LU65人大细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富

LU65人大细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H1105细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：每周换液2-3次
HASMC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
JB6-C41细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MHCC97H细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验；2)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；3)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；4)不带手套，徒手操作；5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
AML12细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
AsPC-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3-1：6传代；每周换液2-3次。
SW 780细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
MDA-MB-361细胞专业复苏；细胞生长特性：松散贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法： 1：2—1：6传代，每周换液2—3次
HS27细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HCC 94细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
LN-18细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：4-1：6传代；每周换液2-3次
TE15细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MDA-MB-330细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KMH-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H526细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：每周换液2-3次。
hFOB1.19细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满
细胞传代方法：1：10传代
DTM培养基基础，英文名：Dermatophyte Test Medium Base，用途：用于皮肤真菌的培养
脑心浸出液肉汤(BHI/BHIB)，英文名：Brain Heart Infusion Broth，用途：用于细菌尤其是葡萄球菌的增菌和培养（SN/ISO）
指示选择性培养基基础，英文名：Direct selective medium base，用途：用于炭疽杆菌的分离鉴别,需加入多粘菌素B、溶菌酶、碳源
乳酸杆菌选择性琼脂(LBS琼脂)，英文名：Lactobacillus Selective Agar，用途：用于乳酸菌的选择性分离和培养,每升需添加1.32ml冰乙酸
SB肉汤，英文名：Super Broth，用途：用于基因工程大肠杆菌的高密度发酵
豆芽汁蔗糖琼脂培养基，英文名：Soybean sprout Extract Sucrose Agar Medium，用途：用于真菌尤其是霉菌的培养
T241细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NKM-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RTG细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
EPC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
rRMECs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
L-O2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
L6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成肌细胞样；细胞传代方法：1：2传代
HuT 102细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：圆形；淋巴母细胞样；细胞传代方法：1：3传代,2-3天传一代
Z近在培养细胞时，发现其状态不是很好，很容易扎堆生长，用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来，很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的，传代的第二天，有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢？你好，我养的细胞和你一样，消化下来也是一团的，但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀，分皿后在镜下看一看，移动培养皿的时候尽量动作轻，避免晃动。细胞生长挺快，那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能：一、细胞消化后吹打不均匀，造成细胞成团生长：二、细胞细化太过，细胞成片脱落，吹打时没有受力点，细胞聚团生长。解决办法：根据细胞生长的情况进行多次消化，将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养：一般步骤为：真空泵吸走培养基，1XPBS漂洗两次，加入1mlEDTA-Tripsin（100mm皿为例），37度放置数分钟，轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落，加入适量血清，以吸管上下吸放数次以打散细胞团块，离心后加入新鲜培养基，按比例转移至新皿。细胞的传代Z重要的是胰酶处理时间，若胰酶处理太久，容易造成细胞贴壁不紧，显微镜下观察立体感不强，严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验：HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长，一般处理5-6min，C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落，2min足矣，P19Cl6和293细胞贴壁不紧，可在PBS漂洗后，直接换新鲜培养基打散。
Mv 1Lu(NBL-7)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人和肽素(CPP)ELISA试剂盒，英文名：Human CPP ELISA Kit，规格：48T/96T
人分离蛋白1(SCRN1)ELISA试剂盒，英文名：Human SCRN1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠可溶性P选择素(sP-selectin)ELISA试剂盒，英文名：Mouse sP-selectin ELISA Kit，规格：48T/96T
人内皮脂肪酶(EL/LIPG)ELISA试剂盒，英文名：Human EL/LIPG ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠抗突变型瓜酸波形蛋白抗体(MCV)ELISA试剂盒，英文名：MCV ELISA Kit，规格：48T/96T
人双解丝蛋白1(TWF1)ELISA试剂盒，英文名：Human TWF1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠载脂蛋白C2(APOC2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse APOC2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人膀胱癌抗原(UBC)ELISA试剂盒，英文名：Human UBC ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠分泌型磷脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒，英文名：sPLA2 ELISA Kit，规格：48T/96T
Wilkins-Chalgren厌氧菌肉汤，英文名：Wilkins-Chalgren Anaerobe Broth，用途：用于厌氧菌的培养和药敏试验
黄豆粉琼脂培养基，英文名：Bean Agar Medium，用途：用于放线杆菌的筛选和培养
赫氏琼脂，英文名：Hiss Agar，用途：用于鼠疫杆菌的分离培养
胆盐乳琼脂培养基(DHL)，英文名：Deoxycholate Hydrogen Sulfide Lactose Medium，用途：用于肠道菌选择性分离
LIPF155C细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
786-O[786-0]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2170细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：3—1：6传代，3—5天换液1次
细胞生长特性：贴壁生长
Aliz-gal琼脂，英文名：Aliz-gal Agar，用途：用于大肠菌群快速检测
脱脂乳培养基，英文名：Skim Milk Medium，用途：用于乳酸杆菌的培养
含0.05%聚山梨酯80的 pH7.0化钠-蛋白胨缓冲液，英文名：Buffered Sodium Chloride-peptone pH 7.0 w Tween 80，用途：用于样品制备
布氏肉汤，英文名：Brucella Broth，用途：用于布鲁氏菌培养以及弯曲菌分离和动力试验
改良盐缓冲液，英文名：Modified Phosphate Saline Buffer，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：成纤维细胞
NSCF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HX147细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人形成素1(FMN1)ELISA试剂盒，英文名：Human FMN1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人核糖甲酰甘酸脒合酶(PFAS)ELISA试剂盒，英文名：Human PFAS ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠α半乳糖苷酶(αGAL)ELISA试剂盒，英文名：αGAL ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠早期生长应答因子1(EGR1)ELISA试剂盒，英文名：EGR1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠尿调蛋白(UMOD)ELISA试剂盒，英文名：Mouse UMOD ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞培养基应用选择：选择培养基没有一定的标准，有几点建议可供参考：(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献，或在购买细胞株时咨询。(2)其它实验室惯用的培养基不妨一试，许多培养基可以适合多种细胞。(3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640。(4)用多种培养基培养目的细胞，观察其生长状态，可以用生长曲线、集落形成率等指标判断，根据实验结果选择培养基，这是Z客观的方法，但比较繁琐。以下是部分细胞常用的培养条件：293人胚胎肾细胞培养条件：MEM,10%热灭活马血清；IMR-90人肺成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清和NEAA；W1-38人胚胎肺成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；A549人肺癌上皮细胞培养条件：F-12K,10%胎牛血清；A431人表皮癌细胞培养条件：DMEM,10%胎牛血清；BHL-100人乳房上皮细胞培养条件：McCoy', 10%胎牛血清；BeWo人绒毛癌上皮滋养层细胞培养条件：F-12K,15%胎牛血清；Caco-2人结肠腺癌上皮细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清和NEAA；Chang人肝脏上皮细胞培养条件：BME,10%小牛血清；HCT-15人结肠直肠腺癌上皮细胞培养条件：RPMI-1640,10%胎牛血清；HEp-G2人肝细胞癌上皮细胞培养条件：MEM,10% 胎牛血清和NEAA；HEp-2人喉癌上皮细胞培养条件：MEM,10% 胎牛血清;或RPMI-1640,10%胎牛血清；HT-29人结肠腺癌上皮细胞培养条件：McCoy',10%胎牛血清；JEG-2人绒毛膜癌上皮细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；KB人口腔癌上皮细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清和NEAA；Saos-2人骨肉瘤上皮细胞培养条件：McCoy',15%胎牛血清；WI-38人胚胎肺上皮细胞培养条件：BME,10%胎牛血清；WISH人羊膜上皮细胞培养条件：BME, 10%胎牛血清；HUVEC人脐带内皮细胞培养条件：F-12K,10%胎牛血清和肝素100ug/ml；IM-9人瘤成淋巴细胞培养条件：RPMI-1640,10%胎牛血清；Daudi人淋巴瘤细胞培养条件：RPMI-1640,10%胎牛血清；Clone M-3小鼠黑素瘤上皮细胞培养条件：F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清；BHK-21仓鼠肾成纤维细胞培养条件：GMEM,10%胎牛血清或MEM,10%胎牛血清和NEAA；CHO-K1仓鼠卵巢上皮细胞培养条件：F-12,10%胎牛血清；IEC-6大鼠正常小肠上皮样培养条件：DMEM,5%胎牛血清,胰岛素0.1μg/ml；COS-1猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；COS-3猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清；COS-7猴非洲绿猴肾成纤维细胞培养条件：MEM,10%胎牛血清
溶血琼脂基础，英文名：Hemolysis Agar Base，用途：用于鼠疫杆菌的培养,需添加无菌脱纤维绵羊全血
沙氏液体培养基(含霉素)，英文名：Sabouraud’s Broth with Chloramphenicol，用途：用于真菌增菌培养
NWRI琼脂/HPCA培养基，英文名：NWRI Agar/HPC Agar，用途：用于水中异养微生物的计数
复壮稀释液(MRD)，英文名：Maximum Recovery Diluent，用途：——用于细菌的复壮稀释
KM2猪肺炎支原体琼脂培养基，英文名：KM2 Mycoplasma Hyopneumoniae Agar Medium，用途：需添加马血清、青霉素