吐温80
T1N0肉汤,英文名:T1N0 Broth,用途:用于霍乱弧菌的生长试验
肠球菌琼脂(胆汁七叶苷叠氮钠琼脂),英文名:Bile Esculin Azide Agar,用途:用于肠球菌选择性分离培养和计数
沙氏琼脂培养基(含霉素),英文名:Sabouraud’s Agar with Chloramphenicol,用途:用于真菌计数培养
Z近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代Z重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
小鼠核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse NR3C1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA试剂盒,英文名:Human HSL ELISA Kit,规格:48T/96T
人巨噬细胞刺激蛋白(MSP)ELISA试剂盒,英文名:Human MSP ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞背景资料:详见相关文献介绍
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
KP4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SK-MEL-31细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:4-1:6传代,2-3天换液1次。
NCI-H1435细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长,松散;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3-1:6传代,每周换液2-3次
BDS培养基,英文名:Bacteroid Selective Agar,用途:用于拟杆菌的选择性分离
葡萄球菌增菌肉汤基础,英文名:Staphylococcus Enrichment Broth Base,用途:用于凝固酶阳性葡萄球菌选择性增菌,每100ml添加1支1%亚碲酸钾溶液
GN增菌液(革兰氏阴性细菌增菌肉汤),英文名:Gram Negative Enrichment Broth,用途:用于革兰氏阴性细菌尤其是志贺氏菌的增菌
Waksman液体培养基,英文名:Waksman Medium,用途:用于氧化杆菌的培养
小鼠胰岛细胞抗体(ICA)ELISA试剂盒,英文名:Mouse ICA ELISA Kit,规格:48T/96T
人ER脂质Raft关联蛋白1(ERLIN1)ELISA试剂盒,英文名:Human ERLIN1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人岩藻糖基转移酶2(FUT2)ELISA试剂盒,英文名:Human FUT2 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒,英文名:MMP11 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
A101D细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:4-1:6传代,2-3天换液1次。
K1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
ACC-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
U343细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
R1610细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
TOV-21G细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:3-1:4传代,3-4天换液1次。
RAEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠轻肽神经丝蛋白(NEFL)ELISA试剂盒,英文名:Mouse NEFL ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代方法:1:2传代
Caov-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3传代,2—3天换液一次
CHL细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
AAV293细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Huh-7.5.1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CL-34细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HOSEpiC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BT-20细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2—1:4传代,2—3天换液一次
HC琼脂基础,英文名:HC Agar Base,用途:用于中霉菌的计数,每升添加20ml吐温80
pH7.0 化钠-蛋白胨缓冲液,英文名:Buffered Sodium Chloride-peptone Solution pH 7.0,用途:用于样品制备
史娃兹鉴别培养基(SDM),英文名:Schwartz Differential Medium,用途:用于啤酒野生酵母的检验
Rogosa SL肉汤,英文名:Rogosa SL Broth,用途:用于口腔、阴道和粪便中乳酸杆菌的检验,每升添加1.32ml冰乙酸和1ml吐温80
细胞生长特性:贴壁生长
786-O [786-0]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HLF-a细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RN-c细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HaCaT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:3—1:6传代,每周换液2—3次
Ana-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
Tca8113细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PYG液体培养基基础,英文名:PYG Broth Medium Base,用途:用于双歧杆菌乙酸和乳酸代谢物测定,每20ml培养基中添加1支化血红素溶液和2支化血红素溶液
去氧胆酸盐琼脂(DC),英文名:Desoxycholate Lactose Agar,用途:用于肠道致病菌及大肠杆菌的选择性分离和计数
连四盐肉汤培养基基础,英文名:Fluid Tetrathionate Medium Base,用途:用于沙门氏菌选择性分离,每100ml添加碘溶液、0.1%煌绿溶液各1支
改良番茄汁肉汤培养基,英文名:Tomato Juice Broth,Modified,用途:用于乳酸菌的培养和总数测定
小鼠Smad同源物1(MADH1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse MADH1 ELISA Kit,规格:48T/96T