DMS 53人小细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富

DMS 53人小细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：详见相关文献介绍
L5178Y细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PLA-802细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
HLE细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
K1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)：1)吸出原培养瓶中的培养基，PBS缓冲液润洗细胞两次，加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间，通常控制在1-2min)；2)镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶，加6-8ml完全培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散；3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的完全培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养；4)注意培养基PH值变化情况，定期换液(每周2-3次)，待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存；特别注意：(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养，建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶，请在原瓶培养基中额外添加10%的血清，(原瓶培养基的继续使用时间Z长不宜超过72小时)；2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化，请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代，请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养；3)如签收时出现培养瓶壁破裂，漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
HuUMSCs-11细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SKOV-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Okul BclxL 50RFP细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2传代
NCI-H196[H196]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OVCA432细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LN382细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ABC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：每周换液2次。
HFSF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：1：3传代，3-4天换液一次
HEC1-A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
P815细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ACC-M细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Mv.1.Lu细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代，每周2-3次
沙氏葡萄糖液体培养基/沙氏葡萄糖肉汤(SDB)，英文名：Sabouraud Dextrose Broth，用途：用于霉菌、酵母菌的培养
厌氧基础琼脂，英文名：Anaerobe Basal Agar，用途：用于厌氧菌尤其是拟杆菌的培养,需添加5-10%无菌脱纤维绵羊全血
LAMVAB琼脂基础，英文名：LAMVAB Agar Base，用途：用于乳酸杆菌的分离,每100ml添加1支万古霉素溶液
WS琼脂，英文名：WS Agar，用途：用于沙门氏菌选择性分离
营养葡萄糖琼脂(NGA)，英文名：Nutrient Glucose Agar(Waksman, 1957)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
去氧胆酸盐琼脂(DC)，英文名：Desoxycholate Lactose Agar，用途：用于肠道致病菌及大肠杆菌的选择性分离和计数
G-292, clone A141B1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：4—1：8传代；每周换液2-3次
MIN-6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HuH-7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
RK-13细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
HeLa229细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 742.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2—1：4传代，每周换液2—3次
AtT20细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
COLO394细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞学在生命科学科中起着至关重要的作用，近年来细胞学蓬勃发展，并取得了重大的进展，细胞实验室的构建也是各个院校生物学科必备的实验室。细胞实验谨慎复杂，需要的实验设备种类繁多，下面就一些动物细胞实验室必备仪器进行简单介绍：CO2培养箱是细胞培养的必备仪器，它为细胞提供了一个体外培养的舒适环境，如适宜的温度、湿度、酸碱度、O2浓度等。细胞在体外培养时很容易受到各种细菌、微生物的感染，因此，CO2培养箱的灭菌和YJ能力就显得尤为重要。纯水系统：细胞培养用水一般要求双蒸水，实际上普通蒸馏水经玻璃器皿中按标准方法蒸馏二次得到的双蒸水是不能满足要求的，而且水中的内毒素直接参与细胞凋亡，血清中内毒素含量越低，对细胞毒性越小，越利于细胞的生长和传代;内毒素含量过高，会直接导致细胞提前老化。因此建议配置正式的水纯化系统。超净工作台/生物安全柜：细胞培养对无菌环境要求很高，在细胞操作时，一般需要在100级空气质量条件下进行，因此超净工作台或生物安全柜就必须配备。液氮罐：为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般为液氮温度-196℃，因此，需要液氮罐。在此环境中，一般细胞可以保存十年具有活性。超低温冰箱：细胞的冻存过程需要一系列程序降温，一般4℃下存放30min，转放-20℃ 1 hour，再转入-70至-80℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-196℃)，这时就必须配备一台-86℃超低温冰箱。一般超低温冰箱保存细胞可达数月，对于不需要长期冻存的细胞，可暂时放于超低温冰箱保存。恒温水浴：从液氮或超低温冰箱中取出细胞冻存管需要立即放于37℃水浴中快速复苏之后才传代培养，因此，恒温水浴也是细胞实验室必备仪器。离心机：细胞培养需要离心收集传代细胞，所以需要配置低速的常温离心机，对于后期细胞内容物的分离则需要高速冷冻离心机。移液器和细胞培养的大量耗材：细胞实验中有大量频繁的移液操作，因此各种微量移液器、瓶口分配器、移液管控制器是必不可少的。各类细胞培养板、细胞培养瓶、移液管等耗材更是不可或缺的，而且一次性，用量极大。除上述仪器外，高压灭菌锅、倒置显微镜也是细胞培养的必备仪器，发酵罐、转瓶机等也常常见于细胞培养实验室。
NRK49F细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠静止素Q6基氧化酶1(QSOX1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse QSOX1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒，英文名：Mouse TGF-α ELISA Kit，规格：48T/96T
人羧酸酯酶(CES)ELISA试剂盒，英文名：Human CES ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠胰岛素受体底物1(IRS1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse IRS1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人YZ素βC(INHβC)ELISA试剂盒，英文名：Human INHβC ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠β-内啡肽(βEP)ELISA试剂盒，英文名：βEP ELISA Kit，规格：48T/96T
人游离β绒毛膜促性腺激素(F-βCG)ELISA试剂盒，英文名：Human F-βCG ELISA Kit，规格：48T/96T
人岩藻糖变旋酶(FucM)ELISA试剂盒，英文名：Human FucM ELISA Kit，规格：48T/96T
人踝蛋白(TLN)ELISA试剂盒，英文名：Human TLN ELISA Kit，规格：48T/96T
高氏合成一号琼脂培养基，英文名：Gauze’s Synthetic Agar Medium，用途：用于放线菌的培养
AN厌氧琼脂基础，英文名：Anaerobic Agar Base，用途：厌氧基础培养基,每100ml添加化血红素溶液和维生素K1溶液各1支
4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基，英文名：MUG Medium，用途：用于大肠埃希氏菌检验(ChP)
MS大量元素，英文名：Murashige & Skoog Macronutrients，用途：用于植物组织培养
CCLP1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ARPE-19细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
VLcop细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁生长
m-Endo肉汤，英文名：m-Endo Broth，用途：用于水中大肠菌群膜过滤法检测
乙酰胺琼脂(乙酰胺培养基)，英文名：Acetamide Agar，用途：用于绿脓杆菌分离培养
沙堡琼脂培养基，英文名：Sabouraud’s Agar Medium，用途：用于真菌杀灭试验
缓冲蛋白胨水(BPW)/缓冲胨水增菌液(BP)，英文名：Buffered Peptone Water，用途：用于沙门氏菌、阪崎杆菌的增菌
PTM1(微量元素)，英文名：PTM1，用途：用于酵母菌的表达,需添加浓
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：上皮样
NCI-H596[H596]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HT1080(HT-1080)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠凝血酶敏感蛋白1(TSP1)ELISA试剂盒，英文名：TSP1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人胰安肽(Aglycin)ELISA试剂盒，英文名：Human Aglycin ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠TH糖蛋白(THP)ELISA试剂盒，英文名：Mouse THP ELISA Kit，规格：48T/96T
人信号传导转录激活因子1(STAT1)ELISA试剂盒，英文名：Human STAT1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人细胞间粘附分子4(ICAM4)ELISA试剂盒，英文名：Human ICAM4 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞培养相关问题总结：冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂；细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题；可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活；培养细胞时应使用5%或10%CO2？或根本没有影响？一般培养基中大都使用HCO3-/CO32-/H+作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中NaHCO3含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10%CO2；当培养基中NaHCO3为每公升1.5g时，则应使用5%CO2培养细胞。何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上之更换时间，按时更换培养基即可。培养基中是否须添加抗生素？除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。
牛心汤琼脂，英文名：Cattle Heart Broth Agar，用途：用于绵羊血琼脂平板制备
PTM1(微量元素)，英文名：PTM1，用途：用于酵母菌的表达,需添加浓
改良EC肉汤(mEC+n)基础，英文名：Modified EC Broth Base，用途：用于O157选择性增菌,每225ml中添加1支新生霉素储备液,每100ml中添加1支新生霉素储备液
含糖牛肉汤琼脂培养基(含碳酸)，英文名：Beef soup Agar Medium with Lactose and Calcium car，用途：用于乳酸菌计数
SIM动力培养基，英文名：SIM Power Medium，用途：用于细菌动力试验