A-204人横纹肌肉瘤细胞系 细胞培养平台直销价

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传代培养及其操作步骤：原代细胞培养成功以后，需要进行分离培养，否则细胞会因生存空间不足或密度过大，营养障碍，影响细胞生长。细胞由原培养瓶内分离稀释后传到新的培养瓶中培养的过程称之为传代培养。传代细胞允许培养的细胞扩增(形成细胞株)，可以进行细胞克隆，易于保存，但可能丧失一些特殊的细胞和分化特征。传代细胞形成细胞株的利处在于提供了大量持久的实验材料，便于实验。【操作步骤】1)吸掉或倒掉培养瓶内旧培养液；2)向瓶内加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆盖培养瓶底为宜；3)置37℃孵箱或室温(25℃温度)下进行消化，2~5min后把培养瓶放在倒置显微镜下进行观察，当发现胞质回缩、细胞间隙增大后，应立即中止消化；4)吸出消化液，向瓶内加入Hanks液少量，轻轻转动培养瓶，把残留消化液冲掉，然后再加培养液。如果仅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培养液，终止消化；5)使用弯头吸管，吸取瓶内培养液，按顺序反复轻轻吹打瓶壁细胞，使之从瓶壁脱离形成细胞悬液。吹打时动作要轻柔，以防用力过猛损伤细胞；6)用计数板计数后，分别接种于新的培养瓶中，置CO2培养箱中进行培养；7)细胞培养换液时间应根据细胞生长的状态和实验要求来确定。一般2～3d后应换一次生长液。待细胞铺满器皿底面，即可使用；也可继续传代扩大培养或换成维持液。【注意事项】1)掌握好细胞消化的时间，消化时间过短时，细胞不宜从瓶壁脱落，过长的消化会导致细胞脱落、损伤；2)掌握好消化浓度，当消化液浓度过高时，消化时间应缩短，过低时细胞消化时间相对延长。
大鼠白蛋白(BSA)ELISA试剂盒，英文名：BSA ELISA Kit，规格：48T/96T
RGC-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SK-BR-3[SKBR3]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠催乳素诱导蛋白(PIP)ELISA试剂盒，英文名：Mouse PIP ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
CV-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCECs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TALL-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：维持细胞密度在4×105-1×106 cells/ml之间，2-3天换液1次　
HPaSteC(HPSC)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PG细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
基酸脱羧酶试验对照培养基，英文名：Aminoacid Decarboxylase Test Medium controls，用途：用于细菌的基酸试验对照
RS琼脂，英文名：Rimler-Shotts Agar，用途：用于致病性嗜水气单胞菌的分离
轻唾琼脂培养基(MSA)基础，英文名：Mitis Salivarius Agar Base，用途：用于轻唾链球菌的分离培养,每200ml添加1支亚碲酸钾溶液
Candida Elective 琼脂，英文名：Candida Elective Agar to Nickerson，用途：用于食品中假丝酵母和酵母菌总数的测定
细胞形态特性：上皮样
改良Letheen肉汤基础，英文名：Letheen Broth Base ,Modified，用途：用于卫生微生物检测,每200ml添加1支吐温80
发根农杆菌液体培养基，英文名：Agrobacterium rhizogene Broth Medium，用途：用于发根农杆菌的培养
乙基紫叠氮钠肉汤，英文名：Ethyl Violet Azide Broth，用途：用于链球菌的增菌培养
麦芽汁琼脂培养基(含霉素)，英文名：Malt Agar Medium with Chloramphenicol，用途：用于真菌的培养和保存
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1万单位）、7.5％NaHC03溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20ml）(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内，加入灭活小牛血清10m1，庆大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸钠溶液3ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
大鼠分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)ELISA试剂盒，英文名：SFRP2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人半胱酸蛋白酶YZ剂3(CST3)ELISA试剂盒，英文名：Human CST3 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠阿霉素(ADR)ELISA试剂盒，英文名：ADR ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞背景资料：在裸鼠中成瘤。
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，Z近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
MC3T3-E1 Subclone 14细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A498细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
COLO 320DM细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TYCSB培养基基础，英文名：Tryptone Yeast Cystine Sucrose Bacitracin Medium，用途：用于变异链球菌的分离, 每100ml添加1支杆菌肽
APT肉汤，英文名：APT Broth，用途：用于异质发酵乳酸杆菌和其它需高含量胺素菌的培养
Middle Brook 7H11琼脂基础/改良Middle Brook 7H11琼脂基础，英文名：Middle Brook 7H11 Agar /Mitchison Modifi 7H11 Agar，用途：用于分枝杆菌分离培养,每180ml添加1支甘油和4支Middlebrook OADC增菌液
改良NBB肉汤基础，英文名：NBB Broth Base,Modified，用途：用于啤酒中微生物的检测
大鼠转化生长因子a(TGFa)ELISA试剂盒，英文名：TGFa ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠前列腺酸性酶(PAP)ELISA试剂盒，英文名：Mouse PAP ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠糖原合酶激酶3α(GSK3α)ELISA试剂盒，英文名：GSK3α ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠铁反应元件结合蛋白2(IREB2)ELISA试剂盒，英文名：IREB2 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
BPH-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HTB-9细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HEKa细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HMEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HBE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
NCCIT细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：4—1：8传代，每周换液2—3次
GP293细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠Toll样受体2(TLR2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse TLR2 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞传代方法：1：6-1：10传代；每周2-3次
KYSE150细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ER-30细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1436细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：随细胞的密度而增加
TALL-104细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RINm5f细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hep-3B[Hep3B]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SK-MES-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
活性炭酵母琼脂(CYE)，英文名：Charcoal Yeast Extract Agar(Legionella CYE Agar Ba，用途：用于制备BCYE琼脂选择性分离军团
DEV乳糖蛋白胨肉汤，英文名：DEV Lactose Peptone Broth，用途：用于大肠杆菌的测定
L型细菌高渗盐增菌培养基，英文名：L-Bacterial Hypertonic Salt Broth，用途：用于样本中L型细菌增菌培养
RV R10肉汤，英文名：Rappaport-Vassiliadis R10 broth，用途：用于沙门氏菌的分离培养
细胞生长特性：贴壁生长
CFSC-2G细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
CAL-51细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LS1034细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：3传代，每周2-3次
HOEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TE-14细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
CCD-18Co细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TYC琼脂培养基，英文名：Tryptone Yeast Cystine Agar Medium，用途：用于血链球菌的分离,可添加杆菌肽0.2U/ml以增加选择性
山梨醇麦康凯半固体培养基，英文名：Sorbitol MacConkey Semi-solid Medium，用途：用于大肠埃希氏菌O157菌种保存
改良Letheen琼脂基础，英文名：Letheen Agar Base, Modified，用途：用于卫生微生物检测,需添加7g/L吐温80
豆粉琼脂，英文名：Soya Flour Agar，用途：用于血琼脂制备,需添加无菌脱纤维绵羊全血
人肾上腺髓质素前体(Pro-ADM)ELISA试剂盒，英文名：Human Pro-ADM ELISA Kit，规格：48T/96T