Z-138人套细胞淋巴瘤细胞系 复苏技术经验丰富

Z-138人套细胞淋巴瘤细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：详见相关文献介绍
THLE-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满
MOPC细胞专业复苏；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A-72细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CMK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
为什么培养的细胞要及时传代？体外培养的细胞大多具有生长接触YZ的特性，也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候，它就会停止生长，及时传代后，细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些？可能的原因有：更换了不同的培养液或血清；培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏；培养物中有少量细菌或真菌污染；试剂保存不当；比较新培养液与原培养液成分，比较新血清与旧血清等，找出其它可能的原因。解决办法：增加起始培养细胞浓度；让细胞逐渐适应新培养液；换入新鲜配制培养液；补加谷酷肢或生长因子等；用无抗生素培养液培养，如发现污染，去弃培养物，或用抗生素CJ；血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存，并在2周内用完;分离培养物，检测支原体。冷冻管应如何解冻？取出冷冻管后，须立即放入37℃水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化，特别注意，需残留一小块冰块，就可拿到超净工作台操作细胞，用75%酒精消毒冻存管，用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管爆裂。
SJCRH30[RC13]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
hEM1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCC-94[HCC941122,HCC94]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ZRLC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCASMC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SHI-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SUNE-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H650细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：球形的；细胞传代方法：1：3-1：6传代；
CEM-C7细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
U-118MG细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SK-N-FI细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：4传代，每周换液2次
HEK-293细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
细胞传代方法：1：5-1：15传代；每周2-3次。
Bolton肉汤基础，英文名：Bolton Broth Base，用途：用于弯曲菌选择性增菌,每100ml添加1支Bolton肉汤基础添加剂和5ml Bolton肉汤基础添加剂
MFC琼脂，英文名：MFC Agar，用途：用于大肠菌群的滤膜法检测
木本植物用培养基WPM(不含蔗糖和琼脂)，英文名：Wood Plant Medium without Sucrose and Agar，用途：用于植物组织培养
R2A琼脂，英文名：R2A Agar，用途：用于纯化水等制YY水中需氧菌总数测定
Amies运送培养基(含活性碳)，英文名：Amies Transport Medium with carbon，用途：用于致病菌标本的采集、运输和保存
甘油甘酸琼脂基础，英文名：Glycerol glycine agar (Okazaki and Okami, 1976)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定，每100ml添加2支甘油
A-427细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TMD8细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LK-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
IOSE-29细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
NCI-H196细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：4-1：6传代；每周换液2-3次。
HOCF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HTB-9细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NIH:OVCAR-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2-1：4传代，2-3天换液1次。
冷冻细胞解冻程序：依据细胞株数据单指定之基础培养基种类、血清种类和其它指定之成份和比例，制备培养基。绝大多数之细胞均无法立即适应不同之基础培养基或不同之血清种类，若因实验需要，必须有所不同时，务必以缓慢比例渐次改变培养基组成，确定细胞适应后，方进行所需之实验。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,马血清)，对细胞而言差异极大，请务必依据细胞株资料单指定之血清种类培养之。将培养基置于37°C水槽中回温，回温后喷以70%酒精并擦拭之，移入无菌操作台内。取出冷冻管，立即放入37°C水槽中快速解冻，水面高度不可接近或高过冷冻管之盖沿，否则易发生污染。轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化后，以70%ethanol擦拭冷冻管外部，移入无菌操作台内。依据细胞种类和浓度，于无菌操作台内取10ml培养基加至T25或T75flask中。取出已解冻之细胞悬浮液，缓缓加入T25或T75flask内之培养基，混合均匀，放入37°C，5%CO2培养箱培养。对绝大多数细胞而言，1%以下之冷冻保护剂DMSO，不会对细胞之贴附或活化有不良影响，不需立刻由解冻细胞中去除，待第二天确定细胞生长或贴附良好后再去除即可。惟对极少数因对DMSO敏感或会造成细胞分化之细胞，需立即去除DMSO者，则可将解冻后之细胞悬浮液放入5-10ml培养基中，离心300xg(约1000rpm)，5分钟，小心移去上清液，加入适量新鲜培养基，将细胞均匀混合后，转移至培养瓶中，再放入37°C，5%CO2培养箱培养。
NCI-H748[H748]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠吡哆醛/吡哆醇维生素B6酶(PDXP)ELISA试剂盒，英文名：PDXP ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠泛素结合酶E2A(UBE2A)ELISA试剂盒，英文名：Mouse UBE2A ELISA Kit，规格：48T/96T
人金属蛋白2(MT2)ELISA试剂盒，英文名：Human MT2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人神经黏蛋白(CDH2)ELISA试剂盒，英文名：Human CDH2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人核糖核酸酶A10(RNASE10)ELISA试剂盒，英文名：Human RNASE10 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠血管内皮生长因子B(VEGFB)ELISA试剂盒，英文名：Mouse VEGFB ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠血管紧张素II(ANG II)ELISA试剂盒，英文名：ANG II ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒，英文名：Mouse ADP ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠半乳凝集素4(GAL4)ELISA试剂盒，英文名：GAL4 ELISA Kit，规格：48T/96T
亚碲酸钾血琼脂基础，英文名：Blood Agar Base with Potassium Tellurite，用途：用于白喉杆菌分离培养,每90ml添加2支1%亚碲酸钾溶液和9ml 无菌脱纤维绵羊全血
四环素族检定培养基，英文名：Tetracyline Examination Medium，用途：用于四环素族抗生素残留检测
改良MSRV培养基基础(MSRV培养基基础)，英文名：Rappaport-Vassiliadis Medium,Semisolid Modificatio，用途：用于沙门氏菌选择性分离,每100ml需添加2mg新生霉素
假单胞菌琼脂培养基基础/CN琼脂基础，英文名：CN Agar Base，用途：用于绿脓杆菌滤膜法测定,每100ml添加甘油、啶酮酸溶液各1支
DOK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KGN细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RPPVEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：悬浮生长
幽门螺杆菌琼脂培养基基础，英文名：Helicobacter pylori Agar Medium Base，用途：用于幽门螺杆菌的分离培养,每100ml添加1支幽门螺杆菌选择性添加剂和7ml无菌裂解马血
Vogel-Johnson琼脂基础，英文名：Vogel-Johnson Agar Base，用途：用于金黄色葡萄球菌选择性分离,每100ml添加1支1%亚碲酸钾溶液
精酸双水解酶试验培养基/精酸脱羧酶肉汤，英文名：Double-arginine Hydrolase Test Medium，用途：用于细菌的精酸双水解酶试验
木糖-明胶培养基，英文名：Xylose-Gelatin Medium，用途：用于明胶液化试验
Eugon LT 100琼脂基础，英文名：Eugon LT 100 Agar Base，用途：用于中细菌总数的测定,每200ml添加1支吐温80
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：淋巴母细胞
U2932细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
H3396细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人脂质运载蛋白1(LCN1)ELISA试剂盒，英文名：Human LCN1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠胃肠癌标志物CA199(CA199)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CA199 ELISA Kit，规格：48T/96T
人肌动丝蛋白(AF)ELISA试剂盒，英文名：Human AF ELISA Kit，规格：48T/96T
人补体iC3b(iC3b)ELISA试剂盒，英文名：Human iC3b ELISA Kit，规格：48T/96T
人CD320分子(CD320)ELISA试剂盒，英文名：Human CD320 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO2培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于4°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于4°C冰箱中，培养基内之CO2会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO2，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
K氏培养基基础，英文名：K’s Medium Base，用途：用于饮料中耐热耐酸菌的检测,需使用苹果酸调节pH
Middle Brook 7H10琼脂基础，英文名：Middle Brook 7H10 Agar Base，用途：用于分枝杆菌分离培养,每180ml添加1支甘油和4支Middlebrook OADC增菌液
YPD琼脂，英文名：YPD Agar，用途：用于分子生物学实验中酵母菌的培养和保存
改良桑塔基氏培养基基础(含2.5%NaCl)，英文名：Starkey,s Medium Base, Modified with 2.5% NaCl，用途：用于脱肠菌属和脱弧菌的培养，每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
自诱导SB肉汤培养基，英文名：Autoinduction Super Broth Medium，用途：用于重组蛋白的表达，需添加甘油