Kasumi-6急性髓系细胞白血病细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料:详见相关文献介绍
SHG44细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HF-91细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H1568细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3-1:6传代;每周换液2-3次。
DMS 114细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2次。
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因?研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,原因比较复杂,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳;血清使用错误或血清的品质不佳;解冻过程错误;冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心;悬浑细胞误认为死细胞;培养温度使用错误;细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来,其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞,其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟,转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r为离心机转轴ZX与离心套管底部内壁的距离;rpm为离心机每分钟的转数;RCF(relative centrifugal force)为相对离心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
HS766T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
FRH-0201细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KMS11细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW579[SW 579,SW-579]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCTC1469细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
3T3 clone A31细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SU-DHL-16细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW 1271[SW-1271,SW1271]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SCC-9细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
CW-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
JKT-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
VM-CUB1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:每周2-3次。
明胶培养基(营养明胶培养基),英文名:Gelatin Medium,用途:用于细菌的明胶生化试验
GYCA培养基,英文名:Glucose Yeast extract Calcium carbonate Medium,用途:用于甘蔗流胶病菌检验
甘露醇卵黄培养基基础,英文名:Egg-Yolk Manitol Salt Medium Base,用途:用于金黄色葡萄球菌计数,每100ml中添加2支50%卵黄盐水悬液
淋病奈瑟菌琼脂培养基基础,英文名:N.gonorrhoeae Agar Medium Base,用途:用于淋病奈瑟菌的分离与培养,需添加7%无菌脱纤维绵羊全血
CDC厌氧菌琼脂基础,英文名:CDC Anaerobe Agar Base,用途:用于厌氧菌的分离培养,每100ml添加化血红素溶液和维生素K1溶液各1支,添加5-10%羊血(无菌脱纤维绵羊全血)
改良马丁琼脂培养基,英文名:Martin Agar Medium,Modified,用途:用于真菌培养、无菌检查
SUP-M2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H82细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:上皮细胞;细胞传代方法:1:2—1:5传代,每周换液2-3次
GC-2 spd细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Hs 746T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
NUGC-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:6传代
A-427[A427]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HuFACs-11细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
TE671细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代的一般方法:开始细胞传代前,仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全:一般主要有:细胞(单层细胞,镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液(1万单位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1)、细胞吹打管(20ml)(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱;操作步骤:镜检细胞,挑选生长状态良好,细胞界限清晰,具有立体感,形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内,加入灭活小牛血清10m1,庆大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸钠溶液3ml。(仅供一般参考)。消化细胞;先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次,每次10m1,弃去洗液,向细胞瓶内加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,细胞瓶平放,使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞,按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中,再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装,然后补加至所需培养量。加塞,置于37±1℃孵箱培养。约2~4天成片。(由细胞接种浓度决定);填写传代记录。
HuAECs-11细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)ELISA试剂盒,英文名:Mouse P450scc ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠融合蛋白(FUS)ELISA试剂盒,英文名:Mouse FUS ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒,英文名:sLR ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠凝溶胶蛋白(GS)ELISA试剂盒,英文名:Mouse GS ELISA Kit,规格:48T/96T
人巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP1α)ELISA试剂盒,英文名:Human MIP1α ELISA Kit,规格:48T/96T
人磷脂转运蛋白(PLTP)ELISA试剂盒,英文名:Human PLTP ELISA Kit,规格:48T/96T
人MAX交互子1(MXI1)ELISA试剂盒,英文名:Human MXI1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人肝素结合性表皮生长因子(HBEGF)ELISA试剂盒,英文名:Human HBEGF ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt)ELISA试剂盒,英文名:Mouse Hpt ELISA Kit,规格:48T/96T
营养琼脂(pH6.0),英文名:Nutrient Agar, pH6.0,用途:用于轻度酸性环境微生物的培养
乳糖发酵培养基/乳糖复发酵培养基,英文名:Lactose Broth,用途:乳糖复发酵培养基,用于大肠菌群的测定
EB肉汤增菌液基础,英文名:EB Enrichment Broth,用途:用于李斯特氏菌的选择性增菌,每225ml添加2支啶酮酸溶液
苏通液体培养基基础,英文名:Sauton Broth Medium Base,用途:用于结核杆菌的增菌培养和卡介苗的制备
HMC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
C8166-CD4细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:淋巴母细胞样;细胞传代方法:2-3x10-5细胞/ml
NCI-H596[H596]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:悬浮生长
抗生素培养基4号,英文名:Medium 4(Yeast Beef Agar),用途:用于微生物方法测定抗生素效价
溶菌酶多粘菌素琼脂基础,英文名:Lysozyme Polymyxin Agar Base,用途:用于炭疽杆菌分离培养, 每100ml添加多粘菌素B溶液、0.1%溶菌酶溶液各1支
SOB培养基,英文名:SOB Medium,用途:用于大肠杆菌分子遗传学菌株的培养
韦荣氏球菌培养基基础,英文名:Veillonella Medium Base,用途:用于韦荣氏球菌的培养,每100ml添加2支60%乳酸钠溶液
PW(蛋白胨水),英文名:Peptone Water,用途:用于样品制备
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性:成髓细胞
THLE-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CCL13细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人尾加压素2受体(UTS2R)ELISA试剂盒,英文名:Human UTS2R ELISA Kit,规格:48T/96T
人二嘧啶酶(DPYS)ELISA试剂盒,英文名:Human DPYS ELISA Kit,规格:48T/96T
人L-天冬酸脱酶(ASPDH)ELISA试剂盒,英文名:Human ASPDH ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠微粒体前列腺素E合酶(PTGES)ELISA试剂盒,英文名:PTGES ELISA Kit,规格:48T/96T
人骨特异性碱性酶(BAP)ELISA试剂盒,英文名:Human BAP ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞消化过程总结:其实绝大部分细胞消化的时候是只要用胰酶润洗一遍即可,吸去胰酶后,残留的那些无法计算体积的附着在细胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足够消化细胞(绝大部分1min不到)。对于这些细胞原则上不要用胰酶孵育细胞,连续这样传代,对细胞伤害很大。简单的程序是PBS润洗吸去,胰酶润洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是细胞全部成间隔分布很离散的单个圆形才算消化好了,一般你肉眼观察贴壁细胞层,只要能移动了,多半呈沙壮移动,其实已经可以了,很多人喜欢把细胞消化或者吹打成完全分离细胞,这是没有必要的。一般能移动了,说明细胞与培养基质材料的附着已经消失了,细胞之间的附着也已经消失了,细胞已经独立分布了(虽然没有呈现很广的离散分布)。这个时候应该停止消化,不要等到看到镜下所有细胞都分离得非常好,间隙很大,才停止。细胞就是完全成单个细胞悬液,之后在贴壁的过程中仍然会聚集,这个是贴壁培养的细胞,尤其是肿瘤细胞的一个特性,无论死活的细胞都是如此,你可以尝试,准备的单个细胞悬液,贴壁后观察细胞,仍然是几个几个细胞聚集在一起。一些悬浮培养细胞也是如此,容易聚集,不要去尝试过几个小时就拿出来吹打成单细胞悬液(不要笑,这个是初养悬浮细胞的人常犯的错误,以为悬浮培养就是一个一个分开)。细胞只要能从基质上脱离下来,这个时候即使是成片的(比如Calu-3细胞),吹打不超过20次后(一般10次即可),成小规模聚集(10个细胞左右),是正常的,不要试图再去延长消化时间,或者像有的同学那样吹打1h,等待单细胞悬液出现。比较难消化的细胞(润洗方法5min还不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,这样的细胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次Z多加入500ul,就足够了,一般我加300ul。即使这样难消化的细胞,一般不超过5min,即可见细胞成片移动,就应该停止消化。一些正常细胞也会有难消化的时候,比如tsDC细胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙状移动。
赫氏增菌液,英文名:Hiss Enrichment Broth,用途:用于鼠疫杆菌的培养
酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD),英文名:Yeast Extract Peptone Dextrose Agar,用途:用于真菌计数
乳糖-明胶培养基,英文名:Lactose-Gelatin Medium,用途:用于产气荚膜梭菌的乳糖、明胶生化试验
毛藓菌琼脂3号,英文名:Trichophyton Agar #3,用途:用于毛藓菌属的鉴定
SB肉汤,英文名:Super Broth,用途:用于基因工程大肠杆菌的高密度发酵