KG-1急性髓系细胞白血病细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料:详见相关文献介绍
SH-77细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
L Wnt 3A细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:4-1:10传代;2-3天换液1次。
HCMEC(BL12-H)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CEMO-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞接收后的操作流程与注意事项:1)如果细胞为贴壁细胞,而收到时呈悬浮或者部分悬浮的状态,请将悬浮的细胞即时离心,加15%血清的完全培养基到新的培养皿/瓶继续培养3天;同时原培养瓶中剩下的贴壁细胞更换为15%血清的完全培养基培养3天。3天后若原瓶或者新瓶中的细胞都没有出现增值而是继续脱落死亡,请及时联系实验室技术人员会跟进解决;2)贴壁细胞生长缓慢;适当提高血清浓度(不能超过20%),或可根据该细胞生长密度,考虑胰酶消化后,转移到新的培养瓶继续培养;3)生长不均:贴壁细胞若出现分布不均,成岛状生长,可将细胞进行消化,重悬打散细胞,加入新鲜培养基进行培养。
786-O[786-0]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW579[SW 579,SW-579]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KNS-42细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:多边形;细胞传代方法:1:2传代
HLMVEC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MKN28细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RPMI-8402细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H2405[H2405]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GM12878细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW 982细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CMT-93细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SNU878细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RPMI8226细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
哥伦比亚-MUG琼脂培养基,英文名:Columbia-MUG Agar Medium,用途:于大肠杆菌荧光检测
黄原胶液体发酵培养基(葡萄糖),英文名:Xanthan gum Fluid Medium with Dextrose,用途:以葡萄糖为碳源,用于黄原胶生产
Hayflick培养基,英文名:Hayflick Medium,用途:需添加马血清、青霉素
DTA培养基,英文名:DTA Medium,用途:用于乳与乳制品中嗜热需氧芽孢数的测定
含铁牛奶培养基(含铁牛乳培养基),英文名:Iron Milk Medium,用途:用于产气荚膜梭菌暴烈发酵试验
G-401细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:6传代,每周2-3次。
P3X63Ag8.653细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Z138细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
PG-LH7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
L5178Y细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HSAS3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HSC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HUVEC-C[HUVEC]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞复苏基本方法:1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。收到T25 flask细胞时,处理方式为:在寄送过程中,为避免起泡造成细胞脱落死亡,T25 flask均加满培养基。请检查flask外观,并于显微镜下观察细胞生长状况和有无污染现象,若有任何问题,不要打开盖子,请立即通知细胞实验室。将原封之T25 flask静置于37°C,5%CO2培养箱中,使细胞回温至37°C,并让运送过程中少数脱落的细胞可再附着生长。隔天后,于无菌操作箱内取出flask内之培养基(取出之培养基可以再使用),仅留约5-10ml培养基于flask内,依一般培养方式再将细胞置入培养箱中,或细胞已长满盘,则将细胞做传代培养。
HCFB细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人黑色素瘤关联酸软骨素蛋白聚糖(MCSP)ELISA试剂盒,英文名:Human MCSP ELISA Kit,规格:48T/96T
人丝酸/苏酸激酶25(STK25)ELISA试剂盒,英文名:Human STK25 ELISA Kit,规格:48T/96T
人赖酸tRNA合成酶(KARS)ELISA试剂盒,英文名:Human KARS ELISA Kit,规格:48T/96T
人Ⅰ型胶原C端肽(ICTP)ELISA试剂盒,英文名:Human ICTP ELISA Kit,规格:48T/96T
人精酸酶Ⅱ(Arg2)ELISA试剂盒,英文名:Human Arg2 ELISA Kit,规格:48T/96T
人湿结合蛋白(RTBDN)ELISA试剂盒,英文名:Human RTBDN ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠呼吸道合胞病毒IgA(RSV-IgA)ELISA试剂盒,英文名:RSV-IgA ELISA Kit,规格:48T/96T
人载脂蛋白C3(Apo C3)ELISA试剂盒,英文名:Human Apo C3 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠抗角蛋白抗体(AKA)ELISA试剂盒,英文名:AKA ELISA Kit,规格:48T/96T
TCBS琼脂,英文名:Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrous Agar,用途:用于副溶血性弧菌选择性分离
高盐察氏培养基,英文名:Salt Czapek Dox Medium,用途:用于霉菌总数的测定
沙氏脑心浸液琼脂基础,英文名:Sabouraud Brain Heart Infusion Agar Base,用途:用于真菌的选择性分离,每100ml培养基中添加1支霉素溶液
支原体固体培养基,英文名:Mycoplasma Agar Medium Base,用途:需添加马血清、MEM 培养液、青霉素
NCI-H1569细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MDCK(NBL-2)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;多角;细胞传代方法:1:2-1:6传代;2-3天换液1次。
HTB-9细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:悬浮生长
黄原胶液体发酵培养基(葡萄糖),英文名:Xanthan gum Fluid Medium with Dextrose,用途:以葡萄糖为碳源,用于黄原胶生产
Hayflick培养基,英文名:Hayflick Medium,用途:需添加马血清、青霉素
DTA培养基,英文名:DTA Medium,用途:用于乳与乳制品中嗜热需氧芽孢数的测定
含铁牛奶培养基(含铁牛乳培养基),英文名:Iron Milk Medium,用途:用于产气荚膜梭菌暴烈发酵试验
TCBS琼脂,英文名:Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrous Agar,用途:用于副溶血性弧菌选择性分离
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性:原粒细胞
ES-2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一次
HCC38细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2—1:4传代,每周换液2—3次
人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)ELISA试剂盒,英文名:Human CYP21A ELISA Kit,规格:48T/96T
人酪酸酶(TYR)ELISA试剂盒,英文名:Human TYR ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠转化生长因子α(TGF-α)ELISA试剂盒,英文名:Mouse TGF-α ELISA Kit,规格:48T/96T
人抗角蛋白丝聚集素/丝集蛋白抗体(AFA)ELISA试剂盒,英文名:Human AFA ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA试剂盒,英文名:Mouse TAP ELISA Kit,规格:48T/96T
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(亮酸/色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
哥伦比亚-MUG琼脂培养基,英文名:Columbia-MUG Agar Medium,用途:于大肠杆菌荧光检测
高盐察氏培养基,英文名:Salt Czapek Dox Medium,用途:用于霉菌总数的测定
沙氏脑心浸液琼脂基础,英文名:Sabouraud Brain Heart Infusion Agar Base,用途:用于真菌的选择性分离,每100ml培养基中添加1支霉素溶液
支原体固体培养基,英文名:Mycoplasma Agar Medium Base,用途:需添加马血清、MEM 培养液、青霉素