SK-N-FI人脑神经母细胞瘤细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料:详见相关文献介绍
IEC-18细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
KYSR450细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MuM-2C细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
5637(HTB-9)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞冻存的步骤:1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10分钟);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5×106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。;如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)Z好;或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,Z好取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。
HT29细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
ALVA细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW480细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代,1-2天换液一次
3T3NIH细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KBM7细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KYSE30细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
A375细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
LIPF155C细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
ACT-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
AtT20细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SK-RC-52细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
L-cell细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:1:4传代,每周换液2次
史娃兹鉴别培养基(SDM),英文名:Schwartz Differential Medium,用途:用于啤酒野生酵母的检验
抗生素培养基F(PH6.0),英文名:Medium F(PH6.0),用途:用于抗生素检测
胰酪大豆胨液体培养基/大豆酪蛋白肉汤培养基,英文名:Fluid Soybean-Casein Digest Broth,用途:用于无菌检查、细菌培养及YJ剂效力检查
缓冲葡萄糖蛋白胨水培养基(MR-VP培养基),英文名:MR-VP Medium,用途:用于细菌的MR、VP试验
胰蛋白胨酵母浸粉肉汤,英文名:ISP Medium 1(Tryptone Yeast Extract Broth,用途:用于链霉菌属的培养鉴定
Tergitol-7琼脂,英文名:Tergitol-7 Agar,用途:用于大肠菌群鉴定,每100ml添加2支0.05%TTC溶液
DOK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
A20[A-20]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
DITNC1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维母细胞样;细胞传代方法:1:2传代
Lewis细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
DoTc2-4510细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2—1:3传代,每周换液2—3次
NCI-H2196细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3-1:6传代;每周换液2次。
T-47D细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H838[H838]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞的衰老:体外细胞培养实验证明:成纤维细胞:来自胎儿传代50次后衰老死亡,来自成人传代20次后衰老死亡(与具体年龄有关;来自小鼠传代14--28次后衰老死亡,来自乌龟传代90--125次后衰老死亡。细胞衰老过程中会发生一系列的变化,包括:蛋白质合成速度降低,已有蛋白质结构变化,特异蛋白质成份出现;同时,细胞核,线粒体,膜系统、骨架系统等都有结构、功能的改变。细胞衰老原因,尚无定论,出现过好几种理论与假说,其中得到较广泛认可的是“自由基损伤假说”。细胞凋亡:细胞的死亡是个体存活的正常现象,常见的细胞死亡形式有3种:坏死、凋亡和细胞毒性。多细胞生物的生命活动中,因为环境因素的突然变化或病原物的入侵,导致一部分细胞死去,称为细胞的病理死亡,或细胞坏死。坏死是细胞暴露于严重的物理或化学刺激时导致的细胞死亡;细胞毒性是由细胞或者化学物质引起的单纯的细胞杀伤事件,不依赖于其它两种细胞死亡机理,如杀伤T细胞的细胞毒性作用。还有一种情况,一部分细胞的死亡是生物个体正常生命活动(代谢、生长、发育、分化)的一个必要部分;似乎带有“牺牲局部,保全整体”的意味。这种情况下的细胞死亡,明显地受遗传控制,称为细胞凋亡。凋亡(Apoptosis)则是程序性的、正常的细胞死亡,是机体清除无用的或者不想要的细胞的手段。它与细胞坏死是两个截然不同的过程,无论从形态学、生物学还是生化的特征来说,都有明显的区别。细胞凋亡现象普遍存在于生物界。细胞凋亡与细胞增殖、分化和衰老起着互补与平衡的作用,在多细胞动物的发育、形态建成与维持中扮演至关重要的角色。作为细胞的一种基本生命现象,凋亡失控的结果将是可怕的:凋亡不足时,易发生癌变、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡过量则可能产生获得性免疫缺陷综合征(HIV)、重症肝炎与退行性神经疾病,如老年性痴呆症(Alzheimer"s disease)、帕金森氏症(Parkinson"s disease)。因此研究细胞凋亡及其机理具有重要的理论和实践意义。
NCI-H220[H220]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠CD30分子(CD30)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CD30 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠隐花色素1(CRY1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse CRY1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠含血管性血友病因子A域蛋白1(vWA1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse vWA1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠转录激活因子5(ATF5)ELISA试剂盒,英文名:Mouse ATF5 ELISA Kit,规格:48T/96T
人核孔蛋白133kda(NUP133)ELISA试剂盒,英文名:Human NUP133 ELISA Kit,规格:48T/96T
人杀菌肽B(CecB)ELISA试剂盒,英文名:Human CecB ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒,英文名:EPO ELISA Kit,规格:48T/96T
人CD5分子(CD5)ELISA试剂盒,英文名:Human CD5 ELISA Kit,规格:48T/96T
人膜联蛋白A1(ANXA1)ELISA试剂盒,英文名:Human ANXA1 ELISA Kit,规格:48T/96T
肝小牛肉琼脂,英文名:Liver Veal Agar,用途:用于罐藏食品的无菌检查
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(色酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Trypt,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB)/(mTSB+N基础),英文名:mTSB Broth with Novobiocin Base,用途:用于O157菌选择性增菌,每225ml中添加1支新生霉素储备液组成含新生霉素的改良胰蛋白胨大豆肉汤(mTSB+N)
LEB基础(FDA标准),英文名:Listeria Enrichment Broth Base,用途:用于李斯特氏菌的选择性增菌,每225ml培养基添加啶酮酸溶液1支
NCI-H1650[H-1650,H1650]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
U-2OS[U2OS,U2-OS,U-2OS]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MPVECs细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁生长
甘油甘酸琼脂基础,英文名:Glycerol glycine agar (Okazaki and Okami, 1976),用途:用于链霉菌属的培养鉴定,每100ml添加2支甘油
TGYA培养基,英文名:Tryptone Glucose Yeast Agar,用途:用于菌落总数测定 美国药典
胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉汤(TPGYT基础),英文名:TPGY Broth(TPGYT Base),用途:用于肉毒梭菌增菌培养,添加1:250胰蛋白酶配制成TPGYT
碎肉葡萄糖肉汤基础,英文名:Chopped Meat Glucose(CMG),用途:用于厌氧菌特别是专性厌氧菌的培养,含VK ,需添加庖肉牛肉粒
燕麦琼脂,英文名:Oatmeal Agar,用途:用于真菌的培养
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性:上皮样
SNU-C2B细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H2066[H2066]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
小鼠亮酸丰富α2-糖蛋白1(LRG1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse LRG1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠心型脂肪酸结合蛋白(HFABP)ELISA试剂盒,英文名:Mouse HFABP ELISA Kit,规格:48T/96T
人热休克蛋白47(HSP47)ELISA试剂盒,英文名:Human HSP47 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠5脂加氧酶(5-LO)ELISA试剂盒,英文名:5-LO ELISA Kit,规格:48T/96T
人骨调蛋白(OMD)ELISA试剂盒,英文名:Human OMD ELISA Kit,规格:48T/96T
如何把细胞养的形态更好更漂亮。1.不同的细胞,喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同,还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。2.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:首先,倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞我们只吹打,不消化的);其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。3.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。(可能也是竞争很大,有优胜劣汰吧。呵呵。)对于生长速度快的细胞,易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。4.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞,在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态,比玻璃瓶会好,对于生长速度慢的细胞,玻璃瓶则会更好。同样,对于同一种细胞,在其生长速度慢的时候,会好一点,比如刚刚复苏的时候,或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候,玻璃瓶则相对会好一点。
普通肉汤培养基,英文名:Routine Broth Medium,用途:用于金黄色葡萄球菌及其他细菌的增菌
NAC琼脂培养基,英文名:Nalidixic Acid Cetrimide Agar,用途:用于微生态活菌制品中铜绿假单胞菌的分离培养
化钠三糖铁琼脂,英文名:NaCl TSI Agar,用途:含1.5%NaCl,用于弧菌生化试验
LEB基础(FDA标准),英文名:Listeria Enrichment Broth Base,用途:用于李斯特氏菌的选择性增菌,每225ml培养基添加啶酮酸溶液1支
假单胞菌琼脂培养基P基础,英文名:Pseudomonas Agar for Detection of Pyocyanin,用途:用于假单胞菌绿脓菌素测定,每100ml添加1ml甘油(甘油)