NCI-H1299人非小细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富

NCI-H1299人非小细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：这株细胞来源于一个淋巴结转移。患者接受了初期放疗。细胞均一性的部分缺失p53蛋白，并缺少p53蛋白表达。细胞可以合成0.1pmol/毫克蛋白的NMB蛋白，而不合成促胃液释放肽(GRP)。
Colo-320细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Colo357细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H820[H820]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW1116细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2，其中r为离心机转轴ZX与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
KRC/Y细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2126[H2126]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
143TK-细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
L-M(TK-)[LM(tk-),LMTK-]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1385细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Clone M-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CAOV-4细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1944细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：3—1：6传代，每周换液2—3次
MEF(CF-1)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LC-2/ad细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
COR-L279细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PAXC-003细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：3传代，3-4天传1次
细胞传代方法：1：2传代；3天传代一次。
T1N1琼脂，英文名：T1N1 Agar，用途：用于霍乱弧菌的纯化
结晶紫中性红胆盐葡萄糖琼脂(VRBGA)，英文名：Violet-Red Bile Agar with Glucose and Lactose，用途：含乳糖、葡萄糖。用于阪崎肠杆菌的分离
精酸葡萄糖斜面琼脂(AGS)，英文名：Arginine Glucose Slant Agar，用途：用于霍乱弧菌的复合生化试验
麦康凯肉汤，英文名：MacConkey Broth，用途：用于肠道菌选择性增菌
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(尿嘧啶/亮酸/色酸缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
NWRI琼脂/HPCA培养基，英文名：NWRI Agar/HPC Agar，用途：用于水中异养微生物的计数
KMS11细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW1463[SW 1463,SW-1463]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CT26.WT细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：4-1：10传代，2-3天换液1次。
TALL-104细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
SJCRH30[RC13]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Mo7e细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SNU449细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
GLAG-66细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，Z小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含10%甘油的完全培养基；包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200～400g离心5分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到Z小体积，不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到Z小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到Z小体积，不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
Loo细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
大鼠末端补体复合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA试剂盒，英文名：TCC C5b-9 ELISA Kit，规格：48T/96T
人胰岛素样生长因子2(IGF2)ELISA试剂盒，英文名：Human IGF2 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠巨噬细胞炎症蛋白-1γ(MIP-1γ)ELISA试剂盒，英文名：MIP-1γ ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠ras同源物基因家族成员b(RHOB)ELISA试剂盒，英文名：RHOB ELISA Kit，规格：48T/96T
人层粘连蛋白γ1(LAMγ1)ELISA试剂盒，英文名：Human LAMγ1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠甘露糖受体C1(MRC1)ELISA试剂盒，英文名：MRC1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒，英文名：Human PAP ELISA Kit，规格：48T/96T
人抗SSB/La抗体(Anti-La)ELISA试剂盒，英文名：Human Anti-La ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒，英文名：Mouse sLR ELISA Kit，规格：48T/96T
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(赖酸缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium withoutLysin，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
桔汁肉汤(10倍浓缩)，英文名：Orange Serum Broth Concentrate 10×，用途：用于耐酸细菌的培养
MS微量元素，英文名：Murashige & Skoog Micronutrients，用途：用于植物组织培养
酵母氮源基础、无基酸，英文名：Yeast Nitrogen Base，without Amino Acid，用途：用于通过碳源和基酸的利用对酵母菌进行分类
JAR细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满
HBSMC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
C8-D1A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁生长
White培养基，英文名：White Medium，用途：用于植物组织培养，适合于根的培养
肉浸液肉汤，英文名：Meat Infusion Broth，用途：用于蜡样芽胞杆菌的纯培养
志贺氏菌增菌肉汤基础，英文名：Shigella Broth Base，用途：用于志贺氏菌选择性增菌,每225ml中添加1支新生霉素溶液
脑-心浸萃液态培养基，英文名：Brain-Heart Extraction Liquid Medium，用途：用于粪链球菌验证,也可用于苛养菌的培养
BCYE琼脂基础(BCYE鉴别琼脂基础)，英文名：Buffered Charcoal Yeast Extract Agar Base，用途：用于军团菌选择性分离
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：上皮样；多角形
Mo7e细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CT-26.WT细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠蛋白1(SEPE-1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse SEPE-1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人抗心磷脂抗体IgA(ACA-IgA)ELISA试剂盒，英文名：Human ACA-IgA ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠骨保护素(OPG)ELISA试剂盒，英文名：OPG ELISA Kit，规格：48T/96T
人Otubain人2蛋白(OTUB2)ELISA试剂盒，英文名：Human OTUB2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA试剂盒，英文名：Human GP-Ⅳ ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞的冻存：目前，细胞冻存Z常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)。(2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为3×10(6)～1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装1～1.5mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入4℃冰箱中2～3小时，再移至冰箱冷冻室内3～4小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时，沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
乙基紫叠氮钠肉汤，英文名：Ethyl Violet Azide Broth，用途：用于链球菌的增菌培养
m-TGE肉汤，英文名：m-TGE Broth，用途：用于滤膜法测定奶制品中的菌落总数
动力-盐培养基(B法)基础，英文名：Power-nitrate Medium，用途：用于细菌动力和盐还原试验,每100ml添加1ml甘油
AC肉汤，英文名：AC Broth，用途：用于常见微生物的培养和不含防腐剂的样品的检测
胰蛋白示盐肉汤，英文名：Tryptose Phosphate Broth，用途：用于苛养菌的培养