CHP-212人脑神经母细胞瘤细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料:详见相关文献介绍
SSP-25细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
GT1.1 /GT1-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮细胞样;细胞传代方法:1:2传代
STC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HLEC(淋巴)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
如何进行细胞复苏:1)从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化;2)从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;3)离心,1000rpm,5min;4)弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;5)次日更换一次培养液,继续培养。【温馨提醒】1)从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但Z好为对数生长期细胞。在冻存前一天Z好换一次培养液;2)将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作(戴棉手套),以免冻伤;3)冻存和复苏Z好用新配制的培养液。细胞复苏的时候,有些初次实验员将冻存管从液氮中取出后,放在室温下,经常发生冻存管爆炸,该怎么避免出现这种情况吗?其中在拧紧冻存管的时候是否有哪些细节要注意的?一般常用的方法是取出冻存管后在超净工作台中用酒精棉球擦试管口,再稍拧松盖子,再放37度水浴锅中摇溶,在将细胞转移到装有37度预热过的培养基的试管中,迅速离心,再用培养基洗一遍。
Hep-3B2.1-7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
BHK细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞样;细胞传代方法:1:2传代,每周换液1-2次。
LO2细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:3传代,2-3天传一代
NCI-H838[H838]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
MCF-7细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代,3-4天长满
143BTK-细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
U343细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
H.A.细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HMC-1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
FRH-0201细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
RT4-D6P2T细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:神经元 ;细胞传代方法:1:5—1:10传代
HL7702[L02]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞传代方法:1:10 1:50每2 - 3周;每周换液2-3次。
亚碲酸钾血琼脂基础,英文名:Blood Agar Base with Potassium Tellurite,用途:用于白喉杆菌分离培养,每90ml添加2支1%亚碲酸钾溶液和9ml 无菌脱纤维绵羊全血
卵黄化钠琼脂培养基基础,英文名:Egg Yolk Salt Agar Medium Base,用途:用于金黄色葡萄球菌选择性分离,每65ml添加2支10%化钠卵黄液
艰难梭菌选择性琼脂基础(CDA),英文名:Clostridium difficile Selective Agar,用途:用于艰难梭菌的选择性分离.每400ml添加1支D-环丝酸溶液、1支头孢西丁溶液、3支50%卵黄盐水悬液、4ml马血
LPM琼脂基础(含七叶苷与柠檬酸铁铵),英文名:LPM Agar with Esculin and Ferric Iron Base,用途:用于李氏菌选择性增菌,每100ml添加拉氧头孢溶液、β-乙醇各1支
pH7.4盐缓冲液(PBS),英文名:pH7.4 PBS Broth,用途:用于样品制备
酵母基酸缺陷型合成液体培养基(亮酸缺陷),英文名:Yeast Synthetic Drop-out Fluid Medium without Leuc,用途:用于酵母杂交及遗传突变株的筛选和研究
NCI-H1437[H1437]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
HT1080(HT-1080)细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
LICCF细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NIE-115细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
SUP-B1细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
T1-73细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:成纤维细胞;细胞传代方法:1:2-1:4传代;每周换液2-3次。
HUVEC-12细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
KASUMI-1细胞专业复苏;细胞生长特性:悬浮生长;细胞形态特性:原粒细胞;细胞传代方法:1:2传代。3天内可长满。
细胞培养中支原体污染的经验分享:支原体是一类缺乏细胞壁的原核细胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之间,呈高度多形性,有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞,也不同于病毒。支原体用普通染色法不易着色,用姬姆萨染色很浅,革兰染色为阴性。支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长,营养要求比细菌高。细胞培养(特别是传代细胞)被支原体污染是个世界性问题。在细胞培养中支原体感染发生率达到63%,支原体感染发生后能改变细胞的DNA,RNA及蛋白表达,又不能通过可视法对其进行检测,而且它对细胞的生长率影响较小,不易引起注意。国内外研究表明,95%以上是以下四种支原体:口腔支原体(M.orale)、精酸支原体(M.arginini)、猪鼻支原体(M.hyorhinis)和莱氏无胆甾原体(A.laidlawii),为牛源性。以上是Z常见的污染细胞培养的支原体菌群,但能够污染细胞的支原体种类是很多的,国外调查证明,大约有二十多种支原体能污染细胞,有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(一些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、污染支原体的细胞造成的交叉污染、实验器材带来的污染和用来制备细胞的原始组织或器官的污染。组织细胞培养工作中,主要从以下几个方面来预防支原体的污染:控制环境污染;严格实验操作;细胞培养基和器材要保证无菌;在细胞培养基中加入适量的抗生素。支原体污染细胞后,特别是重要的细胞株,有必要清除支原体,常用方法有抗生素处理、抗血清处理、抗生素加抗血清和补体联合处理。支原体Z突出的结构特征是没有细胞壁,一般来讲,对作用于细胞壁生物合成的抗生素,如万古霉素等完全不敏感;对多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺药物普遍耐药。对支原体Z有YZ活性及常用于支原体感染ZL的抗生素是四环素类、大环内酯类及一些喹诺酮;其他类抗生素如基糖苷类、霉素对支原体有较小YZ作用,所以常不用来作为支原体感染的化学ZL剂。
VERO细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁生长;细胞形态特性:上皮样;细胞传代方法:1:2传代
小鼠糖皮质激素受体beta(Gr-beta)ELISA试剂盒,英文名:Mouse Gr-beta ELISA Kit,规格:48T/96T
人上皮中性粒细胞激活肽78(ENA78)ELISA试剂盒,英文名:Human ENA78 ELISA Kit,规格:48T/96T
人Ⅲ型前胶原基端原肽(PⅢNP)ELISA试剂盒,英文名:Human PⅢNP ELISA Kit,规格:48T/96T
人减数分裂YZ因子1(MEI1)ELISA试剂盒,英文名:Human MEI1 ELISA Kit,规格:48T/96T
人信号传导转录激活因子1(STAT1)ELISA试剂盒,英文名:Human STAT1 ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠C肽(C-Peptide)ELISA试剂盒,英文名:Mouse C-Peptide ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠血小板衍化生长因子-α受体(PDGF-αR)ELISA试剂盒,英文名:PDGF-αR ELISA Kit,规格:48T/96T
人催乳素诱导蛋白(PIP)ELISA试剂盒,英文名:Human PIP ELISA Kit,规格:48T/96T
人糖原合成酶激酶3α(GSK3a)ELISA试剂盒,英文名:Human GSK3a ELISA Kit,规格:48T/96T
麦芽汁琼脂,英文名:Malt Extract Agar,用途:用于真菌的培养
Chapman Stone琼脂培养基,英文名:Chapman Stone Agar Medium,用途:用于金黄色葡萄球菌的分离培养
缓冲动力-盐培养基基础,英文名:Buffered Power-Nitrate Medium Base,用途:用于产气荚膜梭菌的盐还原试验,每200ml添加1支甘油
Leeming-Notman培养基基础,英文名:Leeming-Notman Medium,用途:用于马拉色菌的培养,每80ml添加1.6ml橄榄油
3T3swiss细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SW1088细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
SNU-886细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2传代
细胞生长特性:贴壁生长
动力-盐培养基(A法),英文名:Power-nitrate Medium,用途:用于细菌动力和盐还原试验
龙胆紫血液琼脂基础,英文名:Crystal Violet Blood Agar Base,用途:用于鼠疫杆菌的选择性培养,需添加无菌脱纤维绵羊全血
改良番茄汁琼脂培养基(改良TJA培养基),英文名:Tomato Juice Agar,Modified,用途:用于乳酸菌总数测定
结晶紫中性红胆盐琼脂(含葡萄糖和乳糖),英文名:Violet Red Bile Agar with Glucose and Lactose,用途:用于肠道菌选择性分离和计数
PS琼脂,英文名:Peptococcus Selective Agar,用途:用于消化球菌的分离培养
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性:成神经细胞
67NR细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
NCI-H211[H211]细胞专业复苏;细胞生长特性:贴壁或悬浮,详见细胞说明书部分;细胞形态特性:详见细胞说明书;细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
人谷酸半胱酸连接酶(GCLM)ELISA试剂盒,英文名:Human GCLM ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠Z-DNA结合蛋白1(ZBP1)ELISA试剂盒,英文名:Mouse ZBP1 ELISA Kit,规格:48T/96T
大鼠皮肤T淋巴细胞相关抗原(CTAGE)ELISA试剂盒,英文名:CTAGE ELISA Kit,规格:48T/96T
小鼠心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)ELISA试剂盒,英文名:Mouse H-FABP ELISA Kit,规格:48T/96T
人210kDa核孔蛋白(NUP210)ELISA试剂盒,英文名:Human NUP210 ELISA Kit,规格:48T/96T
细胞传代时消化的问题:可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态好与不好Z至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺好的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气啊。我后来对消化的方法进行了改良。争取做到因材施教呵呵。我称之为“四步消化法”。(以难消化细胞为例);具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍,(这是前奏,即为步,目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。即为第二步(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更好一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了。)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶与干净ZDT里备用,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(你也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比。)这是第三步。4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,呵呵。继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况你自己把握)。这是第四步。其实还可以有第五步,对于特别难消化的细胞和对胰酶特别敏感的细胞的话,你可以继续加第五步甚至第六步。为了细胞更好的状态,更漂亮的样子,没办法,你必须分多批多次消化,这样才能限度地将胰酶对细胞的损伤降到,保证细胞的状态能够。当然了,如果细胞是属于那种很容易消化的细胞,像RAW264.7,仅仅第二步就搞定了。就没必要第三步第四步了。这个是需要你在实验中能够自己用心去体会的。建议你接受一个新细胞时把各步消化的细胞分别培养起来做比较,去摸索好细胞对胰酶的要求。便于你后续实验的开展。将细胞消化分成这几步,除了是为了避免胰酶对细胞的损伤之外,还有一个更重要的作用就是,可以程度地把细胞吹打成单个单个的状态,不成片不连体。
滤膜肠球菌琼脂,英文名:Membrane-filter Enterococcus Selective Agar,用途:用于水或液体中肠球菌的滤膜法计数
改良McBride琼脂基础(MMA),英文名:McBride Agar Base,Modified,用途:用于李斯特氏菌的选择性分离
mTEC琼脂,英文名:m TEC Agar,用途:用于大肠杆菌的膜过滤法检测
胰蛋白月示琼脂,英文名:Tryptose Agar,用途:用于各种苛养微生物尤其是布氏杆菌的培养
D2a培养基,英文名:D2a Medium,用途:用于原生质体的培养,需添加5%椰子乳