HBE人支气管上皮样细胞系 复苏技术经验丰富

HBE人支气管上皮样细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：详见相关文献介绍
Mahlavu细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Kit225细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
COR-L88细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
GEO细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
常见细胞培养中一些问题总结：1)培养基中血清的比例多少合适？血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的含量多少会对细胞的生长会产生极大的影响。血清的含量一般为5%-15%，不要低于5%或高过20%，因为含量过低会导致细胞营养不足，过高则会破坏渗透压平衡。一般建议血清含量为10%，可以适量加减；2)何时须更换培养基？视细胞生长密度而定，或遵照细胞株基本数据上的更换时间，按时更换培养基即可。还可以参照指示剂的颜色变化进行更换；3)购买的复苏细胞，为何会有脱落？因为运输的过程中不可避免的会有震荡，收到后可以离心收集；4)购买的细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；5)购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久；6)收到的冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
MOLM-16细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TK10细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3-1：6传代；2-3天换液1次。
Rat Cryopreserved Hepatocytes细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
231-luc细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
Caov-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代，2—3天换液一次
Hs 821.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2传代；每周换液2-3次
RENCA细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NKM-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CAL-85-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
FHL124细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
AZ521细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hela-mock细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2传代
半固体琼脂，英文名：Semisolid Agar，用途：用于细菌动力试验
阴沟肠杆菌分离琼脂(ECIA)，英文名：Enterobacter Cloacae Isolation Agar，用途：用于阴沟肠杆菌的分离
改良布氏肉汤培养基，英文名：Brucella Broth,Modified，用途：用于空肠弯曲杆菌的增菌培养
葡萄糖蛋白胨琼脂(DT培养基,不含中和剂)，英文名：DT Medium，用途：用于需氧芽孢杆菌计数
麦康凯肌醇阿东醇羧苄青霉素琼脂(MIAC)基础，英文名：MIAC Agar Base，用途：用于克雷伯氏菌选择性分离,每100ml添加1支羧苄青霉素
Pfizer肠球菌选择性琼脂(PSE琼脂)，英文名：Pfizer Enterococcus Selective Agar，用途：用于粪链球菌选择性分离
Cates-1B细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HANK1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MOLM-16细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2171[H2171]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
6T-CEM细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
SK-N-FI细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：4传代，每周换液2次
MUS-M1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HUP-T3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞复苏基本方法：1．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。3．剪开纱布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加10ml培养液，吹打使细胞悬浮。4．低速离心（500～1000转/分）5分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。5．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。收到T25 flask细胞时，处理方式为：在寄送过程中，为避免起泡造成细胞脱落死亡，T25 flask均加满培养基。请检查flask外观，并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象，若有任何问题，不要打开盖子，请立即通知细胞实验室。将原封之T25 flask静置于37°C，5%CO2培养箱中，使细胞回温至37°C，并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后，于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用)，仅留约5-10ml培养基于flask内，依一般培养方式再将细胞置入培养箱中，或细胞已长满盘，则将细胞做传代培养。
RPMI6666细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人冠状病毒(Coronaviruses IgG)ELISA试剂盒，英文名：Human Coronaviruses IgG ELISA Kit，规格：48T/96T
人尿皮质素2(UCN2)ELISA试剂盒，英文名：Human UCN2 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠生长分化因子6(GDF6)ELISA试剂盒，英文名：Mouse GDF6 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠载脂蛋白D(APOD)ELISA试剂盒，英文名：APOD ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠生长激素释放多肽(GHRP)ELISA试剂盒，英文名：GHRP ELISA Kit，规格：48T/96T
人γ-谷酰基转酶5(γGT5)ELISA试剂盒，英文名：Human γGT5 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠骨退化特异标志物(CTX-2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CTX-2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人趋化因子IP-1(IP-1)ELISA试剂盒，英文名：Human IP-1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠三腺苷结合盒转运体A1(ABCA 1)ELISA试剂盒，英文名：ABCA 1 ELISA Kit，规格：48T/96T
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)，英文名：Potato dextrose agar，用途：用于霉菌和酵母菌计数
血琼脂基础2号，英文名：Blood Agar Base No2，用途：用于细菌的培养,需添加无菌脱纤维绵羊全血
复壮稀释液(MRD)，英文名：Maximum Recovery Diluent，用途：——用于细菌的复壮稀释
蛋白胨水培养基，英文名：Peptone Water Medium，用途：用于细菌靛基质试验
EB-3细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：1：2-1：4传代，每周2-3次。
HN6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
JF-305细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
细胞生长特性：贴壁生长　
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(尿嘧啶缺陷/ SC-Ura)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Uraci，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
MFC琼脂，英文名：MFC Agar，用途：用于大肠菌群的滤膜法检测
GAM半固体培养基(不含葡萄糖)，英文名：Glfu Anaerobic Medium Semisolid without Dextrose，用途：用于厌氧菌的保存
Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基基础，英文名：Karmali’s Campylobacter Medium，用途：用于弯曲菌的选择性分离培养,每100ml添加1支Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基添加剂（含头孢哌酮、化血红素、万古霉素）
NZYM肉汤，英文名：NZYM Broth，用途：用于大肠杆菌菌株培养,配方被推荐用于重组l噬菌体的复制
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：详见细胞说明书
Jurkat,Clone E6-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Sall BclxL C1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2传代
大鼠视黄醇结合蛋白(RBP)ELISA试剂盒，英文名：RBP ELISA Kit，规格：48T/96T
人细胞色素C1(CYC1)ELISA试剂盒，英文名：Human CYC1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA试剂盒，英文名：sTLR2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人细胞球蛋白(CYGB)ELISA试剂盒，英文名：Human CYGB ELISA Kit，规格：48T/96T
人糖皮质激素受体β(GR-β)ELISA试剂盒，英文名：Human GR-β ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞冻存基本方法：1．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞24小时前换液一次。2．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达5×10(6)/ml，离心去上清，吸入离心管中。3．冻存液：先用培养液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加1.5毫升细胞悬液。5．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小Pai，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。
TGE琼脂，英文名：Tryptone Glucose Extract Agar，用途：用于菌落总数测定
YSG琼脂培养基基础，英文名：YSG Agar Medium Base，用途：用于耐热耐酸菌的检测,需使用1N或调节pH
霉菌液体培养基，英文名：Mould Broth Medium，用途：不含化钠,用于霉菌的增菌
0.5%葡萄糖肉汤培养基，英文名：0.5% Glucose Broth Medium，用途：用于无菌检查
TGY琼脂培养基，英文名：Tryptone Glucose Yeast Agar Medium，用途：用于芽孢菌的培养