Ca9-22人口腔上皮癌细胞系 复苏技术经验丰富

Ca9-22人口腔上皮癌细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：详见相关文献介绍
JEG3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SU-DHL-8细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BJ细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HB611细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2，其中r为离心机转轴ZX与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
SW620[SW-620]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
OVHM细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CEMO-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SJRH30细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：5-1：10传代，3-4天换液1次。
ACC-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PIEC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
A-427[A427]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
T-CEM细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KMS11细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Z310细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MT-4细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样；圆形；细胞传代方法：1：2传代
HepG2[HepG2]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
EG琼脂培养基，英文名：EG Agar Medium，用途：用于厌氧菌计数，每95ml培养基需添加5ml无菌马血
淀粉铵琼脂，英文名：Starch Ammonium Sulphate Agar(Krassilnikov, 1950)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
CVT琼脂培养基，英文名：Crystal Violet Tetrazolium Chloride Agar Medium，用途：用于乳及乳制品中嗜低温细菌总数的测定
月桂基盐胰蛋白胨肉汤(LST)，英文名：Lauryl Sulfate Tryptose Broth，用途：用于大肠杆菌和大肠菌群的测定
SCDLP液体培养基基础，英文名：Soya Casein Digest Lecithin Polysorbate Broth Base，用途：用于样品的增菌,每升培养基添加1支吐温80
番茄汁肉汤，英文名：Tomato Juice Broth，用途：用于酵母菌和乳酸菌等耐酸菌的培养
CCD-841 CoTr细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1299细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；多角形；细胞传代方法：1：2传代；3天传代一次。
BIN-S1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MB49细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
COLO-678细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 863.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2-1：4传代；每周换液2-3次。
Granta519细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CTLL-2[CTLL2]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-70℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml；培养细胞12到24小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约80x离心2到3分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约1012个，可以区分为200多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
C3H/10T1/2,Clone 8细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人二嘧啶酶样2(DPYSL-2)ELISA试剂盒，英文名：Human DPYSL-2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人白介素32(IL-32)ELISA试剂盒，英文名：Human IL-32 ELISA Kit，规格：48T/96T
人糖原化酶同工酶MM(GP-MM)ELISA试剂盒，英文名：Human GP-MM ELISA Kit，规格：48T/96T
人斜方蛋白1(RHOM1)ELISA试剂盒，英文名：Human RHOM1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人Zeste人12同源物1YZ因子2(SUZ12)ELISA试剂盒，英文名：Human SUZ12 ELISA Kit，规格：48T/96T
人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)ELISA试剂盒，英文名：Human α-SCA ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒，英文名：NSE ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠染色质区解旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CHD5 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse ICAM-2 ELISA Kit，规格：48T/96T
尿素琼脂基础(pH7.2)，英文名：Urease Agar Base，用途：用于细菌尿素酶试验,每100ml添加1支40%尿素溶液
UM液体培养基，英文名：Uchimiya and Miurashige Fluid Medium，用途：用于诱导愈伤组织形成
Elliker肉汤，英文名：Elliker Broth，用途：用于乳酸杆菌、乳酸链球菌的培养
赫氏琼脂，英文名：Hiss Agar，用途：用于鼠疫杆菌的分离培养
CNE2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
NS-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2传代，3天内可长满。
SKOV3细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满
细胞生长特性：贴壁生长
半固体营养琼脂，英文名：Semisolid Nutrient Agar，用途：用于细菌生化鉴定试验 SN 2552.5
脑心浸出液肉汤(BHI)，英文名：Brain Heart Infusion Broth，用途：用于金黄色葡萄球菌培养（GB4789）
BBM培养基，英文名：Bold’s Basal Medium，用途：用于藻类尤其是绿藻的培养
Mueller-Hinton琼脂/MH琼脂，英文名：Mueller-Hinton Agar，用途：用于细菌药敏试验
胰酪胨大豆琼脂培养基(TSA)，英文名：Soybean-Casein Digest Agar，用途：用于YJ剂效力检查（ZG药典2010）
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：上皮细胞
SNU216细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SW 982 [SW-982,SW982]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人卷曲同源物1(FZD1)ELISA试剂盒，英文名：Human FZD1 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA试剂盒，英文名：Mouse FⅨ ELISA Kit，规格：48T/96T
人组织蛋白酶A(CTSA)ELISA试剂盒，英文名：Human CTSA ELISA Kit，规格：48T/96T
人核因子κBYZ因子α(IκBα)ELISA试剂盒，英文名：Human IκBα ELISA Kit，规格：48T/96T
人Slingshot同源物1(SSH1)ELISA试剂盒，英文名：Human SSH1 ELISA Kit，规格：48T/96T
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系，大部分的细胞都是要成片生长的，尤其是对于贴壁细胞，单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话，传代后细胞是不能贴壁的，这样抱团的细胞就会死亡。所以，消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态，这个啊是非常考究你的功夫的！细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个，因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开，受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊，这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来，又不能太过，一吹就整片脱落，要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了，一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞，你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样，用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话，可以用PBS来洗，洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的，对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清，防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先，是很关键的一点。先补充这么多，还会后续更新。再补充一点：传代时PBS洗是很重要的一步，Z近发现，用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟，有些需要更长的时间，等到细胞一个个分离开来的时候，就可以直接吹打下来，但是和胰酶消化一样，要控制好时间，不能时间太过了，要不然损伤细胞，细胞不容易成活，状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候，或者临时没有胰酶了，可以选用此方法。不过一定要试试，看是否适合你的细胞。
25%甘油盐琼脂基础(G25N)，英文名：25% Glycerol Nitrate Agar Base，用途：用于霉菌的分离和培养，需添加25%甘油
哥伦比亚血琼脂基础，英文名：Columbia Blood Agar Base，用途：广泛用于细菌,尤其是苛养菌的培养,添加无菌脱纤维绵羊全血
APT肉汤，英文名：APT Broth，用途：用于异质发酵乳酸杆菌和其它需高含量胺素菌的培养
Todd-Hewitt琼脂，英文名：Todd-Hewitt Agar，用途：用于链球菌培养,选择性添加红霉素等抗生素用于链球菌分离
毛藓菌琼脂3号，英文名：Trichophyton Agar #3，用途：用于毛藓菌属的鉴定