HO-1-N-1人鳞状上皮细胞癌细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料:详见相关文献介绍
COLO 741细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
HCC1428细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长,偶尔上皮细胞液泡的形成;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:4-1:8传代;每周换液2-3次。
DMS 114细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
SU-DHL6细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
造成实验室细胞污染常见情况总结:细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染,大多数较难处理。那么,哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢?我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间,有人已经用超净台四个多小时,不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验;2)器材或者溶液很久没用,未检测是否污染而直接使用;离心管多次使用,枪头为了方便交叉使用;3)超净台不点酒精灯;点了酒精灯放在右上角,而你在左下角做试验;4)不带手套,徒手操作;5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋,未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具,如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37%烤干备用)。超净台和桌面,东西太多太乱:超净台不是储物箱,什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台!这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面,切忌东西堆积如山,不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞!一不小心“飘”进你的细胞培养板里,细胞就会养的不好,啥时候死了都不知道!【培养箱太久没清洁】细胞污染了,并非直接扔了培养皿就不管了,首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染,如果有而且好几个板子都有类似的污染块,那很可能是培养箱中的水或者空气污染了,得给培养箱做个大扫除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水没了要记得加,还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂,难管理】在传代细胞这种卫生要求高,人多了,不确定因素多了,难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室,实验服当风衣穿,不扣纽扣,不戴,就容易造成细胞污染;超净台做实验时,喜欢说话聊着做试验,要是还不带口罩,里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢!
SC细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BpRc1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:4-1:6传代;每周换液2-3次。
Jurkat(clone E6-1)细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:淋巴母细胞;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
JJN-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
UI-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MOLM-13细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
VMM39细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SUM102PT细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LS1034细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:3传代,每周2-3次
TE10细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
VX-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Duckembryo细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维母细胞样;细胞传代方法:1:2传代
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
淋病奈瑟菌增菌培养基基础,英文名:N.gonorrhoeae Enrichment Medium Base,用途:用于淋病奈瑟菌的增菌和转送,每100ml添加1支淋病奈瑟菌培养基添加剂和10ml无菌脱纤维绵羊全血
N6培养基(不含蔗糖和琼脂),英文名:N6 Medium without Agar and Sucrose,用途:适合于愈伤组织和悬浮细胞培养
心浸液琼脂,英文名:Heart Infusion Agar,用途:用于苛养菌的培养
麦康凯琼脂基础,英文名:MacConkey Agar Base,用途:不含碳水化合物,用于大肠杆菌的发酵研究
气单胞菌琼脂(胆盐红亮绿琼脂),英文名:Aeromonas Agar(Bile Salt Irgasan Brilliant Green,用途:强选择性培养基,用于气单胞菌选择性分离
变异链球菌培养基,英文名:Streptococcus mutans Medium,用途:用于变异链球菌的培养
hCMEC/D3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HGMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NHEK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
OKa-C-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
Li-7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
UWB1.289细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
HS766T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RCC4细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞的冻存:为避免污染造成的损失,Z小化连续细胞系的遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查是否污染。有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培养基;包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基;50%细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基或50%细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:50%细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基或包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。悬浮细胞冻存:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期。以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到Z小体积,不要搅乱细胞。以1×10(7)到5×10(7)细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在无血清培养基中,再次悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。贴壁细胞冻存:使用分离试剂从基层分离细胞,分离时尽可能温和,使对细胞的损伤减少到Z小。在完全生长培养基中,再次悬浮分离细胞,确定有活力细胞数。以大约200g离心5分钟沉淀细胞。使用移液管移去上清到Z小体积,不要搅乱细胞。以5×10(6)到1×10(6)细胞/ml密度,在冻存液中悬浮细胞。分装进冻存管,将冻存管置于湿的冰上或放入4℃冰箱中,5分钟内开始冷冻步骤。细胞以1℃/分钟进行冷冻,可以通过可编程序的冷冻器进行或者把隔离盒中的冻存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后转移到液氮中贮存。
CMK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
大鼠糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒,英文名:GR-α ELISA Kit,规格:48T/96T
人17-酮类固醇(17-KS)ELISA试剂盒,英文名:Human 17-KS ELISA Kit,规格:48T/96T
人富含半胱酸蛋白61(Cyr61)ELISA试剂盒,英文名:Human Cyr61 ELISA Kit,规格:48T/96T
人雌二醇(E2)ELISA试剂盒,英文名:Human E2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人Syncollin蛋白(SYCN)ELISA试剂盒,英文名:Human SYCN ELISA Kit,规格:48T/96T
人输出蛋白4(XPO4)ELISA试剂盒,英文名:Human XPO4 ELISA Kit,规格:48T/96T
人葡萄糖-6-脱酶(G6PD)ELISA试剂盒,英文名:Human G6PD ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠生长关联蛋白43(GAP-43)ELISA试剂盒,英文名:Mouse GAP-43 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠可溶性白介素6受体(sIL-6R)ELISA试剂盒,英文名:Mouse sIL-6R ELISA Kit,规格:48T/96T
抗生素培养基5号,英文名:Medium 5(Streptomycin Assay Agar),用途:用于微生物方法测定抗生素效价
LEB基础(FDA标准),英文名:Listeria Enrichment Broth Base,用途:用于李斯特氏菌的选择性增菌,每225ml培养基添加啶酮酸溶液1支
维生素B12测定用培养基,英文名:Vitamin B12 Assay Broth,用途:用于维生素B12的测定
脑-心浸萃液态培养基,英文名:Brain-Heart Extraction Liquid Medium,用途:用于粪链球菌验证,也可用于苛养菌的培养
CT26.WT[CT26WT]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MDA-MB-435S细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:纺锤形;细胞传代方法:消化3-5分钟,1:2,3天内可长满
TC7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁生长
产芽孢肉汤,英文名:Sporulation Broth,用途:用于产气荚膜梭菌的芽孢试验
厌氧基础琼脂,英文名:Anaerobe Basal Agar,用途:用于厌氧菌尤其是拟杆菌的培养,需添加5-10%无菌脱纤维绵羊全血
MEA培养基(麦芽浸膏琼脂),英文名:MEA Medium,用途:用于真菌杀灭试验
肌醇测定培养基,英文名:Inositol Assay Broth,用途:用于肌醇的测定
3%NaCl MR-VP培养基,英文名:MR-VP Medium with 3%NaCl,用途:用于弧菌的MR、VP试验
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性:上皮样
CAL-51细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1793[H1793]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人层粘连蛋白(LN)ELISA试剂盒,英文名:Human LN ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠青少年2型血色素沉着症/幼年型血色病相关蛋白2(HFE2)ELISA试剂盒,英文名:HFE2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人肌肉果糖激酶(PFKM)ELISA试剂盒,英文名:Human PFKM ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)ELISA试剂盒,英文名:Mouse IL1RAP ELISA Kit,规格:48T/96T
人Agouti相关蛋白(AGRP)ELISA试剂盒,英文名:Human AGRP ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞培养基应用选择:选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考:(1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。(2)其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。(3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株多选 RPMI1640。(4)用多种培养基培养目的细胞,观察其生长状态,可以用生长曲线、集落形成率等指标判断,根据实验结果选择培养基,这是Z客观的方法,但比较繁琐。以下是部分细胞常用的培养条件:293人胚胎肾细胞培养条件:MEM,10%热灭活马血清;IMR-90人肺成纤维细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清和NEAA;W1-38人胚胎肺成纤维细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清;A549人肺癌上皮细胞培养条件:F-12K,10%胎牛血清;A431人表皮癌细胞培养条件:DMEM,10%胎牛血清;BHL-100人乳房上皮细胞培养条件:McCoy', 10%胎牛血清;BeWo人绒毛癌上皮滋养层细胞培养条件:F-12K,15%胎牛血清;Caco-2人结肠腺癌上皮细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清和NEAA;Chang人肝脏上皮细胞培养条件:BME,10%小牛血清;HCT-15人结肠直肠腺癌上皮细胞培养条件:RPMI-1640,10%胎牛血清;HEp-G2人肝细胞癌上皮细胞培养条件:MEM,10% 胎牛血清和NEAA;HEp-2人喉癌上皮细胞培养条件:MEM,10% 胎牛血清;或RPMI-1640,10%胎牛血清;HT-29人结肠腺癌上皮细胞培养条件:McCoy',10%胎牛血清;JEG-2人绒毛膜癌上皮细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清;KB人口腔癌上皮细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清和NEAA;Saos-2人骨肉瘤上皮细胞培养条件:McCoy',15%胎牛血清;WI-38人胚胎肺上皮细胞培养条件:BME,10%胎牛血清;WISH人羊膜上皮细胞培养条件:BME, 10%胎牛血清;HUVEC人脐带内皮细胞培养条件:F-12K,10%胎牛血清和肝素100ug/ml;IM-9人瘤成淋巴细胞培养条件:RPMI-1640,10%胎牛血清;Daudi人淋巴瘤细胞培养条件:RPMI-1640,10%胎牛血清;Clone M-3小鼠黑素瘤上皮细胞培养条件:F-10,15%马血清和2.5%胎牛血清;BHK-21仓鼠肾成纤维细胞培养条件:GMEM,10%胎牛血清或MEM,10%胎牛血清和NEAA;CHO-K1仓鼠卵巢上皮细胞培养条件:F-12,10%胎牛血清;IEC-6大鼠正常小肠上皮样培养条件:DMEM,5%胎牛血清,胰岛素0.1μg/ml;COS-1猴肾成纤维细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清;COS-3猴肾成纤维细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清;COS-7猴非洲绿猴肾成纤维细胞培养条件:MEM,10%胎牛血清
真杆菌选择性琼脂基础(ESA),英文名:Eubacterium Selective Agar,用途:用于真杆菌的选择性分离
抗生素培养基F(PH6.1),英文名:Medium F(PH6.1),用途:用于抗生素鉴定
念珠菌显色培养基,英文名:Candida Chromogenic Medium,用途:用于念珠菌快速检测
抗生素培养基C(PH7.0),英文名:Medium C(PH7.0),用途:用于抗生素检测
盐还原菌培养基N,英文名:Postgate’s Medium N for Sulfate Reducers,用途:用于脱微生物的鉴定、培养与保存,每100ml添加1支60%乳酸钠溶液