SK-N-AS人脑神经母细胞瘤细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料:详见相关文献介绍
KGN细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
A172细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
CAL-12T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
QBC939细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
为什么培养的细胞要及时传代?体外培养的细胞大多具有生长接触YZ的特性,也就是说当一个细胞被其他细胞包围的时候,它就会停止生长,及时传代后,细胞的生长得以继续。培养细胞生长减慢的原因在哪些?其解决办法有哪些?可能的原因有:更换了不同的培养液或血清;培养液中一些细胞生长必需成分如谷眈肢或生长因子等耗尽或缺乏或己被破坏;培养物中有少量细菌或真菌污染;试剂保存不当;比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清等,找出其它可能的原因。解决办法:增加起始培养细胞浓度;让细胞逐渐适应新培养液;换入新鲜配制培养液;补加谷酷肢或生长因子等;用无抗生素培养液培养,如发现污染,去弃培养物,或用抗生素CJ;血清需保存在5℃到20℃; 培养液需在2-8℃避光保存;含血清完全培养液在2-8℃保存,并在2周内用完;分离培养物,检测支原体。冷冻管应如何解冻?取出冷冻管后,须立即放入37℃水槽中快速解冻,轻摇冷冻管使其在1-2分钟内大部分融化,特别注意,需残留一小块冰块,就可拿到超净工作台操作细胞,用75%酒精消毒冻存管,用新鲜培养基将细胞转移至培养瓶。另外冷冻管由液氮桶中取出解冻时,必须注意安全,预防冷冻管爆裂。
NUGC-3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:6传代
BRL-3A细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CCLP1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SPA-A1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW13细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HLCL9B10细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MHCC-97L细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KYSE-150细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
HUP-T3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
NCI-H2196[H2196]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
CHL细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H650[H650]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:1:5-1:10传代;每周换液2-3次。
乳糖-明胶培养基,英文名:Lactose-Gelatin Medium,用途:用于产气荚膜梭菌的乳糖、明胶生化试验
改良Camp-BAP琼脂基础,英文名:Camp-BAP Agar,Modified,用途:用于弯曲杆菌选择性分离,每100ml添加改良Camp-BAP琼脂基础添加剂A、改良Camp-BAP琼脂基础添加剂B各1支
麦康凯琼脂基础,英文名:MacConkey Agar Base,用途:不含碳水化合物,用于大肠杆菌的发酵研究
PW(蛋白胨水),英文名:Peptone Water,用途:用于样品制备
EC-MUG培养基,英文名:EC-MUG Medium,用途:用于大肠埃希氏菌计数
MD琼脂培养基,英文名:Minimal Dextrase Agar Medium,用途:用于酵母菌的筛选
LAN-5细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HPAF-II细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
EAhy926细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
GOTO细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:10^4 cells/ml
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
TE3细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
C8-D1A细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长 ;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
U373细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H125细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Z近在培养细胞时,发现其状态不是很好,很容易扎堆生长,用胰酶消化的时候也是一团一团地被消化下来,很难把它们吹散成一个一个细胞。而且长得也挺快也挺不均匀的,传代的第二天,有些地方就长得满满的了。想请教一下这是为什么呢?你好,我养的细胞和你一样,消化下来也是一团的,但吹打以后就没有这样的情况了。建议你分皿前还是要吹匀,分皿后在镜下看一看,移动培养皿的时候尽量动作轻,避免晃动。细胞生长挺快,那么细胞的增殖能力应该较强。胰酶消化成团的问题我觉得有以下几种可能:一、细胞消化后吹打不均匀,造成细胞成团生长:二、细胞细化太过,细胞成片脱落,吹打时没有受力点,细胞聚团生长。解决办法:根据细胞生长的情况进行多次消化,将同次消化下来的细胞放在一个细胞培养瓶内。贴壁细胞传代培养:一般步骤为:真空泵吸走培养基,1XPBS漂洗两次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿为例),37度放置数分钟,轻拍培养瓶使细胞自瓶壁脱落,加入适量血清,以吸管上下吸放数次以打散细胞团块,离心后加入新鲜培养基,按比例转移至新皿。细胞的传代Z重要的是胰酶处理时间,若胰酶处理太久,容易造成细胞贴壁不紧,显微镜下观察立体感不强,严重的时候甚至会造成细胞死亡。我谈谈个人经验:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901几种癌细胞处理时间可适当放长,一般处理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比较容易脱落,2min足矣,P19Cl6和293细胞贴壁不紧,可在PBS漂洗后,直接换新鲜培养基打散。
Hat-78细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人Anoctamin人10蛋白(ANO10)ELISA试剂盒,英文名:Human ANO10 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠层粘连蛋白(LN)ELISA试剂盒,英文名:LN ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠妊娠相关浆蛋白A(PAPPA)ELISA试剂盒,英文名:Mouse PAPPA ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠抗缪勒管激素(AMH)ELISA试剂盒,英文名:Mouse AMH ELISA Kit,规格:48T/96T
人白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒,英文名:Human IL12B ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠胆固醇调节元件结合蛋白(SREBP)ELISA试剂盒,英文名:SREBP ELISA Kit,规格:48T/96T
人双睾酮(DHT)ELISA试剂盒,英文名:Human DHT ELISA Kit,规格:48T/96T
人β-半乳糖苷酶(GLb)ELISA试剂盒,英文名:Human GLb ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒,英文名:EL ELISA Kit,规格:48T/96T
肠球菌肉汤,英文名:Enterococcus Broth,用途:用于肠球菌选择性菌
CDC厌氧菌琼脂基础,英文名:CDC Anaerobe Agar Base,用途:用于厌氧菌的分离培养,每100ml添加化血红素溶液和维生素K1溶液各1支,添加5-10%羊血(无菌脱纤维绵羊全血)
酵母碳源基础(YCB),英文名:Yeast Carbon Base,用途:用于通过氮源的利用对酵母菌进行分类
胰蛋白胨大豆琼脂/胰化大豆蛋白琼脂(TSA),英文名:Tryptic Soy Agar,用途:用于细菌的计数和培养
H4-II E细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Farage细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
Hs695T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞生长特性:贴壁生长
RS琼脂,英文名:Rimler-Shotts Agar,用途:用于致病性嗜水气单胞菌的分离
赖酸铁琼脂(LIA),英文名:Lysine Iron Agar,用途:用于赖酸脱梭、脱复合生化试验(FDA)
苏通琼脂培养基基础,英文名:Sauton Agar Medium Base,用途:用于结核杆菌的增菌培养和卡介苗的制备
桔汁肉汤(10倍浓缩),英文名:Orange Serum Broth Concentrate 10×,用途:用于耐酸细菌的培养
果蝇培养基,英文名:Drosophila Medium,用途:用于果蝇的培养
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性:上皮样
FLS细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HESMC细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人前列腺素I合成酶(PTGIS)ELISA试剂盒,英文名:Human PTGIS ELISA Kit,规格:48T/96T
人腺苷脱羧酶1(AMD1)ELISA试剂盒,英文名:Human AMD1 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠胸腺素β10(TMSβ10)ELISA试剂盒,英文名:TMSβ10 ELISA Kit,规格:48T/96T
人胰蛋白酶X3(TRYX3)ELISA试剂盒,英文名:Human TRYX3 ELISA Kit,规格:48T/96T
人LIM半胱酸丰富域蛋白1(LMCD1)ELISA试剂盒,英文名:Human LMCD1 ELISA Kit,规格:48T/96T
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,Z近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
YPD琼脂,英文名:YPD Agar,用途:用于分子生物学实验中酵母菌的培养和保存
曲霉菌基本培养基(AAM),英文名:Aspergillus Minimal Medium,用途:用于曲霉菌的培养
肝浸液肉汤,英文名:Liver Infusion Broth,用途:用于布鲁氏菌及其它苛养菌的培养
葡萄糖醋酸盐培养基,英文名:Dextrose Acetate medium,用途:用于真菌培养
Luria肉汤基础,英文名:Luria Broth Base,用途:用于大肠杆菌的培养和保存,视需要每升添加10ml20%葡萄糖