NCI-H1694人小细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富

NCI-H1694人小细胞肺癌细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：详见相关文献介绍
JOSK-M细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
ACT-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
LTEP sm细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
GIST430细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
购买的细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，原因比较复杂，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳；血清使用错误或血清的品质不佳；解冻过程错误；冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心；悬浑细胞误认为死细胞；培养温度使用错误；细胞置于-80℃太久等。建议严格参照ATCC的标准操作规程进行细胞复苏、冻存等工作。欲将一般动物细胞离心下来，其离心速率应为多少转速?欲回收动物细胞，其离心速率一般为300×g(约1OOOrpm),5-10分钟，转速过高或离心时间过长都将造成细胞死亡。合适的离心转速是根据相对离心力决定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2，其中r为离心机转轴ZX与离心套管底部内壁的距离；rpm为离心机每分钟的转数；RCF(relative centrifugal force)为相对离心力，以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍数来表示单位。
HuH-7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
SF-295细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SCC-4细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
T6-Swiss albino细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TR146细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SRS-82细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs888Lu细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长　；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
U-937细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SRA01/04细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
BCP-1细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：维持细胞浓度在2×105/ml-1×106/ml；根据细胞浓度每2-3天补液1次。
BCECs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MOPC细胞专业复苏；细胞生长特性：半贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：3-4天换液1次。
DPD培养基，英文名：DPD Medium，用途：用于原生质体的培养
麦芽汁琼脂基础，英文名：Malt Extract Agar Base，用途：含1.275%麦芽糖,不含霉素,每升培养基添加2.35g甘油
抗生素培养基A(PH7.9)，英文名：Medium A（PH7.9），用途：用于抗生素检测
淀粉铵琼脂，英文名：Starch Ammonium Sulphate Agar(Krassilnikov, 1950)，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
Bennett琼脂，英文名：Bennett Agar，用途：用于需氧放线菌孢子的产生
改良的酵母浸汁-孟加拉红肉汤，英文名：Modiffied Yeast Extract-Rose Benga Broth，用途：用于小肠结肠炎耶尔森氏菌增菌
Hela-Ap-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
melan-a细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
PF-382细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：1：2传代
IPI-2I细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
HCE-2 [50.B1]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HUMSC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Hs 611.T细胞专业复苏；细胞生长特性：混合型；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：1：2传代；每周换液2-3次。
SW403细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2—1：6传代，每周换液2-3次
血清必须贮存于–20～-70℃，若存放于4℃，请勿超过一个月。如果一次无法用完一瓶，可将40～45ml分装于无菌50ml离心管中，由于血清结冻时体积会增加约10%，必须预留此膨胀体积之空间，否则易发生污染或容器冻裂之情形。一般厂商提供之血清为无菌，不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物，则可将血清加入培养基内一起过滤，勿直接过滤血清。瓶装(500ml)血清解冻步骤(逐步解冻法)：-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天，至室温下全溶后再分装，一般以50ml无菌离心管可分装40～45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沈淀。勿将血清置于37℃太久，若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定之成份亦会因此受到破坏，而影响血清之品质。血清凝絮物：发生之原因有许多种，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 变性及解冻后血清中存在之血纤维蛋白(fibrin) 造成，这些凝絮沈淀物不会影响血清本身之品质。若欲减少这些凝絮沈淀物，可用离心3000rpm，5min去除，或离心后上清液可以加入培养基中一起过滤。不建议用过滤步骤去除这些凝絮沈淀物，因为会阻塞过滤膜。显微镜下观察之“小黑点”：通常经过热处理之血清，沈淀物的形成会显著的增多。有些沈淀物在显微镜下观察像是“小黑点”，常会误认为血清遭受污染，而将血清放在37℃中欲培养此“微生物”，但在37℃环境下，又会使此沈淀物增多，更会误认为微生物之增殖，但以培养细菌之培养基检测，又没有污染。一般而言，此小黑点应不会影响细胞之生长，但若怀疑此血清之品质，应立即停用，更换另一批号的血清。
SW626[SW626,SW-626]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
小鼠肝配蛋白B2(EFNB2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse EFNB2 ELISA Kit，规格：48T/96T
人蛋白激酶C-ο(PKCi)ELISA试剂盒，英文名：Human PKCi ELISA Kit，规格：48T/96T
人补体因子H(CFH)ELISA试剂盒，英文名：Human CFH ELISA Kit，规格：48T/96T
人卵巢滤泡激素(FLCN)ELISA试剂盒，英文名：Human FLCN ELISA Kit，规格：48T/96T
人高尔基糖蛋白1(GLG1)ELISA试剂盒，英文名：Human GLG1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠巨肌酸激酶(Macro-CK)ELISA试剂盒，英文名：Macro-CK ELISA Kit，规格：48T/96T
人血管内皮生长因子121(VEGF121)ELISA试剂盒，英文名：Human VEGF121 ELISA Kit，规格：48T/96T
人转化生长因子β诱导蛋白(TGFbI)ELISA试剂盒，英文名：Human TGFbI ELISA Kit，规格：48T/96T
人Hedgehog相互作用蛋白(HHIP)ELISA试剂盒，英文名：Human HHIP ELISA Kit，规格：48T/96T
6.5%化钠葡萄糖琼脂，英文名：6.5%Sodium Dextrose Agar，用途：用于肠球菌确证和培养
GC琼脂基础，英文名：GC Agar Base，用途：用于致病性奈瑟氏菌的分离
BCYE-Cys琼脂基础，英文名：Buffered Charcoal Yeast Extract Agar without L-cys，用途：用于军团菌选择性分离，每100ml添加1支可溶性焦铁
Wilkins-Chalgren厌氧菌肉汤，英文名：Wilkins-Chalgren Anaerobe Broth，用途：用于厌氧菌的培养和药敏试验
SW1990细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
GAK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：8.4 x 10^4 cells / sq.cm.
LLC-MK2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：悬浮生长
改良高氏合成一号液体培养基，英文名：Gauze’s Synthetic Broth Medium,Modified，用途：用于放线菌的培养
TGC液体培养基，英文名：TGC Medium without Indicator, Liquid，用途：用于无菌检验
LB肉汤(Miller)，英文名：LB Broth,Miller，用途：用于分子生物学中大肠杆菌的培养
胰化大豆镁琼脂(TSAM)，英文名：TSAM Agar，用途：用于大肠菌群滤膜法检测
酵母基酸缺陷型合成琼脂培养基(色酸缺陷)，英文名：Yeast Synthetic Drop-out Agar Medium without Trypt，用途：用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：聚团悬浮
EFM-192C细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Ca9-22细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人微管蛋白β1(TUBβ1)ELISA试剂盒，英文名：Human TUBβ1 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠抗单核细胞抗体(AMA)ELISA试剂盒，英文名：AMA ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠血清淀粉样蛋白A3(SAA3)ELISA试剂盒，英文名：Mouse SAA3 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠骨骼肌肌动蛋白α1(ACTα1)ELISA试剂盒，英文名：Mouse ACTα1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人沉默调节蛋白6(SIRT6)ELISA试剂盒，英文名：Human SIRT6 ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞冻存基本方法：1．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞24小时前换液一次。2．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达5×10(6)/ml，离心去上清，吸入离心管中。3．冻存液：先用培养液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。4．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加1.5毫升细胞悬液。5．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小Pai，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。细胞株(系)的使用，为医学研究和测试工作带来了极大的方便。但细胞的传代是有限制的，长期连续传代的细胞，不仅消耗大量的人力和物力，而且细胞的生长与形态等会有一定退变或转化，因而细胞失去原有的遗传特性，有时还会由于细胞污染而造成传代中断，种子丢失。因此，在实际工作中常需冻存一定数量的细胞，以备替换使用。细胞冷冻与复苏是细胞培养 室的常规工作和通用技术。
KF链球菌肉汤，英文名：KF Streptococcus Broth，用途：用于肠球菌、链球菌计数和检验，视须要每100ml培养基添加1支1%TTC溶液
YSG琼脂培养基基础，英文名：YSG Agar Medium Base，用途：用于耐热耐酸菌的检测,需使用1N或调节pH
营养肉汤(NB)，英文名：Nutrient Broth，用途：用于细菌的培养和增菌
石蕊牛乳培养基，英文名：Litmus Milk Medium，用途：用于测定细菌对牛乳的发酵
阿须贝氏葡萄糖培养基，英文名：Ashby’S Glucose Medium，用途：用于固氮菌的培养