HOP-92人小细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富

HOP-92人小细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H1781细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BT-20细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2—1：4传代，2—3天换液一次
KTA-7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H165细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
如何进行细胞复苏：1)从液氮容器中取出冻存管，直接浸入37℃温水中，并不时摇动令其尽快融化；2)从37℃水浴中取出冻存管，打开盖子，用吸管吸出细胞悬液，加到离心管并滴加10倍以上培养液，混匀；3)离心，1000rpm，5min；4)弃去上清液，加入含10%小牛血清培养液重悬细胞，计数，调整细胞密度，接种培养瓶，37℃培养箱静置培养；5)次日更换一次培养液，继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但Z好为对数生长期细胞。在冻存前一天Z好换一次培养液；2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时，要做好防护工作(戴棉手套)，以免冻伤；3)冻存和复苏Z好用新配制的培养液。细胞复苏的时候，有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后，放在室温下，经常发生冻存管爆炸，该怎么避免出现这种情况吗？其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的？一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口，再稍拧松盖子，再放37度水浴锅中摇溶，在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中，迅速离心，再用培养基洗一遍。
HCC70细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SNU-216细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
BxPC-3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化5-10分钟。1：2。3天内可长满。
MCF 10A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HN6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
WEHI164细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CAL-27细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：6传代，2—3天换液一次
Hs 870.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2—1：3传代；每周换液2-3次
GAK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：8.4 x 10^4 cells / sq.cm.
H4细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3传代,每周换液2-3次。
HE-MEF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MC3T3-E1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：1：2传代
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BPLS琼脂，英文名：BPLS Agar，用途：用于样本中沙门氏菌的选择性分离
自诱导SB肉汤培养基，英文名：Autoinduction Super Broth Medium，用途：用于重组蛋白的表达，需添加甘油
碎肉培养基基础，英文名：Broken Meat Medium Base，用途：用于杆菌的培养,需添加庖肉牛肉粒
pH7.0 化钠-蛋白胨缓冲液，英文名：Buffered Sodium Chloride-peptone Solution pH 7.0，用途：用于样品制备
TPY液体培养基，英文名：TPY Broth Medium，用途：用于双歧杆菌F6PPK测定
AC肉汤，英文名：AC Broth，用途：用于常见微生物的培养和不含防腐剂的样品的检测
TT细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：3-1：4传代，每周换液2次。
CZ-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
VP303细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KS-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2传代
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
SHI-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
U-251 MG细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：3传代；3-4天1次。　
SHZ-88细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
COC1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞的冻存：为避免污染造成的损失，Z小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化，需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前，细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基，成分可能如下：包含10%甘油的完全培养基；包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基；50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基，一些普通的培养基成分可能是：50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存：计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200～400g离心5分钟沉淀细胞，使用移液管移去上清到Z小体积，不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度，在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞，或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中，再次悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存：使用分离试剂从基层分离细胞，分离时尽可能温和，使对细胞的损伤减少到Z小。在完全生长培养基中，再次悬浮分离细胞，确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到Z小体积，不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度，在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管，将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中，5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻，可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中，然后转移到液氮中贮存。
BV2细胞专业复苏；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人三甲基鸟苷合酶1(TGS1)ELISA试剂盒，英文名：Human TGS1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人化细胞外信号调节激酶1/2抗体(P-ERK/2)ELISA试剂盒，英文名：Human P-ERK/2 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠血小板衍生生长因子D(PDGF-D)ELISA试剂盒，英文名：PDGF-D ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠G蛋白偶联雌激素受体1(GPER)ELISA试剂盒，英文名：Mouse GPER ELISA Kit，规格：48T/96T
人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA试剂盒，英文名：Human RANTES/CCL5 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠生长分化因子15(GDF15)ELISA试剂盒，英文名：Mouse GDF15 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠黑色素细胞刺激素(MSH)ELISA试剂盒，英文名：MSH ELISA Kit，规格：48T/96T
人抗肌萎缩蛋白(UTRN)ELISA试剂盒，英文名：Human UTRN ELISA Kit，规格：48T/96T
人游离前列腺特异性抗原(fPSA)ELISA试剂盒，英文名：Human fPSA ELISA Kit，规格：48T/96T
YPD琼脂，英文名：YPD Agar，用途：用于分子生物学实验中酵母菌的培养和保存
改良NBB肉汤基础，英文名：NBB Broth Base,Modified，用途：用于啤酒中微生物的检测
含6.5%化钠脑心浸液肉汤/高盐度脑心浸液肉汤，英文名：Brain Heart Infusion Broth with 6.5%NaCl，用途：用于细菌增菌与确证
生物素测定培养基，英文名：Biotin Assay Medium，用途：用于生物素的测定
LS-174T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OV2008细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SNU-423细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
GC肉汤基础，英文名：GC Broth Base，用途：用于致病性奈瑟氏菌的分离培养,每100ml添加IsoVitaleX添加剂、V-C-NYJ剂（VCN）、无菌血红蛋白各1支
TPY液体培养基，英文名：TPY Broth Medium，用途：用于双歧杆菌F6PPK测定
葡萄糖胰蛋白胨琼脂，英文名：Glucose Tryptone Agar，用途：用于嗜热菌芽孢计数
Dubos油酸琼脂基础，英文名：Dubos Oleic Agar Base，用途：用于肺结核杆菌的分离培养,每90ml添加5支Dubos油酸琼脂基础添加剂和1-2支青霉素溶液
盐还原菌培养基F，英文名：Postgate’s Medium F for Sulfate Reducers，用途：含琼脂,用于脱微生物的培养和计数,每100ml添加1支35%乳酸钠溶液
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：详见细胞说明书
HD11细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
XWLC-05细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人防御素α6(DEFα6)ELISA试剂盒，英文名：Human DEFα6 ELISA Kit，规格：48T/96T
人生长分化因子7(GDF7)ELISA试剂盒，英文名：Human GDF7 ELISA Kit，规格：48T/96T
人血管生成素相关生长因子(AGF)ELISA试剂盒，英文名：Human AGF ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠凋亡蛋白酶激活因子1(APAF1)ELISA试剂盒，英文名：APAF1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人钴胺传递蛋白Ⅱ(TCN2)ELISA试剂盒，英文名：Human TCN2 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞冻存基本方法：1．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞24小时前换液一次。2．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达5×10(6)/ml，离心去上清，吸入离心管中。3．冻存液：先用培养液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加1.5毫升细胞悬液。5．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小Pai，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。
DYS耶尔森菌琼脂，英文名：DYS Yersinaia Agar，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的分离培养
改良爱德华培养基基础，英文名：Edwards Medium Base,Modified，用途：用于无乳链球菌的选择性分离,每升添加5～7%无菌脱纤维绵羊全血
25%甘油盐琼脂基础(G25N)，英文名：25% Glycerol Nitrate Agar Base，用途：用于霉菌的分离和培养，需添加25%甘油
假单胞菌琼脂培养基基础/CN琼脂基础，英文名：CN Agar Base，用途：用于绿脓杆菌滤膜法测定,每100ml添加甘油、啶酮酸溶液各1支
改良巴尔斯氏培养基基础(含2.5%NaCl)，英文名：Baar,s Medium for Sulfate Reducers, Modified with，用途：用于脱肠球菌等盐还原细菌的培养，每100ml添加1支35%乳酸钠溶液