RN-c大鼠皮层神经元细胞系 复苏技术经验丰富

RN-c大鼠皮层神经元细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：详见相关文献介绍
NCI-H358细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MeT-细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
DU145细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CCD-112CoN细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞培养实验中常见问题总结：1)一般客户拿到细胞后，应该注意什么？客户收到细胞后先不开盖，放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞后观察培养基的颜色和是否有漏液情况，显微镜下拍细胞100X，200X各一张)，排除细胞本身污染的情况；收到细胞未开封，出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。收到细胞时如无异常情况，请在显微镜下观察细胞密度，如为贴壁细胞，未超过80%汇合度时，将培养瓶中培养液吸出，留下10ml培养液继续培养；超过80%汇合度时，请按细胞培养条件传代培养。如为悬浮细胞，吸出培养液、1000转/分钟离心2分钟，吸出上清，管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。细胞消化液建议使用PBS配制，慎用Hanks液配制；2)快递细胞多久能到，是寄冻存的细胞还是复苏好的细胞？我们采用快递发货，一般外地2--3天，寄细胞前请确认当地温度，如果气温低于4度的，则采用邮寄冻存细胞；3)可否使用与原先培养条件不同之培养基？不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基，若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基，细胞大都无法立即适应，造成细胞无法存活；4)可否使用与原先培养条件不同之血清种类？不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源，所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生极大的影响。来自不同物种的血清，在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同，血清使用错误常会造成细胞无法存活。
ARH-77细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样　；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MEF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样；细胞传代方法：1：2传代
Colo-320细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HSC-6细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HFB细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HFF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：5—1：7传代
Hs 895.T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞；细胞传代方法：1：2-1：4传代，2-3天换液1次。
HKF细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CL-11细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
CCD-841 CoTr细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
JB6Cl30-7b细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：1：2传代
SW 982[SW-982,SW982]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
Schaedler肉汤，英文名：Schaedler Broth，用途：用于厌氧菌的增菌
绿脓菌素测定用培养基(PDP)基础，英文名：Pseudomonas Agar for Determine of Pyocyanin，用途：用于绿脓菌素测定,每100ml添加1ml甘油(甘油)
胱酸乳糖无电解质培养基(CLED)，英文名：C.L.E.D Medium，用途：用于泌尿系统致病菌的分离和培养,也可做深部培养的贮
心浸液琼脂，英文名：Heart Infusion Agar，用途：用于苛养菌的培养
本尼特琼脂，英文名：Benett’s agar，用途：用于链霉菌属的培养鉴定
现隐肉汤，英文名：Presence Absence Broth，用途：用于水中大肠菌群计数
HBEpiC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
293T细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：4-8传代；26-36小时1次
SNU-620细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HIT-T15细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
95-D细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟，1：2,3天内可长满
MES-SA细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：成纤维细胞样　；细胞传代方法：1：6-1：8传代；每周2-3次。
SL-29细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
KE-37细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
为了防止因污染或技术原因使长期培养功亏一篑，考虑到培养细胞因传代而迟早会出现变异，有时因寄赠、交换和购买，培养细胞从一个实验室转运到另一个实验室，的策略是进行低温保存。这对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。现简要介绍深低温保存法(-70℃~-196℃)的特点。细胞深低温保存的基本原理是：在-70℃以下时，细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于完全停止状态，故可以长期保存。细胞低温保存的关键，在于通过0~20℃阶段的处理过程。在此温度范围内，水晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。冻存细胞的复苏：冻存细胞较脆弱，要轻柔操作。冻存细胞要快速融化，并直接加入完全生长培养基中。若细胞对冻存剂(DMSO或甘油)敏感，离心去除冻存培养基，然后加入完全生长培养基中。直接铺板方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；直接用完全生长培养基铺板细胞。1ml冻存细胞使用10~20ml完全生长培养基。进行活细胞计数，细胞接种应该至少在3×10(5)活细胞/ml；培养细胞12到24小时，更换新鲜的完全生长培养基，去除冻存剂。离心方法：取出贮存细胞，37℃水浴中快速融化；把1到2ml冻存细胞加入到大约25ml完全生长培养基，轻轻混匀；以大约80x离心2到3分钟；弃去上清。在完全生长培养基轻轻再次悬浮细胞，并且进行活细胞计数。细胞铺板，细胞接种应该至少为3×10(5)活细胞/ml。细胞的分化：一个成年人全身细胞总数约1012个，可以区分为200多种不同类型的细胞：形态结构，代谢，行为，功能等各不相同。追根溯源，这么多种细胞均来自一个受精卵细胞。所以，通常把发育过程中，细胞后代在形态、结构和功能上发生差异的过程称为细胞分化。细胞分化发生在胚胎阶段，也发生在胎儿出生以后，乃至成人阶段。例如，人体血细胞的产生和分化，这个过程在人的一生中一直持续着。由旺盛生长不断分裂的细胞，转入分化，通常从细胞周期中G1期开始时一个确定的点G0点“逃逸”出细胞周期。旺盛生长分裂的细胞和各种分化了的细胞，它们的基因表达和代谢活动各不相同。
MC3T3-E1 Subclone 24细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人塑化剂(DBP)ELISA试剂盒，英文名：Human DBP ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠粘蛋白C(MUCC)ELISA试剂盒，英文名：MUCC ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠肽基脯酰顺反异构酶(PPI)ELISA试剂盒，英文名：PPI ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠CD14分子(CD14)ELISA试剂盒，英文名：CD14 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)ELISA试剂盒，英文名：MAPKAPK3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人成熟促进因子(MPF)ELISA试剂盒，英文名：Human MPF ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠CD5分子样蛋白(CD5L)ELISA试剂盒，英文名：Mouse CD5L ELISA Kit，规格：48T/96T
人抗神经节苷脂抗体(GMI)ELISA试剂盒，英文名：Human GMI ELISA Kit，规格：48T/96T
人流感病毒抗体IgG(FLU)ELISA试剂盒，英文名：Human FLU ELISA Kit，规格：48T/96T
曲霉素琼脂(AFPA)基础，英文名：AFPA Agar Base，用途：用于曲霉菌和寄生曲霉的分离培养，每100ml添加1支霉素溶液
改良FM琼脂，英文名：FM Agar, Modified，用途：用于梭杆菌的分离和培养
甘露醇化钠琼脂琼脂培养基，英文名：Mannitol Salt Agar，用途：ZG药典2015，用于金黄色葡萄球菌选择性分离
YM肉汤(酵母霉菌肉汤)，英文名：Yeast Mold Broth，用途：用于霉菌、酵母菌和其它耐酸菌的培养
JVM-2细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：1：3传代,2-3天传一代
SBC-5细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：每周换液2-3次。
MLE-12细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分
TTC营养琼脂，英文名：Nutrient Agar with TTC，用途：用于细菌总数测定
PALCAM琼脂基础，英文名：PALCAM Agar，用途：用于李氏菌分离,每100ml添加多粘菌素B溶液、头孢他啶溶液各1支
选择性APS肉汤基础/选择性APS LB肉汤基础，英文名：Select APS LB Broth Base，用途：非动物源配方,用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培养
胰蛋白月示琼脂，英文名：Tryptose Agar，用途：用于各种苛养微生物尤其是布氏杆菌的培养
AAM培养基，英文名：AAM Medium，用途：用于乳酸菌的培养
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：详见细胞说明书
RASMC细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
SK-N-BE(2)细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2传代
人γ-谷酰水解酶(γGH)ELISA试剂盒，英文名：Human γGH ELISA Kit，规格：48T/96T
人肌酐(Cr)ELISA试剂盒，英文名：Human Cr ELISA Kit，规格：48T/96T
人细胞程序性死亡蛋白1配体2(PDCD1LG2)ELISA试剂盒，英文名：Human PDCD1LG2 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA试剂盒，英文名：Mouse Methylase ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠T-细胞激活连接蛋白(LAT)ELISA试剂盒，英文名：Mouse LAT ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞培养实验相关问题总结：支原体(mycoplasma)污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之；支原体污染会对细胞培养有何影响？支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义；侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株；CO2培养箱之水盘如何保持清洁？定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之；为何培养基保存于4°C冰箱中，颜色会偏暗红色，且pH值会越来越偏碱性？培养基保存于4°C冰箱中，培养基内之CO2会逐渐溢出，造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果，将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时，可以通入无菌过滤之CO2，以调整pH值；购买之细胞冷冻管经解冻后，为何会发生细胞数目太少之情形？研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少，大都是因为离心过程操作上的失误，造成细胞的物理性损伤，以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心，应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可；购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因？研究人员在细胞培养时出现存活率不佳，常见原因可归纳为：培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后，加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C太久；收到之冷冻管瓶身破裂，瓶盖有裂纹，或瓶盖脱落之原因？冷冻管瓶盖裂纹，或瓶身破裂，可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当，造成冷冻管裂损，建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱，乃因热胀冷缩之物理现象，冷冻管有可能因此而造成细胞污染，故冷冻管于放入和取出液氮桶时，均应立刻将冷冻管再一次扭紧。
BBL琼脂培养基(双歧杆菌琼脂培养基)，英文名：BBL Agar Medium，用途：用于双歧杆菌分离培养
BSM无机盐培养基基础，英文名：BSM Medium Base，用途：用于酵母菌的表达,需添加、甘油及PTM1
厌氧卵黄琼脂基础，英文名：Anaerobic Egg Yolk Agar Base，用途：用于肉毒梭菌增菌分离,每100ml培养基中添加3支50%卵黄盐水悬液
马铃薯葡萄糖半固体琼脂，英文名：Potato Dextrose Semisolid Agar，用途：用于椰毒假单胞菌酵米面亚种检验
BL琼脂基础，英文名：BL Agar Base，用途：用于双歧杆菌的分离和培养,需添加5%脱纤维马血