G422小鼠脑神经胶质母细胞系 复苏技术经验丰富

G422小鼠脑神经胶质母细胞系 复苏技术经验丰富
细胞背景资料：1964年建株；甲基胆蒽植入Km小鼠脑内诱发星形细胞瘤，传至第120代后转为胶质细胞瘤；瘤细胞悬液同系小鼠皮下、肌肉、脑内移植，成功率皆。肌肉及脑内移植可形成较规律的移植性瘤株，存活时间脑内型15.9±4.8天；肌肉型20.3±6.6天。
HCC-1588细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2405[H2405]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MKN28细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MC3T3-E1 Subclone 4细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
造成实验室细胞污染常见情况总结：细胞培养中Z常见污染的是细菌、真菌和支原体污染。细胞一旦污染，大多数较难处理。那么，哪些情况我们不注意的话就会造成细胞污染呢？我们根据常见细胞培养实验分析总结下。【违规操作】1)为节省时间，有人已经用超净台四个多小时，不开紫外灭菌30min,酒精擦拭后直接开始试验；2)器材或者溶液很久没用，未检测是否污染而直接使用；离心管多次使用，枪头为了方便交叉使用；3)超净台不点酒精灯；点了酒精灯放在右上角，而你在左下角做试验；4)不带手套，徒手操作；5)细胞培养间配备枪式移液器、手术器械、离心机、冰箱等专用仪器设备以及专用的实验服和拖鞋，未定期消毒。专用物品被带出传代细胞使用。培养细胞过程中使用的所有实验用具，如移液管、一次性枪头、一次性塑料离心管、冻存管等未按要求灭菌使用(通常需121°C高压灭菌20分钟后37％烤干备用)。超净台和桌面，东西太多太乱：超净台不是储物箱，什么培养皿、各种规格的板子、枪头就不要堆在超净台！这样就会有许多紫外线顾不到的卫生死角。传代细胞其他的桌面，切忌东西堆积如山，不要将酒精棉球、标签纸、牛皮纸买来后全部堆在传代细胞！一不小心“飘”进你的细胞培养板里，细胞就会养的不好，啥时候死了都不知道！【培养箱太久没清洁】细胞污染了，并非直接扔了培养皿就不管了，首先你还得看看这个恒温培养箱里其他培养皿或孔板里的细胞是否污染，如果有而且好几个板子都有类似的污染块，那很可能是培养箱中的水或者空气污染了，得给培养箱做个大扫除，重新酒精消毒，照紫外；孵箱里的水，水没了要记得加，还得记得十天半个月的就用酒精擦擦托盘。【传代细胞人多口杂，难管理】在传代细胞这种卫生要求高，人多了，不确定因素多了，难以保证试验在无菌条件下操作。出入试验室，实验服当风衣穿，不扣纽扣，不戴，就容易造成细胞污染；超净台做实验时，喜欢说话聊着做试验，要是还不带口罩，里面就有很多细菌等着去攻击你的细胞呢！
CCC-HEH-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
C4-2细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RA FLSs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
TE-1细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
RAMSCs细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
HuH-7细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮样；细胞传代方法：消化3-5分钟。1：2。3天内可长满。
VERO C1008细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
U266B1/U266细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
MA-104细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
P30/OHK细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长；细胞形态特性：淋巴母细胞；细胞传代方法：10^5 cells/60mm dish
MOLT-16细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NRK细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代方法：1：2传代
乙酰胺琼脂(乙酰胺培养基)，英文名：Acetamide Agar，用途：用于绿脓杆菌分离培养
小牛浸液肉汤，英文名：Veal Infusion Broth，用途：用于苛养菌的培养
NT培养基，英文名：NT Medium，用途：含激素（6-BA、NAA），不含琼脂，用于原生质体的培养
明胶盐缓冲液，英文名：Gelatin PBS Broth，用途：用于肉毒梭菌和肉毒毒素检样的制备
NGKG琼脂基础，英文名：NGKG Agar Base，用途：用于蜡样芽胞杆菌的检测,每200ml添加2支50%卵黄盐水悬液和1支多粘菌素B溶液
25%甘油盐琼脂基础(G25N)，英文名：25% Glycerol Nitrate Agar Base，用途：用于霉菌的分离和培养，需添加25%甘油
DAKiKi细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
RPMI-7951细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞；细胞传代方法：1：2-1：4传代，2天换液1次。
C3A细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
MFE-280细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2传代
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
PK13细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁生长；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2—1：4传代，每周换液2—3次
HuH-28细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H2066[H2066]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1417[H1417]细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞传代的一般方法：开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全：一般主要有：细胞(单层细胞，镜检适合)、培养液(MEM-0.2%LH培养液或MEM培养液或199等适合细胞有要求的培养液)、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1万单位）、7.5％NaHC03溶液、0.25％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(100m1)、克氏瓶、胶塞、吸管(10ml、1m1）、细胞吹打管（20ml）(以上用具需经121℃至少15分钟高压灭菌)、C02 孵箱、超净台、倒置显微镜、4℃、-20℃冰箱；操作步骤：镜检细胞，挑选生长状态良好，细胞界限清晰，具有立体感，形态好无污染、无异常及可疑病变细胞。配制细胞培养液：按以下配比配制MEM-0.2%LH培养液100ml内，加入灭活小牛血清10m1，庆大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸钠溶液3ml。（仅供一般参考）。消化细胞；先用PBS洗液冲洗细胞表面1-2次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内加入0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液完全覆盖细胞表面。至细胞完全脱落到胰酶中。每瓶加入10m1细胞培养液吹打分散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再加入10m1细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4天成片。(由细胞接种浓度决定)；填写传代记录。
3T3NIH细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人环氧化合物水解酶3(EPHX3)ELISA试剂盒，英文名：Human EPHX3 ELISA Kit，规格：48T/96T
人白细胞介素4诱导蛋白1(IL4I1)ELISA试剂盒，英文名：Human IL4I1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人抗SS-B/La抗体(SS-B/La Antibody)ELISA试剂盒，英文名：Human SS-B/La Antibody ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠泼尼松龙(PS)ELISA试剂盒，英文名：PS ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠维生素D结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒，英文名：DBP ELISA Kit，规格：48T/96T
人髓分化因子88(MyD88)ELISA试剂盒，英文名：Human MyD88 ELISA Kit，规格：48T/96T
人重组激活基因2(RAG-2)ELISA试剂盒，英文名：Human RAG-2 ELISA Kit，规格：48T/96T
小鼠鞘醇1酯受体2(S1PR2)ELISA试剂盒，英文名：Mouse S1PR2 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠孕酮(PROG)ELISA试剂盒，英文名：PROG ELISA Kit，规格：48T/96T
GC琼脂基础，英文名：GC Agar Base，用途：用于致病性奈瑟氏菌的分离
曲霉菌基本培养基(AAM)，英文名：Aspergillus Minimal Medium，用途：用于曲霉菌的培养
4-甲基伞形酮葡糖苷酸(MUG)培养基，英文名：MUG Medium，用途：用于大肠埃希氏菌检验(ChP)
7.5%化钠肉汤，英文名：7.5%Sodium Chloride Broth，用途：——用于微生态活菌制品中金黄色葡萄球菌的检测
MPP 89细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
AAV-293细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：上皮细胞样；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
NCI-H1993细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
细胞生长特性：体内生长
改良McBride琼脂基础(MMA)，英文名：McBride Agar Base,Modified，用途：用于李斯特氏菌的选择性分离
Korser氏柠檬酸盐肉汤，英文名：Korser’s Citrate Broth，用途：用于柠檬酸盐利用实验
乳糖肉汤，英文名：Fluid Lactose Medium，用途：用于大肠菌群测定及沙门氏菌前增菌
MRS培养基/MRS琼脂(改良MRS培养基基础)，英文名：de Man, Rogosa an Medium(Modified MRS Medium Base)，用途：用于乳酸菌计数,改良MRS培养基每100ml需添加1支莫匹罗星锂盐储备液
AK琼脂2号，英文名：AK Agar #2（Sporulating），用途：用于检测牛奶和乳制品中抗生素残留时孢子液制备
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外大学建系
细胞形态特性：实体瘤
MC116细胞专业复苏；细胞生长特性：悬浮生长 ；细胞形态特性：淋巴母细胞样；细胞传代方法：每周换液2-3次。
PC-12未分化细胞专业复苏；细胞生长特性：贴壁或悬浮，详见细胞说明书部分；细胞形态特性：详见细胞说明书；细胞传代方法：1：2-1：3传代；每周换液2-3次。
人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA试剂盒，英文名：Human ALOX-5 ELISA Kit，规格：48T/96T
人乙醇脱酶2(ADH2)ELISA试剂盒，英文名：Human ADH2 ELISA Kit，规格：48T/96T
大鼠原纤维蛋白-1(FBN1)ELISA试剂盒，英文名：FBN1 ELISA Kit，规格：48T/96T
人优球蛋白(EL)ELISA试剂盒，英文名：Human EL ELISA Kit，规格：48T/96T
人肝再生增强因子(ALR)ELISA试剂盒，英文名：Human ALR ELISA Kit，规格：48T/96T
细胞的冻存：目前，细胞冻存Z常用的技术是液氮冷冻保存法，主要采用加适量保护剂的缓慢冷冻法冻存细胞。主要操作步骤为：(1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天Z好换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25%胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)。(2)去上清液，加入含20%小牛血清的完全培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为3×10(6)～1×10(7)/mL之间。(3)将上述细胞分装于安瓿或专用冷冻塑料管中，安瓿装1～1.5mL在火焰喷灯上封口，封口处要完全封闭，圆滑无勾。冷冻管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)。(4)将装好细胞的安瓿或冻存管装入沙布袋内;置于液氮容器颈口处存放过夜，次日转入液氮中。采用控制降温速度的方法也可采用下列步骤：先将安瓿置入4℃冰箱中2～3小时，再移至冰箱冷冻室内3～4小时，再吊入液氮容器颈气态部分存放2小时，沉入液氮中。细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，Z好取出一只安瓿细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。
KM8P培养基(不含激素)，英文名：Kao&Michayluk Medium without Hormones，用途：用于原生质体的培养
脱脂乳培养基，英文名：Skim Milk Medium，用途：用于乳酸杆菌的培养
幽门螺杆菌液体培养基基础，英文名：Helicobacter pylori Broth Medium Base，用途：用于幽门螺杆菌的增菌培养,每100ml添加1支幽门螺杆菌选择性添加剂和7ml无菌裂解马血
BIGGY琼脂，英文名：Bismuth Sulfite Glucose Glycine Yeast Agar，用途：用于念珠菌的分离和计数
YM琼脂(酵母霉菌琼脂)，英文名：Yeast Mold Agar，用途：用于霉菌、酵母菌和其它耐酸菌的培养